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방법 논문

진단 검시와 고양이와 마우스의 선택 조직 및 샘플 수집

84K 조회수

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DOI:

10.3791/2966

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2011년 8월 7일

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이 논문에서

요약

이 문서에서는 마우 스나 암흑의 기본적인 사후 심사를 실시를위한 절차 및 기본적인 장기의 수집뿐만 아니라, histological 미생물 및 PCR 평가에서 더 많은 도전 샘플 유형을 설명합니다.

초록

동물 식민지에 전염성이 에이전트를 진단하거나 찾을 수 있도록 도와 위해서는 euthanized 동물에서 수집될 수 있습니다 여러 샘플 종류가 있습니다. 자세한 histological 처리를위한 조직의 적절한 컬렉션 시험 결과의 품질에 영향을 미칠 수 있습니다. 이 문서는 마음의 식별, 간, 폐, 신장, 그리고 비장뿐만 아니라, 어떻게 그 장기를 수집하는 포함하는 기본적인 총 시험의 행위에 대해 설명합니다. 더 어려운 조직 / 샘플 수집 기법 또한 네이 증명하고 있습니다. 조직이 제대로 올바르게 수정하고 철저한 histologic 평가를 활성화하기 위해 조직의 내부 위해서 정착액로 증가 필요로 폐 수집 및 재관류 특히 도전하실 수 있습니다. 이 문서는 24 시간 이내에 조직의 최적의 고정을 달성하기 위하여 정착액으로 폐를 제거하고 그것을 팽창 단계 기술에 의해 단계를 보여줍니다. 조직이 부드럽고 쉽게 손상으로 두뇌 컬렉션 비슷하게 도전하실 수 있습니다. 이 문서에서는 조직에 최소한의 손상과 두개골의 두뇌를 폭로하고 제거하는 단계 기술에 의해 단계를 보여줍니다. mesenteric 림프절은 장용 바이러스가 그들이 배설물에 헛간보다 림프절에 이상 계속 많은 일반적인 전염성 요원을 감지할 수있는 좋은 예제 유형입니다. 이 문서 위치하고 무균 mesenteric 림프절을 제거하는 단계 절차에 의해 단계를 보여줍니다. 마지막으로, 호흡기의 감염 대리인의 신분은 세균성 문화 또는 비강 및 / 또는 기관지 유체가 검시에서 찍은 aspirates의 PCR 검사에 의해 수행할 수 있습니다. 이 절차를 취득하고 박테리아 문화와 PCR 검사에 대한 호흡기 대기음 샘플 준비에 대해 설명합니다.

프로토콜

1. 검시 준비

  1. 어떤 총 사후 심사 (총 검시)의 중요한 부분은 동물의 역사와 결과의 설명입니다.
  2. 귀하의 조직 병리학 슬라이드를 읽는 수의학 병리학자는 동물을 본적이 없을 수 있으며 배경 정보에 대해에 의존합니다.
  3. 정확하게 당신이 동물을 안락사 전에 뭐가 보이는지 설명해주십시오. 예를 들어, "여성 마우스, 새장에서 다섯 중 하나, C57BL/6N, 머리를 오른쪽으로 기울어져"또는 "갈색 남성 쥐, 변형 알 수없는, 꼬리 근처 dorsum에 누덕누덕 기운 탈모가 있으며, 동물 긁적이다 머리 ".
  4. 명확하고 설명하는 객관적 언어를 사용합니다. 레벨 사이의 단절이 명확 demarcated하는 경우에는 "중간", "온화"및 "심각한"로 조절이 유용할 수 있습니다. 음식이나 가정용 개체의 관점에서 기술한 것들은 일반적으로 권장하지 않습니다.
  5. 동물, 결과, 또는 장기 무게 및 측정하는 것은 종종 유용합니다. 당신에게 '큰 비장 "는 또 다른 관찰자로 정상적인 비장 수 있습니다. 비장은 3cm X 1.5cm보다 객관적인 정보를 제공 측정한다는.
  6. Photodocumentation은 매우 가치 수 있습니다.
  7. 모든 관련 산업 보건 및 살아있는 동물, 잠재적으로 전염성 시체, 또는 포....

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토론

연구의 끝에 데이터 컬렉션은 동물의 사후 검사가 필요할 수 있습니다. 본 어떤 잘 설명하고 모든 조직을 검사해야합니다. 이러한 절차는 감염증 감시에 대한 검시 및 샘플 수집을 최적화하기 위해 주로 설계 있지만 대부분 쉽게 절차의 아마 단지 일부가 고용 것입있는 의심 질병이나 사고 발생의 집중 조사에 적응하고 있습니다. 절차의 대부분은 또한 더 일반적으로 후속 분석을 위해 공부 특정 샘플의 수집과 함께 전반적인 형태학의 평가의 일환으로 조사 연구의 결론에서 수행 necropsies과 관련이 있습니다.

....

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공개 사항

저자는 이러한 서비스가 상업적으로 제공 찰스 리버의 연구실 설치류 진단 실험실의 모든 직원입니다.

재료

이 논문에 사용된 재료 목록
이름회사카탈로그 번호댓글
시약 이름 회사 카탈로그 번호 댓글
보드를 절단 온도 전자 코프 고양이 # 36114 고양이 # 36114
작은 가위 ROBOZ RS - 5910, G204 23mm 블레이드, 3.5 "길이, 스트레이트
중간 가위 ROBOZ RS - 6808, G207 5 "
대형 가위 ROBOZ RS - 6826, G65 " 6.25 "
집게 - 곡선 ROBOZ RS - 8254 (M1/21004) 4.5 ", 톱니 모양, 약간의 곡선
집게 - Microdissecting ROBOZ RS - 5238 허드슨 - (에발트)
집게 - 조직 집게 ROBOZ RS - 8160 랫 치아
화염 살균기 옥스포드 Labware 제품 Bacti - Cinerator # 5889-001007
외과용 메스 암 진단 주식 회사 핑거 Scalpels # 60, # 고양이 FS0060
Pipettes VWR 파스퇴르 Pipet 5 3 / 4 ", 고양이 # 14672-400
압력솥 가방 적절한 제조 회사 살균기 가방 용지 파우치 고양이 # 021002 (3100923) E09110 파스퇴르 pipettes에 대한
피펫 벌브 VWR 고양이 # 56310-240
Eppendorf 튜브 Sarstedt SafeSeal microtube의 2mL, 참조 # 72.695
Eppendorf 튜브 아르고스 5mL microtube 캣 # T20765 - C
주사기 BD (베크턴 디컨슨) 1ml - 309602 3 ML - 300910 5ml - 309603 10mL 캣 # 309604 20mL 고양이 # 309661
바늘 BD 26G - 18G - 309,625 305,195
중성 포르말린 버퍼 VWR 20L 10 % NBF, 고양이 # 16004-128
식염 ThermoScientific 버퍼 혈액 은행 살린​​, 고양이 # 23-309-178
Trypticase 간장 국물 백톤 디컨슨 TSB : 탈수, 고양이 # 211825
인산은 염분 버퍼 시그마 알드리치 HA 버퍼, 고양이 # P3813 - 10PAK
포르말린 컵 VWR 4온스 캣 # 36318-852 8온스 고양이 # 36318-860 16온스 고양이 # 36318-858
대형 포르말린 컵 오크 리지 제품 32온스 컨테이너 고양이 # 0432-1100
엑스트라 대형 포르말린 컵 VWR HDPE의 다목적 160온스 컨테이너 고양이 # 89038-282
봉합 재료 헨리 Schein 꼰 실크 수술 봉합, 심판 # 100-5000, M766750 마우스 폐 인플레이션에 대한
꼬기 스테이 플스 고양이 # ...로서 - 46173 쥐의 폐의 인플레이션에 대한

참고문헌

  1. AVMA. AVMA Guidelines on Euthanasia. , (2007).
  2. Feldman, D. B., Seely, J. C. Necropsy Guide: Rodents and the rabbit. , CRC Press. (1988).
  3. King, J. M., Dodd, D. C., Roth, L. The Necropsy Book. , 4th edn, C.L. Davis Foundation. (2006).
  4. Kittel, B. <....

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