إصلاح نموذج الحرجة الحجم عيب قبي طريق الدهنية المشتقة من الخلايا اللحمية المقطوع Lipoaspirate
Summary
هذا البروتوكول يصف عزل الدهنية المشتقة من الخلايا اللحمية lipoaspirate وإنشاء عيب 4 مم الحرجة الحجم قبي لتقييم تجديد الهيكل العظمي.
Abstract
إصلاح الهيكل العظمي القحفي وتجديد عروض الوعد تشكيل الأنسجة دي نوفو من خلال نهج يستند إلى الخلية باستخدام الخلايا الجذعية. وقد أثبتت الدهنية المستمدة من الخلايا اللحمية (مخولا لصيانة طائرات) لتكون مصدرا للخلايا الجذعية وافرة متعددة القدرات قادرة على تمر المكونة للعظم، والتمايز مكون للغضروف، مكون الشحم، وعضلي. واستكشفت العديد من الدراسات إمكانية المكونة للعظم هذه الخلايا في الجسم الحي مع استخدام المواد الحيوية المختلفة سقالات للتسليم الخلوية. وقد تجلى ذلك من خلال الاستفادة من ذلك osteoconductive، هيدروكسيباتيت المغلفة بولي (اللبنيك-CO-الجليكوليك حمض) (HA-PLGA) سقالة مع المصنف مخولا لصيانة طائرات، عيب الحرجة الحجم قبي، عيب التي تم تعريفها بواسطة عدم قدرتها على الخضوع عفوية يمكن الشفاء على مدى عمر الحيوان، أن تظهر على نحو فعال تجديد عظمي قوي. هذا نموذج الجسم الحي في يدل على أساس النهج متعدية تهدف لتجديد أنسجة العظام – الخلويةوعنصر مصفوفة البيولوجية. هذا الأسلوب يخدم كنموذج لتطبيق السريرية النهائي للخلية السلف نحو إصلاح خلل الأنسجة محددة.
Protocol
Discussion
منذ عزل الدهنية المستمدة من الخلايا اللحمية 2 من lipoaspirate، وقد تختلف هذه الخلايا في مجموعة متنوعة واسعة من الأنساب الخلوية. الأنسجة الدهنية هي من أصول أرومية متوسطة، وبالتالي، متعددة القدرات الدهنية المشتقة من الخلايا اللحمية من المرجح أن تكون الأكثر فعالية مع ?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
نود أن نشكر الدكتور جورج جميل والدكتور عميد Vistnes على دعمهم والتعاون من أبحاثنا. ويدعم هذا العمل من قبل المعهد الوطني للمنح أبحاث الأسنان والجمجمة 1 R21-01 DE019274، وR01EB009689 RC2 DE020771-02، ومؤسسة أوك ومختبر للطب التجديدي Hagey الأطفال إلى MTL الدكتور هيون معتمد من قبل القديس يوسف GME مستشفى الرحمة .
Materials
| Name of the reagent: | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Lipoaspirate Harvest | |||
| PBS | Gibco | 10010-023 | |
| Hank’s Balanced Salt Solution | Cellgro | 21-023-CV | |
| Collagenase | Sigma | C6885-500MG | |
| Cell Strainer 100 μm | BD Falcon | 352360 | |
| Steri-top 500 ml .22 μm filter | Millipore | SCGPT05RE | |
| Calvarial Defect | |||
| Z500 Brushless MicromotorsUM50C | NSK | NSKZ500 | |
| Circular Knife 4.0 mm | Xemax Surgical | CK40 |
References
- Levi, B., James, A. W., Nelson, E. R. Human adipose-derived stromal cells heal critical size mouse calvarial defect. PLoS One. 5, (2010).
- Zuk, P. A., Zhu, M., Ashjia, P. Human adipose tissue is a source of multipotent stem cells. Mol. Biol. Cell. 13, 4279-4295 (2002).
- Keefe, M. S., Keefe, M. A. An evaluation of the effectiveness of different techniques for intraoperative antibiotics into alloplastic implants for use in facial reconstruction. Arch Facial Plastic Surg. 11, 246-251 (2009).
- Mitchell, J. B., McIntosh, K., Zvonic, S. Immunophenotype of human adipose-derived cells: Temporal changes in stromal-associated and stem cell-associated markers. Stem Cells. 24, 376-385 (2006).
- Dominici, M., Blanc, K. L. e., Mueller, I. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stroma cells. The International Society for Cellular Therapy position statement. Cytotherapy. 8, 315-317 (2006).
- Cowan, C. M., Shi, Y. Y., Aalami, O. O. Adipose-derived adult stromal cells heal critical-size calvarial defects. Nat Biotechnol. 22, 560-567 (2004).
- Levi, B., Nelson, E. R., Li, S. Dura mater stimulates human adipose-derived stromal cells to undergo bone formation in mouse calvarial defects. Stem Cells. 29, 1241-1255 (2011).
- Phipps, M. C., Clem, W. C., Catledge, S. A. Mesenchymal stem cells responses to bone-mimetic electrospun matrices composed of polycaprolactone, collagen I and nanoparticulate hydroxyapatite. PLoS One. 6, (2011).
- Yuan, H., Zang, Z., Li, Y. Osteoinduction by calcium phosphate biomaterials. J. Mater. Sci. Mater. Med. 9, 723-726 (1998).
- Wei, G., Jun, Q., Giannobile, W. V. The enchancement of osteogenesis by nano-fibrous scaffolds incorporating rhBMP-7 nanospheres. Biomaterials. 28, 2087-2096 (2007).
- Li, C., Verpari, C., Jin, H. J. Electrospun silk-BMP-2 scaffolds for bone tissue engineering. Biomaterials. 27, 3115-3124 (2006).
- Zhang, Y., Fan, W., Nothdurft, L. In vitro and in vivo evaluation of adenovirus combined silk fibroin scaffolds for bone morphogenetic protein-7 gene delivery. Tissue Eng Part C Methods. 17, 789-797 (2011).
- Levi, B., Hyun, J. S., Nelson, E. R. Non-integrating knockdown and customized scaffold design enhances human-adipose-derived stem cells in skeletal repair. Stem Cells. 29, 21028-21029 (2011).
