कोलोरेक्टल कैंसर के Orthotopic माउस मॉडल
Summary
Cecum पर cecal या चमड़े के नीचे ट्यूमर का एक टुकड़ा की दीवार प्रत्यारोपण में एक कैंसर कोशिका निलंबन के इंजेक्शन: दो तकनीकों इस मॉडल स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. इस मॉडल कोलोरेक्टल कैंसर के प्राकृतिक प्रगति का अध्ययन करने और कोलोरेक्टल कैंसर के खिलाफ नया चिकित्सात्मक एजेंटों के परीक्षण के लिए उपयोगी है.
Abstract
पारंपरिक उपचर्म ट्यूमर मॉडल से कम कोलोरेक्टल कैंसर के अध्ययन के लिए आदर्श है. कोलोरेक्टल कैंसर के Orthotopic माउस मॉडल है, जो कैंसर कोशिकाओं को उनके प्राकृतिक स्थान में बढ़ रही सुविधा, उच्च निष्ठा के साथ मानव रोग को दोहराने. दो तकनीकों के लिए इस मॉडल स्थापित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. दोनों तकनीकों के समान हैं और cecum के जोखिम के लिए माउस संज्ञाहरण और laparotomy की आवश्यकता है. एक तकनीक cecal दीवार में कोलोरेक्टल कैंसर सेल निलंबन के इंजेक्शन शामिल है. कैंसर की कोशिकाओं को पहली बार संस्कृति में बड़े हो रहे हैं, काटा subconfluent जब और एक एकल कक्ष निलंबन के रूप में तैयार किया. कक्षों की एक छोटी मात्रा धीरे – धीरे इंजेक्शन के रिसाव से बचने के. अन्य तकनीक cecum पर चमड़े के नीचे ट्यूमर का एक टुकड़ा का प्रत्यारोपण शामिल है. एक पहले से स्थापित उपचर्म कोलोरेक्टल ट्यूमर के साथ एक माउस और euthanized है और ट्यूमर बाँझ तकनीक का उपयोग करने के लिए निकाल दिया जाता है. ट्यूमर टुकड़ा दूसरे माउस को प्रत्यारोपण के लिए छोटे टुकड़ों में विभाजित है. प्रत्यारोपण करने से पहले, cecal दीवार हल्के ट्यूमर सेल घुसपैठ की सुविधा क्षतिग्रस्त है. प्राथमिक ट्यूमर और जिगर metastases के विकास के समय तकनीक, सेल लाइन, और माउस इस्तेमाल किया प्रजातियों के आधार पर अलग अलग होंगे. इस orthotopic माउस मॉडल कोलोरेक्टल कैंसर के प्राकृतिक प्रगति का अध्ययन करने और कोलोरेक्टल कैंसर के खिलाफ नया चिकित्सात्मक एजेंटों के परीक्षण के लिए उपयोगी है.
Protocol
Discussion
हालांकि माउस उपचर्म ट्यूमर मॉडल स्थापित करने और निगरानी के लिए आसान कर रहे हैं, यह स्पष्ट है कि इस मॉडल में कोलोरेक्टल कैंसर के मूल शारीरिक साइट नकल नहीं कर सकते. Microenvironment में अंतर के कारण, कोलोरेक्टल कैंसर कोशिक?…
Acknowledgements
सर्जरी विभाग, विश्वविद्यालय कैलिफोर्निया, सैन फ्रांसिस्को
रेमंड शाहीन, एमडी
Materials
| Material Name | Type | Company | Catalogue Number | Comment |
|---|---|---|---|---|
| Cell culture media and components | will vary depending on cell line used | |||
| Phosphate Buffered Saline | BioWhitaker | 17-512F | also sold by a number of other vendors | |
| 15 mL centrifuge tubes, polypropylene | Corning | 430790 | ||
| 6 well plates with lid | Becton Dickinson Labware | 353046 | ||
| Iris forceps, straight, serrated tips | World Precision Instruments | 15914 | best to have a pair of these instruments | |
| Iris dissecting scissors, straight, sharp | World Precision Instruments | 14393 | ||
| Needle Holder (regular) | World Precision Instruments | 14109 | ||
| Needle Holder (Castroviejo) | World Precision Instruments | 14137 | ||
| Cidex Plus | World Precision Instruments | 7364 | instruments should be autoclaved periodically, but may also be sterilized by soaking in Cidex | |
| 6-0 or 7-0 suture | for cecum; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| 3-0 or 4-0 suture | for abd wall; courtesy of Department of Surgery, UCSF | |||
| Anesthetic machine / Isoflurane | J.A. Baulch and Associates | 3206 | also sold by a number of other vendors | |
| Heating Pad, disposable, 6″ x 6″ | Prism Technologies | 20419 | ||
| Tape, orange, 13 mm x 13 m | Fisher Scientific | 15901F | for restraining anesthetized mouse | |
| Pro-Cord/Cordless Trimmer | Oster | 78997-010 | for shaving mouse fur | |
| Betadine | Fisher Scientific | 19-027132 | may also be purchased at any medical supply store | |
| 2 x 2 gauze, 3-ply | Johnson and Johnson | 7635 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Sterile Field, Barrier, 16″ x 29″ | Johnson and Johnson | 0905 | may also be purchased at any medical supply store | |
| Cotton tipped applicators, 6″ | Fisher Scientific | 14-960-3Q | may also be purchased at any medical supply store | |
| Syringe, 10 cc, Luer lock tip | BD | 309604 | ||
| Syringe, 1 cc, tuberculin, slip tip | BD | 309602 | ||
| 27 1/2 G needle | BD | 305109 | ||
| 30 G needle | BD | 305106 |
References
- Heijstek, M. W., Kraneburg, O., Rinkes Borel, I. H. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Dig Surg. 22, 16-25 (2005).
- Kobaek-Larsen, M., Thorup, I., Diederichsen, A., Fenger, C., Hoitinga, M. R. Review of colorectal cancer and its metastases in rodent models: comparative aspects with those in humans. Comp Med. 50, 16-26 (2000).
- Wilmanns, C., Fan, D., O'Brian, C. A., Bucana, C. D., Fidler, I. J. Orthotopic and ectopic organ environments differentially influence the sensitivity of murine colon carcinoma cells to doxorubicin and 5-fluorouracil. Int J Cancer. 52, 98-104 (1992).
- Kashtan, H., Rabau, M., Mullen, J. B., Wong, A. H. C., Roder, J. C., Shiptz, B., Stern, H. S., Gallinger, S. Intra-rectal injection of tumor cells: a novel animal model of rectal cancer. Surg Oncol. 1, 251-256 (1992).
