Deneysel Subaraknoid Kanama Sonrası Gecikmeli Serebral Vazospazm değerlendirin A Düşük Mortalite Rat Modeli
Summary
Anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) zaman bir anevrizma rüptürü subaraknoid boşluğa oluşur kanıyor. Subaraknoid kanama birkaç yıl önce olduğu gibi aynı olmaya devam ediyor sonra bu olay gelen morbidite ve mortalite gelişmiş tedavi yaklaşımları nedeniyle bir düşüş, vazospazm riski olmuştur da. Serebral vazospazm başlatan olayları tanımlamak için kapsamlı ve tekrarlanabilir hayvan modeli kurmanın önemi Barry tarafından 1979 yılında deneysel vazospazm modelinde sıçanların ilk kullanımından bu yana araştırma odağı olmuştur<em> Ve ark.</em> Sıçanlarda Erken çalışma sisterna magna içine otolog kan tek bir enjeksiyon akut yol açtı (dakikalar içinde) ama vazospazm gecikmeli olmadığını gösterdi<sup> 3, 6, 14</sup>. Burada düşük mortalite SAK sıçan modelinde karakterize olduğunu tekrarlanabilir gecikmiş vazospazm sonuçları.
Abstract
Amaç: karakterize ve başlatan olaylar, fizyopatolojik değişiklikleri ve potansiyel tedavi hedefleri belirlemek için, sıçanlarda anevrizmal subaraknoid kanama (SAK) sonrası gecikmiş serebral vazospazm gösteren bir tekrarlanabilir model kurmak için.
Yöntem: Yirmi sekiz erkek Sprague-Dawley sıçan (250 – 300 gr) – SAK veya salin kontrol keyfi iki gruba ayrıldı. SAK grubunda (n = 15) Sıçan subaraknoid kanama sisterna magna içine, 48 saat arayla, otolog kan çift enjeksiyonu ile sağlandı. Benzer bir şekilde, normal salin (n = 13) sisterna magna tuzlu kontrol grubu içine enjekte edildi. Sıçanlar ikinci kan enjeksiyonu sonrası beşinci günde sakrifiye edildi ve beyinleri histolojik analiz için korundu. Vazospazm derecesi, NIH Image-J yazılımı kullanılarak iç luminal kesit alanı ölçülerek, baziler arter kesitleri kullanılarak ölçüldü. Önemi olduTukey / Kramer 's istatistiksel analiz kullanılarak test.
Bulgular: histolojik kesitlerin analizinden sonra, baziler arter lümen kesit alanı eski grubunda vazospazm ile tutarlı, salin grubuna göre SAK daha küçüktür. SAK grubunda, baziler arterin iç alanı (.056 mikron ± 3) iç alanı ile salin kontrol grubuna (0,069 ile karşılaştırıldığında, beş gün ikinci kan enjeksiyonu (yedi gün ilk kan enjeksiyonu sonra) vazospazm itibaren belirgin olarak düşüktü ± 3, p = 0.004). Serebral vazospazm hiçbir ölüm oluşmamıştır.
Sonuç: sıçan çift SAK modelinde küçük bir hayvan modelinde serebral vazospazm patofizyolojik mekanizmaları incelemek için kullanılabilecek bir hafif, survivable, baziler arter vazospazm indükler. Düşük ve kabul edilebilir ölüm oranı vazospazmın mekanizmaları elucid olabilir böylece ideal SAK hayvan modeli için sağlanması gereken önemli bir kriterdirated 7, 8. Modelin ek modifiye vazospazm ve nörolojik sınavlardan artan ciddiyetine göre ayarlama yapılabilir.
Protocol
Representative Results
Discussion
Primatlar, bir daha benzer bir genetik yapısı ve anatomik özelliklere sahip insan, daha yakından gecikmiş vazospazmdan olayları taklit ve daha kolay kemirgenler 8'den arteriyel değişiklikler, izlemek için non-invaziv görüntüleme (MRI ve anjiografi) tabi olabilir. Ancak, primat modelleri maliyet-engelleyici ve küçük hayvan modelleri daha karmaşık bakım ve etik konular ile ilişkili vardır. Geliştirilmiştir Küçük hayvan SAK modellerinde önceden SAK inducing üç yöntem üzerinde od…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz bu makale için kadar yazmak onun değerli girişler için Dr Mary-Lou Vallano, Nörobilim ve Fizyoloji Anabilim Dalı, çabaları kabul etmek istiyorum.
Materials
| Name of equipment / reagent | Company | Catalogue Number |
| Male SD rats (250-300 g) | Taconic | SD-M |
| 26 G Catheters | Webster | 8416683 |
| 25 G Needles | Buffalo | 305122 |
| 1 cc Syringes | Central stores | 54245 |
| Ketamine/Xylazine cocktail | Animal Care (SUNY)* | – |
| Betadine | Central stores | 51458 |
| Sucrose | Sigma | S9378-1kg |
| Paraformaldehyde | Sigma | P6148-500G |
| Phosphate buffer solution | Fisher | BP-399-4 |
| Surgical Table | Harvard | PY2 72-2590 |
| OCT Compound (cryoprotection) | VWR | 25608-930 |
| Superfrost Slides | Fisher | 12-550-15 |
* Synthesized at Department of Laboratory Animal Care, SUNY Upstate Medical University. Add 1 cc [100 mg/ml] of Xylazine to 10 ml [100 mg/ml] of Ketamine.
References
- Bederson, J. B., Germano, I. M., Guarino, L. Cortical blood flow and cerebral perfusion pressure in a new noncraniotomy model of subarachnoid hemorrhage in the rat. Stroke. 26, 1086-1091 (1995).
- Cheng, G., Wei, L., Zhi-Dan, S., Shi-Guang, Z., Xiang-Zhen, L. Atorvastatin ameliorates cerebral vasospasm and early brain injury after subarachnoid hemorrhage and inhibits caspase-dependent apoptosis pathway. BMC Neurosci. 10, 7-17 (2009).
- Jackowski, A., Crockard, A., Burnstock, G., Russell, R. R., Kristek, F. The time course of intracranial pathophysiological changes following experimental subarachnoid hemorrhage in the rat. J. Cereb. Blood Flow Metab. 10, 835-849 (1990).
- Kaoutzanis, M., Yokota, M., Sibilia, R., Peterson, J. W. Neurologic evaluation in a canine model of single and double subarachnoid hemorrhage. J. Neurosci. Methods. 50, 301-307 (1993).
- Karaoglan, A., Akdemir, O., Barut, S., Kokturk, S., Uzun, H., Tasyurekli, M., Colak, A. The effects of resveratrol on vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage in rats. Surg. Neurol. 70, 337-343 (2008).
- Lee, J. Y., Huang, D. L., Keep, R., Sagher, O. Characterization of an improved double hemorrhage rat model for the study of delayed cerebral vasospasm. J. Neurosci. Methods. 168, 358-366 (2008).
- Lee, J. Y., Sagher, O., Keep, R., Hua, Y., Xi, G. Comparison of experimental rat models of early brain injury after subarachnoid hemorrhage. Neurosurgery. 65 (2), 331-343 (2009).
- Megyesi, J. F., Vollrath, B., Cook, D. A., Findlay, J. M. In vivo animal models of cerebral vasospasm: a review. Neurosurgery. 46, 448-460 (2000).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Diemer, N. H., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Subarachnoid blood volume, mortality rate, neuronal death, cerebral blood flow, and perfusion pressure in three different rat models. Neurosurgery. 52, 165-176 (2003).
- Prunell, G. F., Mathiesen, T., Svendgaard, N. A. Experimental subarachnoid hemorrhage: Cerebral blood flow and brain metabolism during the acute phase in three different models in the rat. Neurosurgery. 54, 426-436 (2004).
- Ryba, M. S., Gordon-Krajcer, W., Walski, M., Chalimoniuk, M., Chrapusta, S. J. Hydroxylamine attenuates the effects of simulated subarachnoid hemorrhage: implication for the role of oxidative stress in cerebral vasospasm. Neurol. Res. 31, 195-199 (1999).
- Satoh, M., Parent, A. D., Zhang, J. H. Inhibitory effect with antisense mitogen-activated protein kinase oligodeoxynucleotide against cerebral vasospasm in rats. Stroke. 33, 775-781 (2002).
- Suzuki, H., Kanamaru, K., Tsunoda, H., Inada, H., Kuroki, M., Sun, H., Waga, S., Tanaka, T. Heme oxygenase-1 gene induction as an intrinsic regulation against delayed cerebral vasospasm in rats. J. Clin. Invest. 104, 59-66 (1999).
- Swift, D. M., Solomon, R. A. Subarachnoid hemorrhage fails to produce vasculopathy or chronic blood flow changes in rats. Stroke. 19, 878-882 (1988).
- Vatter, H., Weidauer, S., Konczalla, J., Dettmann, E., Zimmermann, M., Raabe, A., Preibisch, C., Zanella, F., Seifert, V. Time course in the development of cerebral vasospasm after experimental subarachnoid hemorrhage: clinical and neuroradiological assessment of the rat double hemorrhage model. Neurosurgery. 58, 1190-1197 (2006).
- Veelken, J. A., Laing, R. J., Jakubowski, J. The Sheffield model of subarachnoid hemorrhage in rats. Stroke. 26, 1279-1283 (1995).
- Zubkov, A. Y., Nanda, A., Zhang, J. H. Signal transduction pathways in cerebral vasospasm. Pathophysiology. 9, 47-61 (2003).
