Syftet med denna artikel är att beskriva användningen av en ortotopisk glioblastom modell för chemoradiation studier. Denna artikel kommer gå igenom cellbearbetningen, implantera och strålbehandling av musen med en intrakraniell modell.
Glioblastoma multiforme (GBM) är den vanligaste och aggressiva vuxna primära hjärntumörer 1. Under senare år har det skett betydande framsteg i förståelsen av mekanik av tumör invasion, och direkt intracerebral inokulering av tumör ger möjlighet att observera invasiva processen i en fysiologiskt lämplig miljö 2. När det gäller de mänskliga hjärntumörer gäller är ortotopisk modellerna för närvarande finns tillgängliga antingen genom stereotaxisk injektion av cellsuspensioner eller implantera en solid bit av tumören genom en komplicerad kraniotomi förfarande 3. I vår teknik vi skörda cellerna från vävnadskultur för att skapa en cellsuspension användes för att implantera direkt in i hjärnan. Varaktigheten av kirurgi är ca 30 minuter, och som musen måste vara i ett konstant kirurgisk plan, är en injicerbar bedövningsmedel. Den mus placeras i en stereotaxisk jigg genom Stoetling (figur 1). AftER det kirurgiska området renas och beredas, görs ett snitt, och om bregma är belägen för att bestämma läget av kraniotomi. Placeringen av kraniotomi är 2 mm till höger och 1 mm rostralt om bregma. Djupet är 3 mm från ytan av skallen, och cellerna injiceras med en hastighet av 2 pl var 2 minuter. Huden sutureras med 5-0 PDS och musen är tillåten att vakna upp på en värmedyna. Enligt vår erfarenhet beroende på cellinjen, kan behandlingen ske från 7-10 dagar efter operation. Avgivning av läkemedel är beroende av läkemedelskompositionen. För strålbehandling mössen bedövas, och placerades i en skräddarsydd jigg. Bly täcker musens kropp och exponerar endast hjärna musen. Studiet av tumörbildning och utvärdering av nya terapier för GBM kräver noggranna och reproducerbara hjärnan modellerna tumör djur. Sålunda vi använder detta ortotopisk hjärnan modell för att studera interaktionen av mikroomgivningen av hjärnan och tumören, för att testa effectivenESS i olika terapeutiska medel med och utan strålning.
Maligna gliom, såsom glioblastoma multiforme, representerar de vanligaste primära hjärntumörer och har en dyster prognos 4. Överlevnaden hos patienter som drabbats av GBM har förblivit i stort sett oförändrad under det senaste decenniet (dvs, 9-12 månader efter diagnos) Trots framsteg inom kirurgi, strålning och kemoterapi 5. Funktionerna i en lämplig modell för studier av gliom behandlingen ska innehålla en reproducerbar tumörplacering och tillväxt av cellerna som en relativt diskre…
The authors have nothing to disclose.
Denna forskning stöds av finansiering från Interna program NIH.
Lab Standard Stereotaxic Instrutment | Stoelting Mouse and Rat Adaptor |
Betadine | 100% EtOH |
70% EtOH | 50% Acetone |
6″ Q-tips | Alcohol swabs |
Hamilton syringe 80008 | Ethicon 5-0 PD |
1701 SN 31-33G/1″/PT3 needle | 1 ml syringes |
25G needles | Heating pad |
Artificial Tears Ointment | Very fine tipped permanent marker |