Мы представляем микрофлюидных подход к экспрессии белка массивов. Устройство состоит из тысяч реакционных камерах контролируется микро-механических клапанов. Микрофлюидных устройство соединяется с микрочипов печатных библиотеки генов. Эти гены затем расшифрованы и переведены на-чипе, в результате чего белок массива готово для экспериментального использования.
Abstract
Быстро растущая областях, таких как биология систем, требующих разработки и внедрения новых технологий, обеспечивая высокую пропускную способность и высокую точность измерений больших систем. Microfluidics обещает выполнить многие из этих требований, таких как выполнение высокой пропускной экспериментов скрининга на-чипе, охватывающий биохимических, биофизических и клеточных анализов 1. С первых дней устройства микрофлюидики, это поле резко эволюционировали, что приводит к развитию микрофлюидных масштабная интеграция 2,3. Эта технология позволяет интегрировать тысяч микромеханических клапанов на одном устройстве с почтовую размера следа (рис. 1). Мы разработали высокой пропускной микрофлюидных платформой для создания в пробирке экспрессии белка массива (рис. 2) имени PING (белковые взаимодействия сети Generator). Эти массивы могут служить в качестве шаблона для многих экспериментовтаких как белок-белковых 4, белка-РНК 5 или белок-ДНК 6 взаимодействий.
Устройство состоит из тысяч реакционных камер, которые индивидуально запрограммировать с помощью microarrayer. Выравнивание этих печатных микрочипы для устройств микрофлюидики программ каждой камеры с одного места ликвидации возможного загрязнения или перекрестной реактивности Кроме того, создание микрочипов с использованием стандартных методов микрочипов кровянистые выделения также очень модульной, что позволяет выстроив белков 7, ДНК-8, малых молекул, и даже коллоидные суспензии. Потенциальное воздействие на микрофлюидики биологических наук является значительным. Число микрофлюидики на основе анализа уже представили новые идеи в структуре и функции биологических систем, и поле микрофлюидики будет продолжать влиять на биологию.
Protocol
1. Устройство изготовления Приобретенные DTPA-D SU-8 формы контроля и SPR220-7 потоке формы из Стэнфордского Microfluidics Foundry ( www.stanford.edu / группы / литейный ). Expose силиконовые формы для хлортриметилсилана (TMCS) паром в течение 10 мин для содействия эластом?…
Discussion
В этой статье мы представляем метод для генерации белка массивов в высокой пропускной способности, используя микрофлюидных платформы. Массив поколения на основе микрочипов печати ДНК шаблоны и в пробирке экспрессии белка с ДНК в микрофлюидных устройства.
Наш рома…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Эта работа была поддержана Мари Кюри международной интеграции гранта.
Glick, Y., Avrahami, D., Michaely, E., Gerber, D. High-throughput Protein Expression Generator Using a Microfluidic Platform. J. Vis. Exp. (66), e3849, doi:10.3791/3849 (2012).