免疫组织化学(IHC)是一个有价值的技术,利用本地化/可视化在安装组织部分使用特异性抗体蛋白表达。有两种方法:直接和间接的方法。在这个实验中,我们只描述使用间接免疫组化染色。间接免疫组化染色采用高度特异性的小学和中学生物素标记的抗体。主要是利用抗体绑定到特定的抗原表位,谨慎识别感兴趣的蛋白质,而二级抗体减去非特异性背景染色和放大,形成抗体复合物的主信号。幻灯片可以生成从冰冻切片,或石蜡包埋切片装在载玻片上。在这个协议中,我们讨论准备石蜡包埋切片,脱蜡,酒精梯度水化,热诱导的抗原修复,并阻断内源性过氧化物酶的活性和非特异性结合位点。部分路段,然后与CD8 + T细胞标记的特定抗体染色,有的则是酪氨酸羟化酶染色。随后与适当的结合,以生物素的抗体治疗的幻灯片,然后开发利用与Diaminiobenzidine(“民建联”)为底物的抗生物素蛋白结合的辣根过氧化物酶(HRP)。发展,幻灯片counterstained的对比,并根据与permount盖玻片上。充分干燥后,这些幻灯片,然后成像。