Cannulation של בלוטת הרוק באמצעות עכבר Submandibular Duct של וורטון
Summary
פרוטוקול עבור cannulation של בלוטת הרוק עכבר submandibular דרך צינור של וורטון מתואר. לצורך ניסוי זה, הפתרון כחול trypan משמש הצבעים כדי להדגים כיצד טכניקה זו יעילה מספק חליטות לתוך בלוטת ממוקד, ולהציע את האמינות של הגישה החדשה הזו כמו טיפול פוטנציאלי סמים / תא קליניות לגבי רגנרצית של בלוטות הרוק.
Abstract
בלוטת הרוק חמור hypofunction נמצא לעתים קרובות בחולים עם תסמונת סיוגרן ואלה שקיבלו טיפולי הקרנה בראש שלהם ואזורים הצוואר לטיפול בסרטן. שתי קבוצות של סימפטומים מהמטופלים חווים כגון xerostomia (יובש בפה), הבליעה (לקויי בלעיסה ובבליעה), עששת חמורה, טעם שונה, oro-בלוע זיהומים (קנדידה), mucositis כאב ואי נוחות.
גישה אחת חדשני של רפואה רגנרטיבית לטיפול בלוטת הרוק תת פונקציה משערים של RS רדמן, E Mezey et al 2009:. בתאי גזע ניתן להפקיד ישירות לתוך בלוטת ידי cannulation כשיטה עוצמה להחיות את הפונקציות של לקויי איברים. יש להניח, התאים נדדו גזע זר יהיה להתמיין לתאי הבלוטות לתפקד כחלק של בלוטת הרוק המארח. כמו כן, טכניקה זו cannulation היא שיטה המסירה רצוי ויעיל ליישום קליני גן ההעברה.
כאן אנו מדגימים את השלבים הכרוכים בביצוע ההליך cannulation על בלוטת הרוק עכבר submandibular דרך צינור של וורטון (איור 1). C3H עכברים (צ'ארלס ריבר, מונטריאול, QC, קנדה) משמשים עבור ניסוי זה, אשר נשמרו בתנאים רגילים נקיים במרכז אוניברסיטת מקגיל משאב בעל חיים. כל הניסויים אושרו על ידי ועדת טיפול בבעלי חיים באוניברסיטת היו בהתאם להנחיות המועצה הקנדית על בריאות בעלי חיים.
לצורך ניסוי זה, פתרון trypan הכחול הוא החדיר לתוך בלוטת באמצעות פתיחת צינור של וורטון באמצעות מזרק אינסולין עם מחט 29-מד עטוף בתוך צינור פוליאתילן. לאחר מכן, העכבר הוא גזור להראות כי חליטות היגרו לתוך בלוטת בהצלחה.
Protocol
Discussion
הקושי בשיטה זו cannulation היא למנוע backflow הפתרון מוזרק. גם אם הפתרון trypan כחול העביר זמנית לתוך בלוטת הרוק בהצלחה, הפרשת רוק עלולים להפריע לתהליך חליטות ולגרום backflow הפתרון trypan כחול מתוך בלוטת. כאמצעי זהירות, בנוסף לשימוש אטרופין כדי לדכא את הפרשת הרוק, את הצינורית פוליאתילן…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
המחברים מודים לד"ר אנה Cotrim להתייעצות טכניים ד"ר Monzur מורשד לציוד. עבודה זו הייתה חלק ממומן על ידי המכון הקנדי לחקר בריאות.
Materials
| Name of the reagent | Type | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Atropine | Drug | Fluka | 11330 | To inhibit saliva secretion |
| Ketamine | Drug | Phoenix Scientific | Sedation | |
| Xylazine | Drug | Phoenix Scientific | ||
| Polyethylene tubing (0.58 mm diameter) | Tube | Intramedic PE-10, Becton Dickinson Diagnostic Systems | 427410 | To insert over tip of needle to avoid tissue injury during insertion into Wharton’s duct. |
| Ultra Comfort Insulin syringe (with a 29G needle) | Syringe | Tyco Healthcare | 600145 | |
| 4% trypan blue | Stain | Gibco | 15250 |
References
- Fox, P. C. Acquired salivary dysfunction. Drugs and radiation. Ann N Y Acad Sci. 842, 132-137 (1998).
- Bhide, S. A., Miah, A. B., Harrington, K. J., Newbold, K. L., Nutting, C. M. Radiation-induced xerostomia: pathophysiology, prevention and treatment. Clin Oncol (R Coll Radiol). 21, 737-744 (2009).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotech Histochem. 84, 253-260 (2009).
