Ограничивающим фактором в использовании взрослых<em> Drosophila</em> Глаза на исследование нейродегенерации и клеточной биологии трудно визуализации внутриклеточных процессов. Мы описываем вскрытия одного омматидии генерировать добросовестных первичной культуры клеток нейронов, которые могут быть предметом лечения наркозависимости и Advanced Imaging.
Abstract
Плодовой мушки дрозофилы сделал неоценимый вклад в неврологии исследования и широко используется в качестве образца для нейродегенеративных заболеваний из-за своей мощной генетике 1. Летать глаз, в частности, была органом выбор для нейродегенерации исследования, являясь самым доступным и жизни необязательной частью дрозофилы нервной системы. Однако основные предостережение интактных глаз трудности, из-за интенсивной флуоресценции от пигмента, в визуализации внутриклеточных событий, таких как аутофагии динамики 2, которые имеют огромное значение для понимания нейродегенерации.
Недавно мы использовали вскрытие и культура одного омматидии 3, что имеет огромное значение для нашего понимания autophagic нарушений в летают модель Dentatorubro-Pallidoluysian Атрофия (DRPLA) 3, 4.
Теперь отчет с подробным описанием этого метода (рис. 1), адаптированных с электрофизиологических исследований 5, который, скорее всего, значительного расширения возможности летать модели нейродегенерации. Этот метод может быть адаптирован к изображению живой субклеточных событий и следить за эффективным приемом препаратов на клетки фоторецепторов (рис. 2). При использовании в сочетании с мозаикой методов 6-8, ответы генетически различных клеток может быть проанализированы параллельно (рис. 2).
Protocol
1. Препарирование сетчатки дрозофил Заполните одну лунку 3-Ну стекло с фосфатным буферным раствором (PBS 1X), а затем анестезию пролетает CO 2. И мужчины и женщины могут быть использованы для этого эксперимента. Как только мухи под наркозом, забрать одну лету с помощью щ?…
Discussion
Одно рассечение омматидия представленные здесь коллекции позволяет более глубокой биологической ячейки информацию о процессах, как нейродегенеративные, когда моделируется в глазу дрозофилы. Фоторецепторных нейронов более доступной, чем в других нейронов и их цитоплазме особен…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Мы благодарим Бернар Charroux для дискуссий. Эта работа финансировалась KCL биомедицинских школы.