척수로 (유전자 및 세포) 요법의 전달에 사용되는 수술 기술과 장치의 짧은 영상 설명입니다. 이 기술은 동물에 보여하지만, 완전히 번역 현재 인간 응용 프로그램에 사용되는입니다.
이 콘텐츠를 보려면 JoVE 구독이 필요합니다. 로그인하거나 오늘 무료 평가판을 시작하세요.
이 논문에서
요약
초록
이것은 척추에 (유전자 및 세포) 요법의 제공을위한 수술 기법 및 장치의 조합의 소형 시각적 설명입니다. 기술은 동물에서 증명되는 동안 절차는 FDA가 승인 한 현재 ALS 환자의 척수 코드에 줄기 세포 이식에 사용되는 것입니다. FDA가 높은 특징을 쥐 모델에서 치료 효과에 대한 증명 원리 데이터를 인식하지만, 큰 동물의 사용은 수술의 결합, 장치 및 인간의 사용에 대한 최종 치료의 안전을 확인을위한 중요 간주됩니다 . 크기, 해부학, 그리고 돼지의 척추와 척추의 일반적인 문제는 더 나은 모델 인간을로 인정 받고 있습니다. 또한, 노출 및 조작 척수를뿐만 아니라 돼지에 상처를 폐쇄의 수술 과정은 인간의 거의 구분할 수 있습니다. 우리는 건강한 돼지 모델 criti를 나타냅니다 생각절차 안전 연구에 칼 첫 걸음.
프로토콜
1. 동물 사용
여기 증명 절차에 모리 대학 기관 동물 케어 및 사용위원회 (IACUC)에 의해 승인되었습니다. 약 15~20킬로그램 무게 여성 괴팅겐의 minipigs이 사용됩니다.
2. 마취
동물 수술하기 전에 약 12 시간을 금식하고 있습니다. 동물 진정 작용과 마취 유도는 근육 케타민 (35 MG / kg), Acepromazine (1.1 밀리그램 / kg) 및 아트로핀 (0.04 밀리그램 / kg)의 칵테일로 구성되어 있습니다. 동물 그런 다음 intubated와 산소와 1-3% isoflurane 전신 마취에 유지됩니다. 이 시점에서, 다시 각 동물의 머리는 면도 있습니다. 마취 심도는 수의학 직원에 의해 모니터링된다. , interdigital 각막과 palpebral 반사뿐만 아니라, 심장, 호흡, 펄스 oximetry, 간접 / 직접 혈압, 최종 갯벌 탄소 이산화탄소 측정 및 근육 톤 / 유해 자극에 대한 반응의 부재는 깊이를 모니터링하는 데 사용됩니다 마취의.
3. 위치
동물은 수술실로 이동하고 잭슨 척추 수술 ....
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
결과
| Tarlov 평가 점수 | |
| 0 | 마비, 아니 운동 |
| 1 | 두 다리에 지각 tonus, 약간의 운동 |
| 이 | 두 다리의 운동 만 앉거나 서서 할 수 없습니다 |
| 3 | 하지만 ataxic 짧은 기간 동안을 서서 걸어 할 수있는 능력 |
| 4 | 완전한 복구, 정상적인 운동 기능 |
표 1. Tarlov 점수. 신경 병적 상태 및 복구는 동물의 운동 기능 점수를하여 평가된다.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
토론
인간 7-9에 설명 된 기술을 계속 진행하기 위해 승인에도 불구하고, 중요한 질문은 성공 척추 요법에 대한 순서로 답변을 할 수 남아 있습니다. intraparenchymal 주사로 척추 허용의 엄격한 이해, 퇴행성 demyelinating 및 외상성 척추 질환에 대한 치료를 개발하는 실험의 계획 및 실행을 사용하도록 설정해야합니다. 현재 대형 포유류의 척추가 과도하고 영구적 인 질병없이 용인 할 수있는 주사의 수 더 명확한 이해가 없습니다. 마찬가지로, 주사의 간격은 병적에 영향을 미칠 가능성이 높습니다. 또한, 매크로 (예를 들면, 환기 관련 또는 부주의 환자의 움직임)과 미세 (즉, 환기 및 심장 맥박이 모두 진동) 척추의 움직임은 분사 동안 척수 위험을 가지고 있습니다. 큰 동물 모델에서 질병에 대한 임계 값에 대한 이해가 도움이 될모든 척추 치료 프로그램에 계산을 주입. 우리 병진 척추 이식 연구소는 현재 척추 응용 프로그램에 대한 재판을 디자인하는 .......
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
공개 사항
박사 Boulis는 인간 척추의 안전하고 정확한 주사를 사용하려면 장치의 발명가이다. Neuralstem, Inc는이 기술에 대한 독점적 인 사용권을 구입했다. 박사 Boulis이 요금의 invento의 점유율을받은이 기술의 배포에 대한 로열티 지불에 대한 권리가 있습니다. 다른 저자 공개는 아무 상관이 없습니다.
감사의 글
우리는 동물 치료 동물 자원 직원의에 모리 대학 본부 감사드립니다. 자금 출처는 다음과 같습니다 ALS 협회, 국방부, 그리고 Neuralstem, 주식회사
....액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| 장비의 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 코멘트 (선택 사항) |
| 척추 데릭 | Neuralstem 주식회사 | Neuralstem, Inc는이 기술에 독점적 인 라이센스를 구입 한 | |
| MINJ-PD Microinjector 펌프 | Tritech 연구 주식회사 | 이 특정 응용 프로그램에 대한 사용자 정의 | |
| 플로팅 정맥 | Neuralstem 주식회사 | 이 특정 응용 프로그램에 대한 사용자 정의 디자인 |
참고문헌
- Usvald, D., et al. Analysis of dosing regimen and reproducibility of intraspinal grafting of human spinal stem cells in immunosuppressed minipigs. Cell Transplant. 19, 1103-1122 (2010).
- Riley, J., et al.
액세스가 제한되었습니다. 이 콘텐츠를 보려면 로그인하거나 체험판을 시작하세요.
재인쇄 및 허가
