المحببات التي تعتمد على الأجسام المضادة عنيفا الجلد الناجم عن
Summary
في نموذج حيواني وصفها في عملنا الحالي، وتنقية الأجسام المضادة IgG ضد تمتد من 200 الأحماض الأمينية (أ أ 757-967) من السابع الكولاجين يتم حقن الفئران مرارا إلى إعادة إنتاج النمط الظاهري عنيفا وكذلك histo والسمات المميزة لimmunopathological الإنسان انحلال البشرة الفقاعي المكتسب (EBA)<sup> 1</sup>.
Abstract
الظواهر المناعة الذاتية تحدث في الأفراد الأصحاء، ولكن عندما يفشل التسامح الذاتي، استجابة المناعة الذاتية قد يؤدي إلى أمراض محددة. وفقا لفي Witebsky المسلمات، واحدة من المعايير في تشخيص مرض المناعة الذاتية كما هو استنساخ هذا المرض في حيوانات التجارب عن طريق نقل الأجسام المضادة من السلبي. لانحلال البشرة الفقاعي المكتسب (EBA)، وهو الجهاز prototypic محددة من أمراض المناعة الذاتية الأغشية المخاطية والجلد، وأنشئت مؤخرا نماذج تجريبية عدة. في نموذج حيواني وصفها في عملنا الحالي، وتنقية الأجسام المضادة IgG ضد تمتد من 200 الأحماض الأمينية (أ أ 757-967) من السابع الكولاجين يتم حقن الفئران مرارا إلى إعادة إنتاج النمط الظاهري عنيفا وكذلك histo والسمات المميزة لimmunopathological الإنسان EBA 1. وينظر عادة كاملة المرض على نطاق واسع 5-6 أيام بعد الحقن الأول ومدى انتشار المرض يرتبط مع جرعة من ج تدارVII-ollagen محددة مفتش. وتلف الأنسجة (تشكيل نفطة) في EBA التجريبية واعتمادا على تجنيد وتنشيط الأجسام المضادة من قبل المحببة محدد الأنسجة 2، -4. لذلك، هذا النموذج يسمح للتشريح لمسار محببة التهابات التي تعتمد على المشاركة في تلف الأنسجة الذاتية، باعتباره نموذجا يستنسخ فقط T-خلية مستقلة المرحلة من استجابة المناعة الذاتية صادر. علاوة على ذلك، أكد قيمته من قبل عدد من الدراسات التي تدلل على إمكانية نفطة الذي يحفز الأجسام المضادة في الجسم الحي من والتحقيق في آلية تشكيل نفطة في EBA 1،3، -6. وأخيرا، فإن هذا النموذج يسهل إلى حد كبير في تطوير علاجات جديدة مضادة للالتهابات التي يسببها الأجسام المضادة في أمراض. وعموما، فإن الحيوانات السلبي نقل نموذج EBA هو نموذج يمكن الوصول إليها المرض ومفيدة وسوف تساعد الباحثين على تحليل ليس فقط EBA المرضية ولكن للرد على بيولوجيا الأساسية والسريريةالأسئلة الأساسية المناعة الذاتية.
Protocol
Representative Results
Discussion
نقل الأجسام المضادة من السلبي إلى حيوانات التجارب هو نهج الرئيسية لإثبات المرضية الخاصة بهم 7، -12. النماذج الحيوانية التي تم الحصول عليها من خلال هذه الطريقة، بالإضافة إلى كونه دليلا غير مباشر لالمناعة الذاتية 13، تسمح التحقيق في المرحلة صادر الآلية المسب…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
الكتاب نعترف دعم من المنح المقدمة من جمعية الألمانية للبحوث وSI-1281/4-1 BIOSS من كلية الطب في جامعة فرايبورغ (لCS).
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments |
| recombinant antigen | The plasmids encoding for the recombinant forms of murine collagen VII are available from the corresponding author. | ||
| immune rabbit serum | www.eurogentec.com | We had New Zealand White rabbits immunized with 200 μg of antigen, 3 times at 2 week intervals. For this purpose we have used the services of Eurogentec S.A., Belgium. | |
| Protein G agarose | Roche Applied Science | 11243233001 | |
| Balb/c mice | Charles River Laboratories | ||
| OCT compound, Tissue-Tek | Sakura Finetek | 4583 | OCT, optimal cutting temperature |
| Cryomold standard | Sakura Finetek | 4557 | 25 mm × 20 mm × 5 mm |
| Cryomold intermediate | Sakura Finetek | 4566 | 15 mm × 15 mm × 5 mm |
| Uni-Link-Einbettkassette | R. Langenbrinck | 09-0503 | Histology processing and embedding cassettes |
| Spezial-Tatowierfarbe Schwarz | H. Hauptnerund & Richard Herberholz GmbH & Co. KG | 71492000 | tattooing paste |
| Tatowierzange TZ1 | EBECO E. Becker & Co GmbH | tattooing device | |
| Heparin | Carl Roth GmbH & Co. | 7692.1 | |
| Formaldehyde 37% | Carl Roth GmbH & Co. | 7386 | |
| Ketamine hydrochloride | Sigma-Aldrich Chemie GmbH | K2753-1G | |
| Xylazine hydrochloride | Sigma-Aldrich Chemie GmbH | X1251-1G | |
| sterile PBS | Biochrom | L182-50 | |
| digital camera | Nikon | Coolpix 5400 | |
| Syringe driven filter unit 0.45 μm | Millipore | ||
| Caliper | Mitutoyo 7309 | 1667338 | Farnell (distributor) |
| disease scoring sheet | example enclosed |
References
- Sitaru, C., Mihai, S., Otto, C., Chiriac, M. T., Hausser, I., Dotterweich, B. Induction of dermal-epidermal separation in mice by passive transfer of antibodies specific to type VII collagen. J. Clin. Invest. 115, 870-878 (2005).
- Kopecki, Z., Arkell, R. M., Strudwick, X. L., Hirose, M., Ludwig, R. J., Kern, J. S. Overexpression of the Flii gene increases dermal-epidermal blistering in an autoimmune ColVII mouse model of epidermolysis bullosa acquisita. J. Pathol. 225, 401-413 (2011).
- Kulkarni, S., Sitaru, C., Jakus, Z., Anderson, K. E., Damoulakis, G., Davidson, K. PI3Kβ plays a critical role in neutrophil activation by immune complexes. Sci. Signal. 4, 23-23 (2011).
- Chiriac, M. T., Roesler, J., Sindrilaru, A., Scharffetter-Kochanek, K., Zillikens, D., Sitaru, C. NADPH oxidase is required for neutrophil-dependent autoantibody-induced tissue damage. J. Pathol. 212, 56-65 (2007).
- Mihai, S., Chiriac, M. T., Takahashi, K., Thurman, J. M., Holers, V. M., Zillikens, D. The alternative pathway of complement activation is critical for blister induction in experimental epidermolysis bullosa acquisita. J. Immunol. 178, 6514-6521 (2007).
- Sesarman, A., Sitaru, A. G., Olaru, F., Zillikens, D., Sitaru, C. Neonatal Fc receptor deficiency protects from tissue injury in experimental epidermolysis bullosa acquisita. J. Mol. Med. 86, 951-959 (2008).
- Huang, X. R., Holdsworth, S. R., Tipping, P. G. Th2 responses induce humorally mediated injury in experimental anti-glomerular basement membrane glomerulonephritis. J. Am. Soc. Nephrol. 8, 1101-1108 (1997).
- Matsumoto, I., Staub, A., Benoist, C., Mathis, D. Arthritis provoked by linked T and B cell recognition of a glycolytic enzyme. Science. 286, 1732-1735 (1999).
- Oswald, E., Sesarman, A., Franzke, C., Wölfle, U., Bruckner-Tuderman, L., Jakob, T. The flavonoid luteolin inhibits Fcγ-dependent respiratory burst in granulocytes, but not skin blistering in a new model of pemphigoid in adult mice. PLoS One. 7, e31066 (2012).
- Liu, Z., Diaz, L. A., Troy, J. L., Taylor, A. F., Emery, D. J., Fairley, J. A. A passive transfer model of the organ-specific autoimmune disease, bullous pemphigoid, using antibodies generated against the hemidesmosomal antigen, BP180. J. Clin. Invest. 92, 2480-2488 (1993).
- Anhalt, G. J., Labib, R. S., Voorhees, J. J., Beals, T. F., Diaz, L. A. Induction of pemphigus in neonatal mice by passive transfer of IgG from patients with the disease. N. Engl. J. Med. 306, 1189-1196 (1982).
- Toyka, K. V., Brachman, D. B., Pestronk, A., Kao, I. Myasthenia gravis: passive transfer from man to mouse. Science. 190, 397-399 (1975).
- Rose, N. R., Bona, C. Defining criteria for autoimmune diseases (Witebsky’s postulates revisited. Immunol. Today. 14, 426-430 (1993).
- Sitaru, C. Experimental models of epidermolysis bullosa acquisita. Exp. Dermatol. 16, 520-531 (2007).
- Sitaru, C., Kromminga, A., Hashimoto, T., Bröcker, E. B., Zillikens, D. Autoantibodies to type VII collagen mediate Fcgamma-dependent neutrophil activation and induce dermal-epidermal separation in cryosections of human skin. Am. J. Pathol. 161, 301-311 (2002).
- Sesarman, A., Oswald, E., Chiriac, M. T., Csorba, K., Vuta, V., Feldrihan, V. Why human pemphigoid autoantibodies do not trigger disease by the passive transfer into mice. Immunol. Lett. , (2012).
- Ishii, N., Recke, A., Mihai, S., Hirose, M., Hashimoto, T., Zillikens, D. Autoantibody-induced intestinal inflammation and weight loss in experimental epidermolysis bullosa acquisita. J. Pathol. 224, 234-244 (2011).
