発達研究のためのウィンドウ鶏卵
Summary
胚のアクセシビリティの容易さは、ニワトリウズラのキメラとフォーカル色素のラベリングを含めて、いくつかのアプローチを、使用して細胞の運命をマッピングするための実験を可能にした。この記事では、長い生存時間に対して最適化されている1個の卵の調製方法を示しています。
Abstract
開発の研究が大幅に実験モデルとしてニワトリ胚の使用によって促進されています。胚のアクセシビリティの容易さは、ニワトリウズラのキメラとフォーカル色素のラベリングを含めて、いくつかのアプローチを、使用して細胞の運命をマッピングするための実験を可能にした。さらに、それはタンパク質でコーティングされたビーズとOVOエレクトロで使用してプラスミドDNAの導入の配置などのいくつかの種類の分子摂動、することができます。これらの実験は、中枢および末梢神経系の発達に重要なデータが得られている。これらの研究の多くの場合、それは卵の殻を開いて、胚の成長を乱すことなく、それをrecloseする必要があります。胚は、卵殻を再度開くことにより、連続した発達段階で調べることができます。鶏の卵を開くためのいくつかの優れた方法がありますが、この記事では、長い生存期間のために最適化されている一つの方法を示しています。この方法では、卵はその側にかかっていると、小さなウィンドウがシェルにカットされます。実験手順の後に、シェルはその開発期間中の卵をカバーするために使用されます。卵殻を覆う透明なプラスチックテープは、胚を保護し、潜伏期間の残りの中に水和を保持するのに役立ちます。このメソッドは、インキュベーションの2日間の始まりを使用されており、成熟した胚古くから生存を可能にした。
Protocol
Discussion
このメソッドは、実験操作後の長期生存時間が可能になります。例えば、色素標識研究は、後に運命のマッピングの研究（1）E10またはに生存を許さ。さらに、それは後の発達段階（2-6）に進むために遺伝子の発現レベルと必要な開発の変化を提供するOVOエレクトロポレーション研究のために使用されています。このウィンドウテクニックは、胚への操作後の生存を必要とするすべての手順と組み合わせて使…
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Rotating incubator | Profi | Maintain at 37° Degrees with relative humidity set above 60% | ||
| 70 % EtOH | ||||
| gauze | ||||
| 3M plastic tape | ||||
| 10cc syringe | 1/egg | |||
| 18G needles | 1½ inch needle, 1/syringe | |||
| Dissection scissors | 4″ sharp straight blades | |||
| Fertilized Eggs |
References
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- Cramer, K. S., Bermingham-McDonogh, O., Krull, C. E., Rubel, E. W. . Dev Biol. 269, 26-35 (2004).
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