Интраназального введения ЦНС терапии, чтобы Awake Мыши
Summary
Метод управления препаратов интраназально пробудить мышей с целью ориентации мозга описаны. Этот метод позволяет для повторного дозирования в течение длительного периода использования интраназального введения препарата без анестезии, и нос к мозгу доставки с минимальными системными экспозиции.
Abstract
Интраназальная администрация способ доставки терапевтических агентов в центральной нервной системе (ЦНС). Это является неинвазивным и позволяет большие молекулы, которые не пересекают гематоэнцефалический барьер доступа к ЦНС. Наркотики, непосредственно ориентированных на ЦНС с интраназальной доставки, снижение системного воздействия и, следовательно, нежелательные системные побочные эффекты 1. Доставка от носа к центральной нервной системе происходит в течение нескольких минут по обеим обонятельного и тройничного нервных путей с помощью внеклеточных маршрут и не требует наркотиков привязать к любому рецептору или аксонального транспорта 2. Интраназальной доставки широкое распространение метод и в настоящее время используется в клинические испытания на человеке 3.
Интраназальной доставки лекарств на животных моделях, позволяет первоначальной оценки фармакокинетических распределения и эффективности. С мышами, можно вводить препараты для бодрствования (без наркоза) животных на регулярной основе, используя специальказывают интраназальной захватом. Awake доставки выгодна, поскольку она позволяет долгосрочных хронических дозирования без анестезии, это занимает меньше времени, чем при анестезии, и может быть изучено и сделано много людей, так что команды техников могут доза большого количества мышей в короткие сроки. Эффективность терапии вводят интраназально таким образом, чтобы мышах было показано в ряде исследований, в том числе инсулина у больных сахарным диабетом моделей мышей 4-6 и дефероксамин в моделях болезни Альцгеймера мыши. 7,8
Интраназального ручка для мышей можно научиться, но это не легко и требует практики, мастерство и точный захват для эффективного предоставления наркотиков на мозг и избежать дренаж в легких и желудка. Мыши сдерживается вручную с помощью модифицированного шкирку в не доминантной рукой с шеи проведена параллельно полу, а наркотики поставляются с использованием пипетки доминирующей рукой. Обычно это занимает 3-4 недели акклиматизации к обработке до мышеймогут быть проведены с этой рукояткой без стресса. Мы подготовили эту Юпитера видео, чтобы сделать эту технику интраназального доставки более доступными.
Protocol
Representative Results
Discussion
Этот метод показывает, как мышь может быть дан очередной дозы препарата интраназально целевой мозга без использования анестезии. Интраназально препарат может быть доставлен в больших группах мышей в течение длительных периодов времени с минимальными усилиями. Одной группе до 20 мышей…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Авторы хотели бы поблагодарить HealthPartners Институциональные уходу и использованию животных комитета в больнице регионов.
Materials
| Materials | Company | Cat # | Comment |
| P20 pipettor set at 6 μl | |||
| Gel loading pipette tips | |||
| Timer | |||
| Waste receptacle for tips | |||
| Dosing sheet for notes | |||
| Pen | |||
| Drug and vehicle | |||
| Container to hold drug vials | |||
| Animals to be dosed | |||
| Spare gloves | |||
| Paper towels to wipe urine | |||
| Table 3. Materials Needed |
References
- Dhuria, S. V., Hanson, L. R., Frey, W. H. Intranasal delivery to the central nervous system: mechanisms and experimental considerations. J. Pharm Sci. 99, 1654-1673 (2010).
- Thorne, R. G., Pronk, G. J., Padmanabhan, V., Frey, W. H. Delivery of insulin-like growth factor-I to the rat brain and spinal cord along olfactory and trigeminal pathways following intranasal administration. 신경과학. , 127-481 (2004).
- Benedict, C., et al. Intranasal insulin as a therapeutic option in the treatment of cognitive impairments. Exp. Gerontol. 46, 112-115 (2011).
- Francis, G. J., et al. Intranasal insulin prevents cognitive decline, cerebral atrophy and white matter changes in murine type I diabetic encephalopathy. Brain. 131, 3311-3334 (2008).
- Francis, G., et al. Intranasal insulin ameliorates experimental diabetic neuropathy. Diabetes. 58, 934-945 (2009).
- Marks, D. R., Tucker, K., Cavallin, M. A., Mast, T. G., Fadool, D. A. Awake intranasal insulin delivery modifies protein complexes and alters memory, anxiety, and olfactory behaviors. J. Neurosci. 29, 6734-6751 (2009).
- Hanson, L., et al. Intranasal delivery of deferoxamine reduces spatial memory loss in APP/PS1 mice. Drug Delivery and Translational Research. 2, 160-168 (2012).
- Danielyan, L., et al. Protective effects of intranasal losartan in the APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer disease. Rejuvenation Research. 13, 195-201 (2010).
- Fine, J. M., et al. Intranasal deferoxamine improves performance in radial arm water maze, stabilizes HIF-1alpha, and phosphorylates GSK3beta in P301L tau transgenic mice. Exp. Brain Res. 219, 381-390 (2012).
- Lochhead, J. J., Thorne, R. G. Intranasal delivery of biologics to the central nervous system. Adv. Drug Deliv. Rev. 64 (11), 614-628 (2012).
- Hanson, L. R., et al. Intranasal deferoxamine provides increased brain exposure and significant protection in rat ischemic stroke. J. Pharmacol. Exp Ther. 330, 679-686 (2009).
- Reger, M. A., et al. Effects of intranasal insulin on cognition in memory-impaired older adults: modulation by APOE genotype. Neurobiol. Aging. 27, 451-458 (2006).
- Kim, C. H., Song, H. y. u. n., M, E. u. n. A. h. n., Lee, Y., G, J., Yoon, J. H. Effect of hypo-, iso- and hypertonic saline irrigation on secretory mucins and morphology of cultured human nasal epithelial cells. Acta Otolaryngol. 125, 1296-1300 (2005).
- Greiff, L., Andersson, M., Wollmer, P., Persson, C. G. Hypertonic saline increases secretory and exudative responsiveness of human nasal airway in vivo. Eur. Respir. J. 21, 308-312 (2003).
