फास्ट स्कैन चक्रीय Voltammetry के साथ Striatal मस्तिष्क स्लाइसें में presynaptic Dopamine गतिशीलता
Summary
Striatal मस्तिष्क स्लाइसें में विद्युत पैदा presynaptic डोपामाइन गतिशीलता को मापने के लिए तेजी से स्कैन चक्रीय voltammetry का उपयोग.
Abstract
व्यापक अनुसंधान neurotransmitter dopamine के दुरुपयोग की दवाओं (जैसे कोकीन और एम्फ़ैटेमिन), मानसिक बीमारियों में यह भूमिका निभाता है (जैसे एक प्रकार का पागलपन और ध्यान घाटे विकार), और अपक्षयी में अपनी भागीदारी की कार्रवाई के तंत्र में इसके महत्व की वजह से ध्यान केंद्रित किया है पार्किंसंस और Huntington रोग की तरह विकारों. सामान्य शारीरिक शर्तों के तहत, डोपामाइन हरकत गतिविधि, अनुभूति, सीखने, भावनात्मक को प्रभावित, और neuroendocrine हार्मोन स्राव को विनियमित करने के लिए जाना जाता है. Dopamine न्यूरॉन्स की सबसे बड़ी घनत्व striatum, जो दो अलग neuroanatomical नाभिक accumbens और पूंछवाला – putamen के रूप में जाना जाता क्षेत्रों में विभाजित किया जा सकता है के भीतर है. उद्देश्य माउस striatum के भीतर टुकड़ा तेजी से स्कैन चक्रीय voltammetry (FSCV) के लिए एक सामान्य प्रोटोकॉल वर्णन है. FSCV एक अच्छी तरह से परिभाषित विद्युत घ में वास्तविक समय में dopamine के रिलीज और तेज उपाय करने का अवसर प्रदान तकनीकiscrete मस्तिष्क क्षेत्रों. कार्बन फाइबर microelectrodes (~ 7 सुक्ष्ममापी के व्यास) FSCV डोपामाइन ऑक्सीकरण का पता लगाने में उपयोग किया जाता है. FSCV का उपयोग करने dopamine का पता लगाने के विश्लेषणात्मक लाभ 100 मिसे और कम से कम दस microns के स्थानिक संकल्प, vivo microdialysis में पूरक जानकारी उपलब्ध कराने की अपनी बढ़ाया अस्थायी समाधान है.
Protocol
Discussion
यहाँ प्रस्तुत प्रोटोकॉल को दर्शाता है कैसे तैयार और FSCV प्रयोगों के लिए माउस राज्याभिषेक मस्तिष्क स्लाइसें का उपयोग. 11 – हालांकि इस पद्धति डोपामाइन गतिशीलता को प्राप्त करने और मापने के लिए विशिष्ट ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
शराब सेवन और शराब पर राष्ट्रीय संस्थान (ए.ए., 016,967 और AA016967-01S1, NIAAA टीएएम) द्वारा प्रदान की अनुदान, वेन स्टेट यूनिवर्सिटी धन शुरू, और वेन स्टेट यूनिवर्सिटी अनुसंधान अनुदान कार्यक्रम. सामग्री केवल लेखकों की ज़िम्मेदारी है और NIAAA या स्वास्थ्य के राष्ट्रीय संस्थान के आधिकारिक विचार का प्रतिनिधित्व नहीं करता है.
Materials
| Name | Company | CAS number |
Reagent |
||
Potassium Chloride |
Fisher | 7447407 |
Sodium chloride |
EMD Chemicals | 7647145 |
Magnesium chloride |
Fisher |
7791186 |
Calcium chloride |
Fisher |
10035048 |
Sodium bicarbonate |
EMD Chemicals |
144558 |
Sodium phosphate,Dibasic |
EMD Chemicals |
7558794 |
D-glucose |
Fisher |
50997 |
Ascorbic acid |
Fisher |
50817 |
Sucrose |
Fisher |
57501 |
|
|
|
Materials |
Vendor |
Catalogue number |
Carbon fiber |
Goodfellow Oakdale, PA | |
Glass capillary |
A-M Systems Carlsborg WA. | 602000 |
Silver wire |
A-M Systems Carlsborg WA. | 787000 |
Tungsten stimulating electrode |
Plastics One, Roanoke, VA | |
Platinum wire |
||
Lead wire |
Squires Electronics, Cornelius, OR | |
Loctite 404 instant adhesive |
Hankal Corp. Rocky Hill CT. |
|
Razor blade |
World precision Instruments Inc. FL. | |
BD Spinal needle |
BD Medical systems, Franlin Lake, NJ |
REF 405234 |
Surgical Blade |
Feather Safety razor Co. LTD. Japan | |
|
||
Software |
Vendor |
Catalogue number |
TH software |
ESA Inc.,Chelmsford, MA | |
Instrument |
Vendor |
Catalogue number |
Submersion recording chamber |
Custom Scientific, Denver, CO | |
Neorolog stimulus isolator |
Digitmeter, Hertfordshire, England | |
Automatic temperature controller |
Warner Instrument Corporation | |
Microscope (SZX7) |
Olympus | |
Microscope |
Fisher | |
Vibratome 3000 sectioning system |
St. Louis , MO. | |
Perfusion pump |
Watson Marlow Limited, Falmouth Cornwall – England | H110708 |
Micropipette puller |
Narishige, Tokyo, Japan | |
ChemClamp potentiostat |
Dagan Corporations, Minneapolis, MN. |
References
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