인간의 모공에서 신경 크레스트 줄기 세포의 분리와 문화
Summary
이 문서는 인간의 모낭에서 신경 문장의 줄기 세포의 분리와 문화에 대한 강력한 프로토콜을 제공합니다.
Abstract
모낭은 평생 성장을 받아야과 헤어 사이클은 줄기 세포 증식 및 정지를 포함 잘 제어 과정입니다. 헤어 팽창은 성인의 줄기 세포 1에 대한 잘 특징 틈새 시장입니다. 바깥 쪽 루트 피복의이 부분은 상피 줄기 세포 2, melanocyte 줄기 세포 3 4-7 줄기 세포와 같은 신경 문장을 포함한 줄기 세포의 다른 유형의 번호를 포함하고 있습니다. 모낭은 인간 줄기 세포의 다른 유형에 대한 접근과 풍부한 소스를 나타냅니다. 우리와 다른 사람들은 4,5 인간의 태아 및 성인 모낭에서 신경 문장의 줄기 세포를 (NCSCs) 분리했습니다. 이러한 인간의 줄기 세포는 라벨 – 유지 전지이며, 체외에서 비대칭 세포 분열을 통해 자기 갱신 할 수 있습니다. 그들은이지나 신경 크레스트 세포 마커가 아닌 차별화 마커를 표현한다. 우리 식 프로파일 연구들은 손쥐 피부에 미숙 한 신경 cre와 유사한 유전자 발현 패턴을 공유했다성 세포. 그들은 체외 clonal 하나의 세포 배양에 후, myogenic melanocytic, 그리고 neuronal 세포 lineages을 야기 할 수 있습니다 clonal multipotency을 나타냅니다. 차별화 된 세포는 계보 (Lineage) – 특정 마커를 취득뿐만 아니라 전 생체 조건에 적합한 기능을 보여줍니다 없습니다. 또한 이러한 NCSCs는 중간 엽 lineages 대한 차별화의 잠재력을 보여줍니다. 차별화 된 neuronal 세포는 마우스의 뇌에 계속하고 neuronal 차별화 마커를 유지 할 수 있습니다. 그것은 머리가 NCSCs 신경 regrowth을 할 수 있습니다 파생 고치, 그리고 그들이 끊어 버렸네 척추 부상 8 다음이 줄기 세포를 이식 마우스에 모터 기능을 향상시키는 것이 보여왔다. 또한, 주변 신경은 줄기 세포 이식은 9, 눌린 좌골 신경에 인접 해 피부 파생 전구체 세포의 주입과 수리 된 remyelination 10 결과입니다. 따라서 헤어 대과 / 피부 파생 NCSCs은 이미 연구에 대한 긍정적 인 결과를 보여 주었다잠복기 모델 egenerative 치료.
유도 만능 줄기 (IPS) 셀에 재 프로그램 체세포는 재생 의료에 대한 엄청난 잠재력을 보여 주었다. 그러나, 특히 IPS 세포, 종양 유전자 / 바이러스 통합 만능 줄기 세포의 잠재적 tumorigenicity의 장기적 효과 아직 많은 문제를 적절하게 해결되지 않은이 있습니다. IPS 세포는 재생 의료에 사용하기 전에 극복 할 많은 장애물은 여전히 있습니다. 성인 줄기 세포는 안전한 것으로 알려져 있으며, 그들은 같은 골수 이식 등 많은 년에 임상 적으로 사용되었습니다 반면. 대부분의 환자는 이미 치료의 혜택을했습니다. Autologous 성인 줄기 세포는 아직 이식에 대한 선호 세포입니다. 따라서, 인간의 피부 / 머리카락 모낭에 쉽게 액세스 할 수 있으며 확장이 성인 줄기 세포는 재생 의료에 대한 가치있는 소스입니다.
Protocol
Discussion
설명 셀 절연과 문화 방법은 재현하고 강력한 있습니다. 우리는 폭 넓은 연령대에 걸쳐 개인의 수십에서 NCSCs를 생성했습니다. 그것은 바로 조직의 수확 후 조직을 처리하는 것이 좋습니다 있지만, 우리는 두피의 조직이 안전하게 세포 생존에 미치는 영향을 최소화 하루 아침에 교통 얼음의 미디어에 저장할 수 있습니다 것으로 나타났습니다.
이 항생제로 두피 조직을 치료?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
이 작품은 NIH 보조금 R01AR054593와 슈에 R01AR054593-S1에 의해 지원됩니다.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| DMEM | Invitrogen | 11965-092 |
| DMEM/F12 | Invitrogen | 11330-32 |
| Heat-inactivated FBS | Hyclone | SH30071.03 |
| B27 supplement | Invitrogen | 17504044 |
| N2 supplement | Invitrogen | 17502048 |
| bFGF | Invitrogen | PHG0026 |
| EGF | R&D system | 236-EG-01M |
| IGF-I | R&D system | 291-G1-050 |
| 0.05% Trypsin/EDTA | Invitrogen | 25300-054 |
| Dispase | Invitrogen | 17105041 |
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15070063 |
Table 1.
References
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