Summary

Ovariektomi og 17β-østradiol Udskiftning hos rotter og mus: A Visual Demonstration

Published: June 07, 2012
doi:

Summary

Ovariektomi og efterfølgende udskiftning af 17β-estradiol ved silastiske kapsler og peroral Nutella påvises i rotter og mus.

Abstract

Østrogener er en familie af kvindelige kønshormoner med et usædvanligt bredt spektrum af effekter. Når rotter og mus anvendes i østrogen forskning er almindeligt ovarieektomiseret for at ablatere hurtigt cykling hormon produktionen erstatte 17β-estradiol eksogent. Der er dog mangel på konsensus om, hvordan det hormon bør gives for at opnå fysiologiske serumkoncentrationer. Det er afgørende, da 17β-østradiol-niveau / administration metode dybtgående indflydelse på de eksperimentelle resultater 1-3. Vi har i en række undersøgelser karakteriserede de forskellige former for 17β-estradiol administration, fandt, at subkutane silastik kapsler og per-oral møtrik-creme Nutella er bedre end kommercielt tilgængelige langsom frigivelse pellets (produceret af selskabet Innovative Research of America) og daglige injektioner i form af fremstilling fysiologiske serumkoncentrationer af 17β-estradiol 4-6. Blandt advantages af møtrik-creme metode, der tidligere er blevet anvendt til buprenorphin administration 7, er, at når der anvendes til administration af østrogen den ligner peroral hormonerstatningsterapi og er ikke-invasiv. De subkutane silastik Kapslerne er praktisk og producere de mest stabile serumkoncentrationer. Denne video artikel indeholder trin-for-trin demonstrationer af ovariektomi og 17β-østradiol hormon udskiftning af silastik kapsler og peroral Nutella i rotter og mus, efterfulgt af en diskussion af vigtige aspekter af de administrative procedurer.

Protocol

1. Ovariektomi via den dorsale rute Bedøve dyret, for eksempel ved anvendelse af 1,5% isofluran (4% til induktion) i en oxygen / dinitrogenoxid 30% / 70% blanding. Sende dyret i maveleje-positionen på en varmeplade forbundet med et rektalt termometer. Det er vigtigt at have et tyndt lag af isolering mellem dyr og pladen, og at termometeret feedback-system holder legemstemperatur på 37 ± 0,5 ° C. Anvendes gel til øjenbeskyttelse og administrere 5 mg Rimadyl / kg legemsvægt fortyndet i saltvand subkutant…

Discussion

De administration tilstande beskrevet ovenfor har tidligere undersøgelser vist overlegen kommercielle langsom frigivelse pellets og injektioner i form af fremstilling fysiologiske serumkoncentrationer af 17β-estradiol. Mens den langsomme frigivelse pellets producerer meget høje og langvarige serumkoncentration toppe, injektionerne forårsager ekstreme, daglige hormonenheder udsving og kræver gentagen belastende behandling af dyrene 4-6. Vigtigheden af at vælge passende administration tilstande er fremhæ…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Undersøgelsen blev finansieret af Linköping Universitet og Amtsråd Östergötland.

Materials

Name of the reagent Company Catalogue number Comments
Rimadyl, 50 mg/mL Pfizer 462986 Postoperative analgesia after ovariectomy.
Lubrithal eye gel Leo Laboratories   Eye protection during surgery.
Jodopax vet Pharmaxim   Surgery disinfection.
Vicryl 4-0 suture Johnson & Johnson   Wound suture and ovary ligation.
17β-estradiol, >98% Sigma E8875-1G In sesame oil for silastic capsules and Nutella.
Sesame oil Sigma S3547-1L Dissolving the 17β-estradiol.
Silastic tubing, ID/OD: 1.575/3.175 mm Dow Corning 508-008 Production of silastic capsules.
Wooden applicator stick Selefatrade 12-0783 Capping of silastic capsules.
Nutella Ferrero   Medium for peroral 17β-estradiol.

References

  1. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Dose-related neuroprotective versus neurodamaging effects of estrogens in rat cerebral ischemia: a systematic analysis. J. Cereb. Blood Flow Metab. 29, 1359-1372 (2009).
  2. Strom, J. O., Theodorsson, E., Holm, L., Theodorsson, A. Different methods for administering 17beta-estradiol to ovariectomized rats result in opposite effects on ischemic brain damage. BMC Neurosci. 11, 1471-2202 (2010).
  3. Strom, J. O., Theodorsson, A., Theodorsson, E. Hormesis and Female Sex Hormones. Pharmaceuticals. 4, 15 (2011).
  4. Isaksson, I. M., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for 17beta-estradiol administration to rats. Scandinavian journal of clinical and laboratory investigation. , (2011).
  5. Strom, J. O., Theodorsson, E., Theodorsson, A. Order of magnitude differences between methods for maintaining physiological 17beta-oestradiol concentrations in ovariectomized rats. Scand. J. Clin. Lab Invest. 68, 814-822 (2008).
  6. Ingberg, E., Theodorsson, A., Theodorsson, E., Strom, J. O. Methods for long-term 17beta-estradiol administration to mice. General and comparative endocrinology. , (2011).
  7. Kalliokoski, O., Jacobsen, K. R., Hau, J., Abelson, K. S. Serum concentrations of buprenorphine after oral and parenteral administration in male mice. Vet. J. 187, 251-254 (2011).
  8. Simpkins, J. W. Estrogens may reduce mortality and ischemic damage caused by middle cerebral artery occlusion in the female rat. J. Neurosurg. 87, 724-730 (1997).
  9. Wise, P. M., Dubal, D. B. Estradiol protects against ischemic brain injury in middle-aged rats. Biol. Reprod. 63, 982-985 (2000).
  10. Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 281, 1531-1539 (2001).
  11. Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion. J. Cereb. Blood Flow Metab. 25, 414-420 (2005).
  12. Carswell, H. V. Differential effects of 17beta-estradiol upon stroke damage in stroke prone and normotensive rats. J. Cereb. Blood Flow Metab. 24, 298-304 (2004).
  13. Yong, Y. 17beta-estradiol potentiates ischemia-reperfusion injury in diabetic ovariectomized female rats. Brain Res. 1054, 192-199 (2005).
  14. Theodorsson, A., Theodorsson, E. Estradiol increases brain lesions in the cortex and lateral striatum after transient occlusion of the middle cerebral artery in rats: no effect of ischemia on galanin in the stroke area but decreased levels in the hippocampus. Peptides. 26, 2257-2264 (2005).
  15. Levin-Allerhand, J. A., Sokol, K., Smith, J. D. Safe and effective method for chronic 17beta-estradiol administration to mice. Contemp. Top Lab Anim. Sci. 42, 33-35 (2003).
check_url/kr/4013?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Ström, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I., Theodorsson, E. Ovariectomy and 17β-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration. J. Vis. Exp. (64), e4013, doi:10.3791/4013 (2012).

View Video