La formazione di una sofisticata tecnica microchirurgica: Interposizione della vena giugulare esterna innesto nella carotide comune in Rats
Summary
Iperplasia neointimale è la causa primaria di stenosi nelle vene arterializzato. Proponiamo un nuovo protocollo per cui si innesta la vena giugulare esterna destra con la tecnica bracciale in carotide comune di ratti Sprague Dawley. Il tasso di sopravvivenza è stata del 100% per il punto temporale di sacrificio.
Abstract
Iperplasia neointimale è una delle principali cause di stenosi nelle vene arterializzato che sono di grande importanza in chirurgia di bypass arterioso coronarico, in chirurgia di bypass arterioso periferico nonché in fistole arterovenose. 1-5 La procedura sperimentale di interposizione vena innesto nella carotide comune utilizzando il bracciale-tecnica è stata applicata in diversi progetti di ricerca per esaminare l'eziologia della iperplasia neointimale e opzioni terapeutiche per affrontarlo. 6-8 Il polsino impedisce vaso rimodellamento anastomosi e induce turbolenza all'interno dell'innesto e quindi lo sviluppo di iperplasia neointimale.
Con l'innesto di vena cava superiore è una consolidata piccolo-modello animale per l'esperimento venosa arterialization. 9-11 Questo protocollo corrente si riferisce ad una tecnica di interposizione stabilita giugulare innesto venoso prima volta descritta da Zou et al., 9, come pure gli altri. 12-14 </sup> Tuttavia, questi protocolli citati piccoli animali sono complicate.
Per semplificare la procedura e di ridurre al minimo il numero di animali sperimentali necessarie, un protocollo funzionamento dettagliato di formazione video è presentato. Questo video dovrebbe aiutare il chirurgo alle prime armi di imparare sia il bracciale-tecnica e l'interposizione innesto venoso. Con la presente, la vena giugulare esterna destra è stato innestato in cuffia-tecnica nella carotide comune di 21 ratti Sprague Dawley femmine classificati in tre gruppi uguali che sono stati sacrificati al giorno 21, 42 e 84, rispettivamente. In particolare, non sono animali donatori sono necessari, in quanto auto-trapianti sono stati effettuati. Il tasso di sopravvivenza è stata del 100% per il punto temporale di sacrificio. Inoltre, il tasso di pervietà dell'innesto è stata del 60% per i primi 10 animali operati e 82% per i restanti 11 animali. Il flusso di sangue al momento del sacrificio era di 8 ± 3 ml / min. In conclusione, questo protocollo chirurgico semplifica notevolmente, ottimizza e standardizza questo complicated procedura. Dà chirurghi inesperti facile, passo-passo le istruzioni, spiegando possibili insidie, aiutandole così ad acquisire competenze in fretta ed evitare il sacrificio inutile di animali da esperimento.
Protocol
Discussion
Interposizione di un innesto di vena giugulare esterna nella carotide comune è una tecnica di microchirurgia sofisticata. Questo video aiuta il chirurgo novizio padroneggiare questa tecnica nel minor tempo possibile con un dispendio inferiore di animali da esperimento.
Anestesia inalatoria è la scelta migliore per questa operazione, in quanto evita una fase anestesia eccessivamente profonda, può essere ben controllata e permette al chirurgo di tempo sufficiente per operare. Inoltre il rat…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo studio è stato finanziato dal programma di promozione della ricerca "START" della facoltà di medicina della RWTH Aachen University, in Germania (titolo: "Die Arterialisation venöser Gefäße" START 690753). Vorremmo ringraziare la signora Mary-Joan Blümich per la sua assistenza editing eccellente.
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| Braided Silk black 7-0 | Ethicon Products | 892100 | |
| Vicryl 3-0 | Ethicon Products | J285G | |
| Vicryl 4-0 | Ethicon Products | J284G | |
| Portex non sterile nylon tubing 0.75 mm, 0.94 mm Fine-Bore Polyethylene (Polythene) Tubing | Portex UK | 800/200/175/100 | |
| Isofluorane 5 % | Any genericon | ||
| Heparin | Any genericon | ||
| 0.9% saline | Any genericon | ||
| Buprenorphine | Any genericon |
References
- Motwani, J. G., Topol, E. J. Aortocoronary saphenous vein graft disease: Pathogenesis, Predisposition, and Prevention. Circulation. 97, 916-931 (1998).
- Bonatti, J., Oberhuber, A., Schachner, T., Zou, Y., Hammerer-Lercher, A., Mittermair, R., Laufer, G. Neointimal hyperplasia in coronary vein grafts: Pathophysiology and prevention of a significant clinical problem. The Heart Surg. , E72-E87 (2004).
- Roy-Chaudhury, P., Kelly, B. S., Zhang, J., Narayana, A., Desai, P., Melhem, M., Duncan, H., Heffelfinger, S. C. Hemodialysis Vascular Access Dysfunction: From Pathophysiology to Novel Therapies. Blood Purif. 21, 99-110 (2003).
- Dixon, B. S. Why don’t fistulas mature. Kidney Int. 70, 1413-1422 (2006).
- Newby, A. C., Zaltsman, A. B. Molecular mechanisms in intimal hyperplasia. J. Pathol. 190, 300-309 (2000).
- Schachner, T., Heiss, S., Zipponi, D., Tzankov, A. Perivascular treatment with azathioprine reduces neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Heart Surg. 9, E515-E517 (2006).
- Zhang, L., Sivashanmugam, P., Wu, J. H., Brian, L., Exum, S. T., Freedman, N. J., Peppel, K. Tumor necrosis factor receptor-2 signaling attenuates vein graft neointima formation by promoting endothelial recovery. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 28, 284-289 (2008).
- Tzankov, A., Mairinger, T., Laufer, G., Bonatti, J. O. Local application of rapamycin inhibits neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann. Thorac. Surg. 77, 1580-1585 (2004).
- Zou, Y., Dietrich, H., Hu, Y., Metzler, B., Wick, G., Xu, Q. Mouse Model of Venous bypass graft arteriosclerosis. A.J.P. 153, 1301-1310 (1998).
- Schachner, T., Oberhuber, A., Zou, Y., Tzankov, A., Ott, H., Laufer, G., Bonatti, J. Rapamycin treatment is associated with an increased apoptosis rate in experimental vein grafts. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 27, 302-306 (2005).
- Ali, Z., Bursill, C., Hu, Y., Choudhury, R. P., Xu, Q., Greaves, D. R., Channon, K. M. Gene transfer of a broad spectrum CC-chemokine inhibitor reduces vein graft atherosclerosis in apolipoprotein E-knockout mice. Circulation. 30, 1235-1241 (2005).
- Zou, J., Zhang, X., Yang, H., Zhu, Y., Ma, H., Wang, S. Rapamycin-loaded nanoparticles for inhibition of neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Ann. Vasc. Surg. 25, 538-546 (2011).
- Wang, J., Liu, K., Shen, L., Wu, H., Jing, H. Small interfering RNA to c-myc inhibits vein graft restenosis in a rat vein graft model. J. Surg. Res. 169, e85-e91 (2011).
- Schachner, T., Zou, Y., Oberhuber, A., Mairinger, T., Tzankov, A., Laufer, G., Ott, H., Bonatti, J. Perivascular application of C-type natriuretic peptide attenuates neointimal hyperplasia in experimental vein grafts. Eur. J. Cardiothorac. Surg. 25, 585-590 (2004).
- Thomas, A. C., Newby, A. C. Effect of matrix metalloproteinase-9 knockout on vein graft remodelling in mice. J. Vasc. Res. 47, 299-308 (2010).
