における寿命の測定<em>キイロショウジョウバエ</em
Summary
キイロショウジョウバエは寿命調節の分子基盤を探索するための強力なモデル生物である。このプロトコルは、長寿の再現性は、人口ベースの測定だけでなく、潜在的な落とし穴とその回避方法を生成するために必要な手順を説明します。
Abstract
高齢化は、それが検討されたほぼすべての生物が順調に生理的な劣化の結果は、減少した身体能力と疾患のリスクの増加につながるという現象である。個々の高齢化は、多くの場合、年齢をマッチさせた個体の大規模コホートで寿命を観察することにより、実験室で測定され、年齢に依存死亡率の増加は、人口レベルでのマニフェストです。単純なモデル生物でどの遺伝や環境操作衝撃寿命の程度を定量化しようとする実験が寿命を延長し、哺乳類では加齢に伴う疾患を予防するための分類群を横切って、感激新しい戦略のために保存されており、高齢化の側面を理解するために著しく成功してきた。
ショウジョウバエ、 キイロショウジョウバエは 、その比較的短い寿命、便利業、そして容易な遺伝に起因する老化のメカニズムを研究するための魅力的なモデル生物である。しかし、年齢別生存率と死亡率を含め、高齢化の人口学的指標は、実験的なデザインと環境のわずかな変化に非常に敏感である、老化実験期間中の厳格な検査室の安全基準の整備が必要となります。これらの考慮事項は、一緒に遺伝的背景を慎重にコントロールを練習する必要性と、堅牢な測定値を生成するために不可欠です。確かに、環境や遺伝的アーティファクト1-4にトレースされている酵母、ワーム、ハエやマウスの長寿実験から推論を取り巻く多くの著名な論争があります。このプロトコルでは、我々は、実験室のバイアルを使用して、ショウジョウバエの寿命を測定することが長年にわたって最適化されている一連の手順を説明します。私達はまた私達の研究室で開発され、ダウンロード（利用可能ですdLifeたソフトウェアの使用を記述http://sitemaker.umich.edu/pletcherlab /ソフトウェア）。 dLifeは、スループットを加速し、フライ処理とデータ収集の簡素化、データ解析の標準化、最適な実験デザインを組み込むことにより、優れた実践を推進しています。また、設計、収集、および寿命のデータの解釈には多くの潜在的な落とし穴について説明します、我々はこれらの危険性を回避するための手順を提供します。
Protocol
Representative Results
Discussion
ここで紹介するプロトコルは、遺伝薬理学的、および環境的介入の評価のために適応可能であるショウジョウバエの成虫寿命の再現性のある測定値を生成するための方法を説明します。プロトコルの重要な側面は、慎重に、幼虫の開発環境を制御する大人のストレスを最小限にし、実験群とコントロールの間にバイアスを最小限に含まれています。またdLife寿命実験管理ソフトウェア?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、エリソン医学財団（SDP、からの資金によって支えられhttp://www.ellisonfoundation.org/index.jsp ）、NIH K01AG031917（NJL、 http://www.nih.gov/ ）、NIH 5T32GM007315-35 （JR）とNIH R01AG030593（SDP）。この作品は、P30-AG-013283（老化の国立研究所によって資金を供給され、老化の生物学における卓越性のネイサンショックセンターのショウジョウバエ老化コア（DAC）のリソースを活用しhttp://www.nih.gov/を ）。著者は、原稿の批判的な読みのために特に有用な議論とブライアンチョンのためPletcher研究所に感謝したいと思います。我々は、データ収集の支援についてはニックAsherとキャスリンBorowiczを承認したいと思います。
Materials
| Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
| Active Dry Yeast | Fleishmann’s Yeast | 2192 | |
| Grape Agar Powder Premix | Genesee Scientific | 47-102 | |
| Large Embryo Collection Cages | Genesee Scientific | 59-101 | |
| Large Replacement End Caps | Genesee Scientific | 59-103 | |
| 6 oz Square Bottom Bottles, polypropylene | Genesee Scientific | 32-130 | |
| Flugs Closures for Stock Bottles | Genesee Scientific | 49-100 | |
| Drosophila Vials, Wide, Polystrene | Genesee Scientific | 32-117 | |
| Flugs Closures for Wide Vials | Genesee Scientific | 49-101 | |
| Wide Orifice Aardvark Pipet Tips, 200 ul | Denville Scientific | P1105-CP | |
| Flystuff Flypad, Standard Size | Genesee Scientific | 59-114 | |
| BD Falcon 15 ml Conical Centrifuge Tubes | Fisher Scientific | 14-959-70C | |
| Fisherbrand Petri Dishes with Clear Lids, Raised Ridge; 100 O.D. x 15 mm H; | Fisher Scientific | 08-757-12 | |
| Kimax* Colorware Flasks 1,000 ml yellow | Fisher Scientific | 10-200-47 | |
| PBS pH 7.4 10x | Invitrogen | 70011044 | |
| Gelidium Agar | Mooragar | n/a | |
| Brewer’s Yeast | MP Biomedicals | 0290331280 | |
| Granulated Sugar | Kroger | n/a | |
| Tegosept | Genesee Scientific | 20-266 | Fly Food Preservative |
| Propionic Acid, 99% | Acros Organics | 149300025 | Fly Food Preservative |
| Kanamycin Sulfate | ISC BioExpress | 0408-10G | |
| Tetracycline HCl | VWR | 80058-724 |
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