骨転移モデル
Summary
動物モデルは頻繁に骨への癌の転移を研究するために利用されている。このプロトコルでは、骨転移の研究のために腫瘍接種の2つの一般的な方法を説明し、簡単にこれらのモデルを監視し、定量化するために利用される分析のいくつかを説明します。
Abstract
骨転移は、乳癌、前立腺癌、および肺癌を含むいくつかの悪性腫瘍で一般的なものです。一度骨に設立され、腫瘍はかなりの罹患率と死亡率の1を担当している。このように、骨の腫瘍の確立、成長や活性を制御する分子メカニズムを理解するための重要な必要性がある。 in vivoモデルのいくつかは、これらの事象を研究するために設立され、それぞれが固有の利点と制限事項がありますされています。最も一般的に使用されるモデルは、無胸腺（ヌード）BalbCマウスの動脈血供給に直接腫瘍細胞の心臓内接種を利用しています。この手順は、多くの異なる腫瘍タイプ（PC-3前立腺癌、肺癌、およびマウスの乳腺脂肪体腫瘍を含む）に適用することが可能であるが、本稿で我々は、MDA-MB-231乳癌モデルに焦点を当てます。このモデルでは、我々はもともとサンアントニオの博士マンディのグループで導出された高度に骨選択的クローンを、利用している時間以来、GFPの発現のためにトランスフェクトされ、私たちのグループ3によって再クローニングさとして。このクローンはosteotropism率が高いと、肺、肝、副腎にはほとんど転移を有する骨転移変種です。心臓内注射は、最も一般的に骨転移2の研究のために使用されていますが、特定の場合にintratibial 4または乳房脂肪注入の方が適しています。 、骨に逮捕生き残る、増殖し、癌誘発性骨疾患に発展する腫瘍を確立するために具体的には、癌細胞の能力を転移の後の段階を監視することを目標に、ヒト腫瘍細胞を使用しているとき心臓内注射は、一般的に実行されます。腫瘍が確立された転移性骨疾患にほぼ相関して骨に転移した後にがん細胞と骨の関係に着目した場合Intratibial注射が行われます。塞栓症とエントリにもこれらのモデルを再現するの転移過程の初期段階では、前循環への腫瘍細胞の。骨へのプライマリ·サイトから原発腫瘍の増殖や転移を監視する場合は、次に乳房脂肪の接種は通常、優先ですが、非常に少数の腫瘍細胞株は一貫して、4T1骨優遇クローンで、プライマリサイトから骨に乳腺マウスを転移するでしょう癌、例外5,6である。
本稿では、このような細部接種の手続きを、ポスト接種分析における重要なステップが強調表示されます。具体的には、細胞培養、心臓とintratibial接種のために腫瘍細胞接種の手続きと同様に、X線、蛍光および組織形態計測分析による毎週のモニタリングに関する簡単な情報が含まれています。
Protocol
Discussion
腫瘍誘発性骨疾患の研究は、2つの最も一般的に使用されるが、心臓とintratibial接種そのうちのいくつかの動物モデルに依存しています。多くの場合、心臓、骨への転移を研究するための最良の選択肢であるが、それは完全な転移過程を表すものではありませんので、乳腺脂肪パッドまたは他の同所注射は、理想的には、その端部に向かって使用する必要があります。腫瘍細胞は、ヒト細胞を?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
P01CA040035（FE / JAS）とVAキャリア開発賞（JAS）：著者は、次の資金源を認める。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number |
| MDA-MB-231 human breast cancer cells | Originally ATCC-Internally cloned and selected | |
| DMEM | GIBCO | 11885 |
| PBS | Mediatech Inc | 21-040-CV |
| FBS | Atlas Biological | F-0050a |
| Trypsin | GIBCO | 15400 |
| Faxitron | Faxitron | |
| Maestro | CRi | |
| μCT scanner | Scanco | |
| Athymic Nude Mice | Harlan | Fox nu -/- |
| Insulin Syringes (300 μl, 28.5 g) | Becton Dickinson | 309300 |
| IVIS | Caliper | |
| Irradiated Rodent Diet | Teklad | 2920x |
References
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