Kronisk innsnevring av isjiasnerven og Smerter Overfølsomhet Testing i Rats

Summary

På grunn av enkelheten i kirurgi og den robuste atferdsmessige utfall, er kronisk innsnevring av hoftenervene en av de fremste dyremodeller av nevropatisk smerte. Innen 24 timer etter operasjonen, er smerte overfølsomhet etablert og kan kvantitativt måles ved hjelp av en von Frey aesthesiometer (mekanisk test) og plantar analgesi meter (termisk test).

Abstract

Kronisk nevropatisk smerte, som følge av skade på sentrale eller perifere nervesystemet, er en utbredt og ødeleggende tilstanden, rammer 7-18% av befolkningen ^1,2. Symptomer inkluderer spontan (prikking, brenning, elektrisk støt og lignende) smerte, dysestesi, parestesi, allodyni (smerte som følge av normalt ikke-smertefulle stimuli) og hyperalgesia (en økt respons til smertefulle stimuli). De sensoriske symptomene er co-sykelig med atferdsvansker, for eksempel søvnløshet og depresjon. Å studere kroniske nevropatiske smerter flere dyremodeller etterligner perifer nerveskade har blitt utviklet, er en av de mest brukte Bennett og Xie (1988) unilateral hoftenervene kronisk innsnevring skade (CCI) ³ (figur 1). Her presenterer vi en metode for å utføre CCI og testing smerte overfølsomhet.

CCI er utført under narkose, med isjiasnerven på den ene siden utsettes ved å gjøre somkin snitt, og skjære gjennom bindevevet mellom gluteus superficialis og biceps femoris muskler. Fire Chromic gut ligaturer er knyttet løst rundt isjiasnerven på 1 mm mellomrom, å bare occlude men ikke arrestere epineural blod flyte. Såret er lukket med sting i muskel og stifter i huden. Dyret er da lov til å gjenopprette fra kirurgi i 24 timer før smertene overfølsomhet testing begynner.

For atferdsmessige testing, er rotter plassert i testing apparater og får lov til å tilvenne til testprosedyren. Området testet er mid-plantar overflaten av hindpaw (figur 2), som faller innenfor hoftenervene fordeling. Mekanisk tilbaketrekking terskel vurderes ved mekanisk stimulere både skadde og friske hindpaws ved hjelp av en elektronisk dynamisk plantar von Frey aesthesiometer eller manuell von Frey hår ^fire. Den mekaniske uttak Terskelen er maksimalt press(I gram) som utløser pote tilbaketrekning. For måling av termisk tilbaketrekking ventetid, først beskrevet av Hargreaves et al (1988), er hindpaw utsatt for en stråle av strålevarme gjennom et gjennomsiktig glass overflate ved hjelp av en plantar analgesi meter ^5,6. Tilbaketrekkingen latency til varmen stimulans er registrert som tiden for pote uttak i både skadde og friske hindpaws. Etter CCI, mekanisk tilbaketrekning terskel, samt termisk tilbaketrekking latens i den skadde labben er begge betydelig redusert, sammenlignet med baseline målinger og den friske Paw (figur 3). Den CCI modell av perifer nerve skade kombinert med smerter overfølsomhet testing gir en modell for å undersøke effekten av potensielle terapeutiske agenter for å endre kroniske nevropatiske smerter. I vårt laboratorium, bruker vi CCI sammen termisk og mekanisk følsomhet hindpaws å undersøke rollen av nevro-immune interaksjoner i patogenesenog behandling av nevropatisk smerte.

Protocol

1. Hoftenervene Kronisk Sammensnøring Aseptiske teknikker skal brukes for den kirurgiske prosedyren. Desinfiser kirurgisk arbeidsflaten med 70% etanol og forberede på forhånd sterile instrumenter (f.eks, fine sakser, pinsetter og inntrekking), gauzes, stifter og vattpinner ved autoklavering. For flere operasjoner, rengjøre og resteriliseres instrumenter med 70% etanol eller en tørr perle sterilisatoren mellom rotter. En kirurgisk maske, hår panser og sterile hansker. <p class="jove_c…

Discussion

CCI er et mye brukt perifer nerveskade modell av kroniske nevropatiske smerter. Det er relativt enkelt å utføre, og produserer robust og stabil smerte overfølsomhet i minst en måned etter skade. Etter CCI, rotter har unormal holdning av de skadde hindpaw (tær holdt sammen og plantar-bøyd og labben øyelokkene snur seg utover), samt gjentatt risting, vokter og slikking av den skadde hindpaw antyder tilstedeværelsen av spontan smerte ^9. I tillegg til sensorisk dysfunksjon, har flere etterforskere vist at…

Materials

Name of the reagent/equipment	Company	Catalogue number	Comments
Chromic gut	Ethicon	G-211	4-0 thickness
Isoflurane	Delvet Pty. Ltd., Seven Hills, NSW	n/a
Mersilk	Ethicon	W-580	5-0 thickness
Autoclip	Becton Dickinson	427631	9 mm stainless steel
Riodine	Orion	R1000802F	1% w/v iodine
Thermal plantar analgesia instrument	Ugo Basile	37370
Dynamic plantar aesthesiometer	Ugo Basile	37400