Summary

L'ultrafiltration à flux tangentiel: Un "Green" Méthode de sélection Taille et concentration des nanoparticules d'argent colloïdal

Published: October 04, 2012
doi:

Summary

Ultrafiltration à flux tangentiel (AFT) est un procédé de recirculation utilisée pour la séparation en fonction du poids du échantillons biologiques. TFU a été adapté à la taille de sélection (1-20 nm de diamètre) et très concentrer une grande quantité de nanoparticules d'argent polydisperses (4 L de 15,2 mg ml<sup> -1</sup> Jusqu'à 4 ml de 8,539.9 mg ml<sup> -1</sup>) Avec agrégation minimale.

Abstract

De nos jours, AGNPS sont largement utilisés dans la fabrication de produits de consommation, 1, 2 désinfectants de l'eau thérapeutique, 1, 3 et 4 dispositifs biomédicaux en raison de leurs puissantes propriétés antimicrobiennes. 6.3 Ces applications des nanoparticules sont fortement influencées par la taille et l'état d'agrégation AGNP . De nombreux défis existent dans la fabrication contrôlée 7 et basée sur la taille de l'isolement 4,8 non fonctionnalisées, AGNPS homogènes qui sont exempts de produits chimiques agressifs plafonnement / agents stabilisants ou des solvants organiques. 7-13 Limites sortir de la toxicité des réactifs, des coûts élevés ou réduits l'efficacité des méthodes de synthèse ou l'isolement AGNP (par exemple, la centrifugation, dépendant de la taille solubilité, chromatographie d'exclusion stérique, etc.) 10,14-18 Pour y remédier, nous avons récemment montré que TFU permet un meilleur contrôle sur la taille, la concentration et état d'agrégation de Creighton AGNPS (300ml de 15,3 pg ml -1 jusqu'à 10 ml de 198,7 pg -1 ml) que les méthodes classiques de séparation telles que l'ultracentrifugation. 19

AFT est un procédé de recyclage couramment utilisé pour l'isolement en fonction du poids de protéines, de virus et de cellules. 20,21 Brièvement, l'échantillon liquide est passé à travers une série de membranes à fibres creuses avec une taille de pores comprise entre 1.000 kD à 10 kD. Petits constituants en suspension ou dissous dans l'échantillon passe à travers la barrière poreuse avec le solvant (filtrat), tandis que les constituants plus grandes sont retenues (rétentat). TFU peut être considéré comme un "vert" méthode car elle ni dommages, ni de l'échantillon nécessite un supplément de solvant pour éliminer l'excès de réactifs toxiques et sous-produits. En outre, AFT peuvent être appliqués à une grande variété de nanoparticules que les deux filtres hydrophobes et hydrophiles sont disponibles.

Les deux principaux objectifs de cette étude étaient: 1) pour illustrerles aspects expérimentaux de l'approche TFU à travers une expérience vidéo invités et 2) de démontrer la faisabilité de la méthode TFU pour les grands volumes de nanoparticules colloïdales et les petits volumes de rétentat. Tout d'abord, AGNPS unfuctionalized (4 L, 15,2 mg -1 ml) ont été synthétisés selon la méthode bien établie Creighton 22,23 par la réduction de AgNO 3 avec NaBH4. AGNP polydispersité est ensuite réduit par l'intermédiaire d'un AFT 3-étape à l'aide d'un filtre 50-nm (460 cm 2) pour enlever et AGNPS AGNP-agrégats supérieure à 50 nm, suivi par deux 100-kD (200 cm 2 et 20 cm 2) filtres de concentrer les AGNPS. Des échantillons représentatifs ont été caractérisés par microscopie électronique à transmission, la spectrophotométrie d'absorption UV-Vis, spectroscopie Raman et plasma à couplage inductif spectroscopie d'émission optique. Le rétentat final comprenait très concentré (4 ml, 8,539.9 mg -1 ml) et pourtant humble agrégée et homogèneAGNPS de 1-20 nm de diamètre. Cela correspond à un rendement concentration d'argent de l'ordre de 62%.

Protocol

1. Synthèse des AGNPS colloïdal Le mécanisme réactionnel de la méthode Creighton (légèrement modifié, peu coûteux) 22 est décrite en détail dans l'information de référence Soutenir Pavel et.al avec l'hydrolyse indésirable réaction secondaire de NaBH4 à la température ambiante ou plus 23. Nettoyez toute la verrerie pendant 12-24 h dans un 10% HNO 3 salles de bain, puis pour 4-12 heures dans une solution de NaOH 1,…

Discussion

Spectrophotométrie d'absorption UV-Vis et spectroscopie Raman de AGNPS colloïdal

Il est bien connu que le nombre de pics de résonance plasmonique de surface dans le spectre d'absorption d'un colloïde diminue à mesure que la symétrie des augmentations AGNPS. En outre, AGNP agrégation conduit à l'apparition de pics plus larges ou plus décalée vers le rouge. 25,26 La présence d'un seul pic pointu et symétrique à 394 nm SPR est révélateur de petits AGNP…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Le financement de la National Science Foundation à travers le NUE dans l'ingénierie et les programmes LEADER Consortium est grandement appréciée.

Materials

Silver nitrate (AgNO3) Acros Organics Inc. CAS: 7761-88-8
Sodium borohydride (NaBH4) Acros Organics Inc. CAS: 16940-66-2
Nitric acid (HNO3, Optima) Fisher Scientific Inc. A467-1 Trace metal grade for ICP analysis
10,000 μg ml-1 silver standard, EnviroConcentrate Ultra Scientific US-IAA-047
KrosFlo Research IIi Tangential Flow Filtration System Spectrum Laboratories Inc. SYR2-U20-01N
0.05 μm PS (0.5 mm) 460 cm2 Spectrum Laboratories Inc. X30S-900-02N
Midi 100 kD PS 200 cm2 Spectrum Laboratories Inc. X3-100S-901-02N
Micro100 kD PS 20 cm2 Spectrum Laboratories Inc. X1AB-300-10N
MasterFlex C-Flex tubing L/S Size 17 Cole-Palmer Instrument Co. 06424-17
MasterFlex C-Flex tubing L/S Size 14 Cole-Palmer Instrument Co. 06424-14
Cary 50 UV-VIS-NIR spectrophotometer Varian Inc.
LabRam HR 800 system Horiba Jobin Yvon Inc.
Varian 710ES ICP-OES Varian Inc.

Table 1. Specific reagents and equipment.

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Anders, C. B., Baker, J. D., Stahler, A. C., Williams, A. J., Sisco, J. N., Trefry, J. C., Wooley, D. P., Pavel Sizemore, I. E. Tangential Flow Ultrafiltration: A “Green” Method for the Size Selection and Concentration of Colloidal Silver Nanoparticles. J. Vis. Exp. (68), e4167, doi:10.3791/4167 (2012).

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