Do-It-Yourself Dispositivo de Recuperação de amostras criopreservadas cair acidentalmente em Tanques de armazenamento criogênico

Summary

Aqui nós apresentamos um baixo custo, durável cryotolerant dispositivo para a recuperação de amostra de Dewar tanques cheios de nitrogênio líquido. A facilidade de construção e design modular do dispositivo faz com que o processo de recuperação da amostra de tanques criogênicos seguro e fácil.

Abstract

O nitrogênio líquido é incolor, inodoro, extremamente frio (-196 ° C) líquido mantido sob pressão. É comummente usado como um fluido criogénico para armazenamento a longo prazo de materiais biológicos tais como sangue, células e tecidos ^1,2. A natureza criogénico de azoto líquido, enquanto ideal para a preservação da amostra, pode causar congelação rápida dos tecidos vivos em contacto – conhecido como 'criogénico queimadura' ^2, o que pode levar a queimaduras graves em pessoas intimamente envolvidas no armazenamento e recuperação de amostras de Dewars. Além disso, como o azoto líquido evapora que reduz a concentração de oxigénio no ar e pode causar asfixia, especialmente em espaços confinados ^2.

Nos laboratórios, amostras biológicas são frequentemente armazenados em criotubos ou cryoboxes empilhados em prateleiras de aço inoxidável dentro dos tanques de Dewar ^1. Estes suportes de armazenamento são fornecidos com um eixo de tempo para impedir caixas de deslizar para fora dos suportes e na parte inferior doDewars durante o manuseio de rotina. Com demasiada frequência, no entanto, caixas ou frascos com amostras preciosas escorregar e afundar até o fundo do tanque de nitrogênio líquido preenchido. Em tais casos, as amostras podem ser tediosamente recuperada após a transferência do azoto líquido para um recipiente de reserva ou descartá-lo. As caixas e frascos pode então ser recuperado a partir com relativa segurança Dewar esvaziado. No entanto, a natureza criogénico de azoto líquido e da sua taxa de expansão torna perigoso recuperação afundado amostra. É geralmente recomendado pelo Escritórios de segurança que a recuperação da amostra nunca ser realizada por uma única pessoa. Outra alternativa é usar comercialmente disponíveis grabbers frescos ou pinças para retirar os ³ frascos. No entanto, a visibilidade limitada dentro dos escuros cheios de líquidos Dewars representa uma grande limitação na sua utilização.

Neste artigo, descrevemos a construção de um dispositivo Cryotolerant recuperação DIY, que faz recuperação de amostra de Dewar contendo fluidos criogênicos tanto a segurança de umnd fáceis.

Protocol

1. Montagem do dispositivo Cryotolerant para Recuperação de Cryoboxes Usando um alicate, endireitar um lado da face 3 Nota uma forte L-tie (Figura 1A) para fazer forte-tie em forma mostrada na Figura 1B:. As dimensões do tie-forte pode ser seleccionada dependendo do diâmetro do gargalo do Dewar . Garantir dois tão fortes de laços com uma cinta de T-tie forte (Figura 2) usando Crown porca e parafuso, anilha e parafuso para form…

Discussion

Um dos métodos mais comuns de recuperar cryoboxes e criotubos a partir do fundo do tanque Dewar é decantar azoto líquido para um recipiente de reserva e puxar para fora as amostras restantes no balão ou flutuando na azoto líquido decantado. Isto é, no entanto, uma prática insegura que pode provocar queimaduras criogénicos ou asfixia devido a exposição prolongada a vapores de azoto líquido ^2. Outra forma comum de recuperação de criotubos caídos envolve o uso de pinças criotubo ^3. No e…

Materials

Name of the reagent	Company	Catalogue number	Comments
Hillman Group Plated Slotted Flat 1-3/8 x 4 feet; 14 Gauge	Local Hardware shop	N/A	1 unit required
Crown Bolt Stainless Steel #6 – 32 x 3/8 in. Oval Head Phillips Drive Machine Screw	Local Hardware shop	Model # 42281	4 units required
Crown Bolt 3/8 in. x 1-1/2 in. Zinc-Plated Steel Fender Washers	Local Hardware shop	Model # 20122	4 units required
Crown Bolt Zinc Plated #8-32 Machine Screw Nut	Local Hardware shop	Model # 18512	4 units required
Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in. Half Base	Local Hardware shop	Model # BC40Z	2 units required
Simpson Strong-Tie 6 in. x 6 in. T Strap	Local Hardware shop	Model # 66T	1 unit required
Oneida 6″ Mesh Strainer	Local Grocery shop	Model # 7859W	1 unit required
The Hillman Group Galvanized Hex Nuts 3/8-16	Local Hardware shop	Model #:810509	6 units required
The Hillman Group Galvanized Hex Bolts 3/8- 16	Local Hardware shop		4 units required
Foam for insulation	Local Hardware shop		1 unit required
Screw Driver	Local Hardware shop		1 unit required
Pliers	Local Hardware shop		1 unit required