L'utilisation de la cystomanométrie chez les petits rongeurs: une étude de la vessie Chemosensation
Summary
Cystomanométrie est une technique efficace pour mesurer la fonction de la vessie de petits animaux<em> In vivo</em>. La vessie est perfusé en continu à des vitesses contrôlées par un cathéter intra-vésicale, tandis que l'urètre est laissée libre pour la miction. Ceci permet de répétition de remplissage et de vidange de la vessie, tandis que la pression intravésicale volume évacué et sont enregistrées.
Abstract
<p class="jove_content"> Les voies urinaires inférieures (LUT) fonctionne comme un réservoir dynamique qui est capable de stocker l'urine et pour mieux l'expulser à un moment opportun. Tout en stockant l'urine, cependant, la vessie est exposée pendant des périodes prolongées à des produits de déchets. En agissant comme une barrière étanche, l'épithélium de la LUT, l'urothélium, évite les ré-absorption de substances nocives. En outre, les produits chimiques toxiques stimuler innervation nociceptive de la vessie et la miction initier des contractions qui expulsent le contenu de la vessie. Fait intéressant, la sensibilité de la vessie à des produits chimiques nocifs a été utilisé avec succès dans la pratique clinique, par voie intravésicale infusant la capsaïcine TRPV1 agoniste pour traiter l'hyperactivité vésicale neurogène<sup> 1</sup>. Cela met en évidence l'avantage de visualiser la vessie comme un organe chimiosensorielle et vous invite à la recherche clinique supplémentaire. Toutefois, les questions éthiques limitent sérieusement les possibilités d'effectuer, sur des sujets humains, les mesures invasives qui sont nécessaires pour élucider les bases moléculaires de pharmacologie clinique LUT. Une façon de surmonter cette limitation est l'utilisation de plusieurs modèles animaux<sup> 2</sup>. Nous décrivons ici la mise en œuvre de la cystomanométrie chez les souris et les rats, une technique qui permet de mesurer la pression intravésicale dans des conditions de perfusion contrôlée vessie.</p><p class="jove_content"> Après laparotomie, un cathéter est implanté dans le dôme de la vessie et un tunnel sous-cutané dans la région interscapulaire. Puis la vessie peut être rempli à une vitesse contrôlée, tandis que l'urètre est laissée libre pour la miction. Au cours des cycles répétitifs de remplissage et de la miction, la pression intravésicale peut être mesurée par le cathéter implanté. En tant que tel, les changements de pression peuvent être quantifiés et analysés. En outre, la mesure simultanée du volume annulée permet de distinguer les contractions miction de non-mictionnels contractions<sup> 3</sup>.</p><p class="jove_content"> Il est important, en raison des différences dans le contrôle de la miction entre les rongeurs et les humains, les mesures cystométriques chez ces animaux n'ont qu'une valeur limitée translationnelle<sup> 4</sup>. Néanmoins, ils sont tout à fait contribué à l'étude de la physiopathologie de la vessie et de la pharmacologie dans expérimentales précliniques paramètres. Des recherches récentes utilisant cette technique a révélé le rôle clé de nouveaux acteurs moléculaires dans les propriétés mécano-et chimio-sensoriels de la vessie.</p>
Protocol
1. Animaux de laboratoire Animaux (souris, rats) sont logés dans une animalerie spécialisée avec un 12-hr cycle lumière-obscurité et l'accès ad libitum à l'eau et boulettes de nourriture standard. L'âge et le sexe des animaux sont des paramètres importants qui devraient être normalisés en fonction des besoins. Nous effectuent généralement la cystomanométrie de 10 – 12 semaines les femelles âgées 5,6. Toutes les expériences sur les animaux sont effectu…
Discussion
La technique présentée ici cystomanométrie permet d'effectuer des mesures in vivo de la fonction de la vessie chez des modèles animaux. Les rats sont probablement le modèle animal le plus utilisé. Les souris sont plus difficiles à manipuler, mais offrent l'avantage de l'utilisation d'animaux génétiquement modifiés. En raison de la difficulté technique de l'utilisation des souris conscientes, qui ont tendance à être très actif résultant de relâchement du cathéter imp…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce travail a été soutenu par des subventions du gouvernement fédéral belge (PAI P6/28), la Fondation de la recherche-Flandre (FWO) (G.0565.07 et G.0686.09), la Fondation européenne Astellas Award 2009 et le Conseil de recherche de la KU Leuven (GOA 2009/07, EF/95/010 et PFV/10/006). PU et nous sommes doctorants de la Fondation de la recherche-Flandre (FWO). MB est un boursier Marie Curie. DDR un homme fondamental, clinique du FWO.
Materials
| Name of the reagent | Commercial name, company, | Catalogue number | Comments |
| urethane | Urethane, Sigma-Aldrich | 315419 | group 2B carcinogen |
| isoflurane | Isoba, Schering-Plough Animal Health | ||
| polyethylene catheter | Intramedic Polyethylene tubing PE50, Becton Dickinson | 427411 | |
| surgical microscope | Op-Mi 6, Carl Zeiss | Op-Mi 6 | |
| purse-string suture | Prolene 6/0, Ethicon | 8610H | |
| fascia and skin suture | Ethilon 4/0 or 5/0, Ethicon | 662G or 661G | |
| postoperative analgesics | Temgesic, Schering-Plough Animal Health | dosage for rats: 0.05 mg/kg | |
| amplifier | 78534c monitor, Hewlett Packard | ||
| analytical balances and balance data acquisition software | FZ 300i, A&D | FZ-300i | |
| infusion pumps | pump 33, Harvard apparatus | HA33 | |
| cystometry recording system | Dataq instruments, DI-730 series and Windaq/Lite | DI-730-USB Windaq/Lite | |
| temperature registration | Fluke 52 KJ thermometer | 52 KJ | |
| pressure transducers | Edwards Lifesciences, pressure monitoring set | T322247A |
References
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Cite This Article
Uvin, P., Everaerts, W., Pinto, S., Alpízar, Y. A., Boudes, M., Gevaert, T., Voets, T., Nilius, B., Talavera, K., De Ridder, D. The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation. J. Vis. Exp. (66), e3869, doi:10.3791/3869 (2012).