Summary

Niet-invasieve beeldvorming van acute transplantaatafstoting na Rat niertransplantatie gebruiken<sup> 18</sup> F-FDG PET

Published: April 28, 2013
doi:

Summary

We presenteren hier een rat niertransplantatie model om niet-invasief te beoordelen acute transplantaatafstoting met behulp van positron emissie tomografie met 18F-fluorodeoxyglucose.

Abstract

Het aantal patiënten met eindstadium nierziekte, en het aantal nier transplantaat ontvangers continu toeneemt. Episodes van acute cellulaire transplantaatafstoting (AR) is een negatieve prognostische factor voor de lange termijn transplantaat overleving, en de tijdige diagnose is van cruciaal belang voor het transplantaat functie 1. Momenteel AR alleen worden definitief gediagnosticeerd door kern-naaldbiopsie, die als een invasieve methode, ontbloot significant graft letsel of zelfs verlies. Bovendien biopsieën niet haalbaar zijn bij patiënten die anticoagulantia en de beperkte bemonstering plaats van deze techniek kan leiden tot vals negatieve resultaten als de AR is focale of fragmentarisch. Bijgevolg leidde dit tot een voortdurende zoektocht naar nieuwe AR detectiemethoden, die vaak worden gedaan bij dieren waaronder het gebruik van verschillende transplantatiemodellen.

Sinds de vroege jaren '60 rat niertransplantatie is een gevestigde experimentele methode voor de examinatie en analyse van AR 2. We hierin aanwezig, naast kleine dieren positron emissie tomografie (PET) met 18 F-fluorodeoxyglucose (FDG) om AR te beoordelen in een allogene uninephrectomized rat niertransplantatie model en stellen graft FDG-PET als een nieuwe optie voor een niet-invasieve, specifieke en vroege diagnose van AR ook de menselijke situatie 3. Verder kan deze methode worden toegepast voor de follow-up om de monitoring van afstoting 4 te verbeteren.

Protocol

1. Donor Organ Recovery Stel de stereotactische microscoop, staat het gewicht van de 8-10 weken oude ratten (donor en ontvanger lichaamsgewicht moeten overeenkomen). Verdoven van de donor rat (Lewis Brown Norway F1, LBN F1) gebruik van zuurstof / isofluraan inhalatie (isofluraan 4% / 2 L / min zuurstof). Onderhouden anesthesie door het verlagen van isofluraan tot 2-2,5%. Plaats de verdoofde rat op de operatie pad. Bevestig extremiteiten van de rat met plakband op het pad en passen oogzalf …

Representative Results

Histologie Tijdens AR leukocyten, dwz voornamelijk T-lymfocyten aangeworven in de transplantatie, terwijl de ernst van de afwijzing wordt weerspiegeld door de mate van ontsteking. In het Periodiek-Acid-Schiff (PAS) kleuring hier afgebeeld (figuur 1), de donornier toont significante histologische tekenen van AR, namelijk glomerulitis, tubulitis, endothelialitis en graft infiltratie (Figuur 1, ATX POD4) (POD = postoperatieve dag) terwijl tekenen van afst…

Discussion

FDG-PET is een nieuwe optie voor de diagnose van acute afstoting. Door zijn niet-invasieve en specifieke aard, FDG-PET is voordelen in vergelijking met de klassieke diagnostiek door kernnaaldbiopsie. In tegenstelling tot de beperkte grootte van een biopsie, FDG-PET-analyse de volledige ent met. Bovendien kan men toepassen op patiënten antistollingsmiddel en kan een PET maatregelen herhaaldelijk naar bv zuiveringsrendement 4 monitoren voeren. Bovendien werd reeds aangetoond dat twee belangrijke diffe…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Dit werk werd ondersteund door de Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, Duitsland, projecten C7 en C6) en de IZKF Münster (Core unit SMAP). De auteurs zijn dankbaar Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich en Romeinse Priebe voor een uitstekende technische ondersteuning en Daniel Burkert en Sven Fatum voor het produceren radiotracers.

Materials

Equipment
Mathieu Needle Holder – 14 cm Fine Science Tools 12010-14
Castroviejo Micro Needle Holder – 9 cm Fine Science Tools 12061-01
Surgical Scissors – Sharp_Blunt Fine Science Tools 14001-12
Iris Scissors – ToughCut Straight 11.5 cm Fine Science Tools 14058-11
Student Vannas Spring Scissors Fine Science Tools 91500-09
Vannas Spring Scissors – 3 mm Blades Fine Science Tools 15000-00
Student Tissue Forceps – 1×2 Teeth 12 cm Fine Science Tools 91121-12
Dumont SS-45 Forceps – Inox Medical Fine Science Tools 11203-25
Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock Fine Science Tools 18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm Fine Science Tools 18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm Fine Science Tools 18055-04
Reagent
Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v) Abott
cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) Schülke
Povidone Iodine (e.g. Betaisodona) Mundipharma
ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen) Bayer
Buprenorphin (e.g. Temgesic) RB Pharmaceuticals
HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK) Dr. Franz Köhler Chemie
surgical thread Mersilene 0 Ethicon EH6665E
surgical thread Mersilene 4-0 Ethicon EH6732H
surgical thread Prolene 6-0 Ethicon 8697H
surgical thread Ethilon 9-0 Ethicon 2809G
surgical silk 5-0 Vömel 14739
Canula (e.g. Microlance 3, 27G ¾) BD 302200

References

  1. Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
  2. Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194, 309-310 (1962).
  3. Reuter, S., Schnöckel, U., Schröter, R., Schober, O., Pavenstädt, H., Schäfers, M., Gabriëls, G., Schlatter, E. Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET. PLoS. One. 4, e5296 (2009).
  4. Reuter, S., Schnöckel, U., Edemir, B., Schröter, R., Kentrup, D., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabriëls, G., Schäfers, M. Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency. J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).
  5. Schnöckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Schäfers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabriëls, G., Schäfers, M. Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).
  6. Grabner, A., Schnöckel, U., Kentrup, D., Schäfers, M., Reuter, S. Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography. Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).
  7. Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. The Banff 97 working classification of renal allograft pathology. Kidney Int. 55, 713-723 (1999).
  8. Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schröter, R., Neugebauer, U., Gabriëls, G., Schlatter, E. Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).
  9. Velic, A., Gabriëls, G., Hirsch, J. R., Schröter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct. Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).
  10. Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schröter, R., Pavenstädt, H., Gabriëls, G., Bleich, M., Schlatter, E. Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection. Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).
check_url/kr/4240?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Grabner, A., Kentrup, D., Schnöckel, U., Gabriëls, G., Schröter, R., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Schäfers, M., Reuter, S. Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET. J. Vis. Exp. (74), e4240, doi:10.3791/4240 (2013).

View Video