في هذا البروتوكول ما جمعنا رني بوساطة إسكات الجينات مع<em> في الجسم الحي</em> فحص إدرار البول لدراسة آثار ضربة قاضية للجينات من لديه مصلحة في إفراز السائل البعوض.
Abstract
هذا الفيديو يشرح بروتوكول تقنية فعالة لضربة قاضية جين معين في حشرة وإجراء الاختبار الأحيائي رواية لقياس معدل الإفراز. ويمكن استخدام هذه الطريقة للحصول على فهم أفضل لعملية إدرار البول في الحشرات ويكون مفيدا بشكل خاص في دراسة إدرار البول في الدم والتغذية المفصليات التي تكون قادرة على حمل كميات كبيرة من السوائل في وجبة دم واحدة.
وقد تم تطوير هذا الجين رني ضربة قاضية بوساطة مقترنة في فحص إدرار البول المجراة من قبل مختبر هانسن إلى دراسة آثار رني بوساطة ضربة قاضية للجينات aquaporin على إدرار البول الزاعجة البعوض بعوض1.
البروتوكول هو الإعداد في جزأين: أول مظاهرة يوضح كيفية بناء حقن البعوض جهاز بسيط، وكيفية تحضير وحقن الرنا المزدوج الجديلة في الصدر من البعوض لضربة قاضية الجينات [رني بوساطة. المظاهرة الثانية يوضح كيفية تحديدمعدلات إفراز في البعوض باستخدام الأحيائي في الجسم الحي.
Protocol
الجزء الأول – [رني ضربة قاضية بوساطة الجينات في البالغين البعوض الزاعجة المصرية. لمحة عامة تجربة انظر الشكل 1. 1. الرنا المزدوج الجديلة التجميعي توليف dsRNAs محددة ضد جينا?…
Discussion
وقد تم تطوير بروتوكول رني المستخدمة في المختبر من Raikhel الكسندر في جامعة ريفرسايد في كاليفورنيا 6،7 و هو مماثل لبروتوكول نشرته جارفر وDimopoulos 4. ويمكن استخدام المنهج التجريبي هو مبين في هذا البروتوكول الفيديو لدراسة الجينات المسؤولة عن إدرار البول حشرة في ال?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
المؤلفان بالشكر فيكتوريا كاربنتر للتعليق لها حاسم من هذا البروتوكول.
Drake, L. L., Price, D. P., Aguirre, S. E., Hansen, I. A. RNAi-mediated Gene Knockdown and In Vivo Diuresis Assay in Adult Female Aedes aegypti Mosquitoes. J. Vis. Exp. (65), e3479, doi:10.3791/3479 (2012).