L'insulina per iniezione ed estrazione emolinfa per misurare la sensibilità all'insulina nei adulti Drosophila melanogaster</em
Summary
Segnalazione dell'insulina conservato percorsi trova nel moscerino della frutta<em> Drosophila melanogaster</em> Fanno di questo organismo un potenziale strumento per la modellazione di malattie metaboliche tra cui diabete di tipo II. A tal fine, è fondamentale per stabilire i test fisiologici per misurare in modo efficace azione sistemica all'insulina nello smaltimento del glucosio periferico nella mosca adulta.
Abstract
Conservati i meccanismi di rilevazione dei nutrienti esistono tra di mammiferi e moscerino della frutta dove peptidi simili all'insulina nei mammiferi e il glucagone, rispettivamente la funzione di mantenere l'omeostasi del glucosio durante lo sviluppo larvale 1,2 fasi. Studi sulla gran parte post-mitotico mosche adulte hanno rivelato perturbazione dell'omeostasi del glucosio come il risultato di ablazione genetica di insulin-like peptide (ILP), cellule che producono (IPC) 3. Così, moscerini della frutta adulti sono molto promettenti come un sistema idoneo modello genetico di malattie metaboliche tra cui diabete di tipo II. Per sviluppare ulteriormente il sistema di moscerino della frutta, paragonabile test fisiologici utilizzati per misurare la tolleranza al glucosio e la sensibilità all'insulina nei mammiferi devono essere stabiliti. A tal fine, abbiamo recentemente descritto una nuova procedura per la misurazione della risposta orale di tolleranza al glucosio nei mosca adulta e ha dimostrato l'importanza di IPC adulti nel mantenimento dell'omeostasi del glucosio 4,5. Qui, abbiamo modificato la procedura descritta in precedenza per l'iniezione di insulina 6 e combinato con un nuovo metodo di estrazione emolinfa per misurare la sensibilità periferica all'insulina nei mosca adulta. Unicamente, il nostro protocollo permette misurazioni dirette fisiologica della capacità della mosca adulta di disporre di un carico di glucosio periferico a seguito di iniezione di insulina, una metodologia che rende possibile caratterizzare mutanti segnalazione dell'insulina e gli interventi possibili riguardano tolleranza al glucosio e la sensibilità all'insulina nei mosca adulta.
Protocol
Discussion
La tecnica descritta in questo rapporto è potenzialmente utile in qualsiasi studio che indaga i processi fisiologici con conseguente alterazioni rilevabili nella composizione emolinfa Drosophila. Grazie alla combinazione di iniezione e la raccolta emolinfa in questo modo, è possibile accertare gli effetti immediati fisiologicamente rilevanti di un particolare trattamento sperimentale o manipolazione. Il vantaggio principale di questa tecnica "salasso" nella raccolta di emolinfa rispetto alle tecnich…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato sostenuto dalle concessioni dal NIA a YW.CF (AG21068, AG31086).
Materials
| Name of the reagent/equipment | Company | Catalogue number |
|---|---|---|
| Bovine insulin | Sigma | I5500 |
| Infinity Glucose Reagent | Thermo Electron Corporation | TR1541 |
| Manual microinjector | Sutter Instrument | |
| P-87 Flamming/Brown micropipette puller | Sutter Instrument | |
| Single barrel borosilicate capillary glass | A-M Systems | 626000 |
| FD&C Blue No. 1 | McCormick & Company | |
| 1 μl microcapillary tubes | Drummond | |
| Three-axis manual micromanipulator and base | World Precision Instruments |
References
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