Summary

Tactiele Conditioning En Movement Analyse Van antennaal bemonsteringsstrategieën In Honey Bees (<em> Apis mellifera</em> L.)

Published: December 12, 2012
doi:

Summary

In dit protocol laten we zien hoe de conditie van de bijen aangewend om tactiele stimuli en de invoering van een 2D motion capture techniek voor het analyseren van de kinematica van gedetailleerde antennaal sampling patroon.

Abstract

Honingbijen (Apis mellifera L.) zijn eusociale insecten en bekend om hun complexe verdeling van arbeid en associatief leren capaciteit 1, 2. De werkbijen brengen de eerste helft van hun leven in de donkere bijenkorf, waar ze het verzorgen van de larven of de bouw van de reguliere zeshoekige kammen voor voedsel (zoals stuifmeel of nectar) en broed 3. De antennes zijn buitengewone multisensorische voelsprieten en spelen een centrale rol in de verschillende tactiele gemedieerde taken 4, met inbegrip van bijenkorf gebouw 5 en patroonherkenning 6. Later in het leven, elke afzonderlijke bijen laat de korf om te foerageren naar voedsel. Dan een bij moet leren om winstgevend voedselbronnen discrimineren, hun plaats te onthouden, en het communiceren met haar nestgenoten 7. Bijen maken gebruik van verschillende bloemen signalen zoals kleuren of geuren 7, 8, maar ook tactiele signalen van het blaadje oppervlak 9 tot en met multisensorische herinneringen aan de voedselbron vormen. Onder laboratorium conditions, kunnen de bijen worden getraind in een appetitieve leren paradigma om tactiele object functies, zoals randen of groeven met hun antennes 10, 11, 12, 13 discrimineren. Deze leerparadigma hangt nauw samen met de klassieke conditionering van de olfactorische proboscis extensie reactie (PER) in benut bijen 14. Het voordeel van de voelbare leren in het laboratorium mogelijke combinaties gedragsexperimenten op leren met verschillende fysiologische metingen, inclusief analyse van de antennelid bewegingspatroon.

Protocol

1. Voorbereiding van de bijen Nectar of Pollen verzamelaars zitten gevangen in het veld hetzij van een sucrose feeder of rechtstreeks van de korf ingang terwijl het terugkeren van een foerageer reis. Elke afzonderlijke bijen wordt opgevangen in een glazen injectieflacon die is afgesloten met een schuim plug en onmiddellijk in het laboratorium voor verdere behandeling. In het laboratorium worden de vastgelegde bijen kort gekoeld in de koelkast bij 4 ° C totdat ze tonen eerste tekenen van immobilitei…

Representative Results

In het volgende experiment onderzochten we hoe tactiele leren antennaal bemonstering gedrag in honing bijen beïnvloedt. Hiervoor hebben we bewaakt de beweging van de tip antennelid in naïeve en geconditioneerde bijen voor en tijdens presentatie van een tactiele prikkel. Eerst werd de spontane antennelid beweging van een groep van pollen voedermachines (N = 42) opgeslagen gedurende 1 minuut. Helft van de bijen (N = 21) werd bepaald door koppelen vijfmaal een tactiele prikkel met 30% sucrose…

Discussion

Voorbereiding van de bijen: Het verzamelen en tot vaststelling van de bijen moet snel worden gedaan, om de stress niveau van het dier laag te houden. Stress heeft een effect op de PER-reactiviteit en dus kan een indirect effect op de leerprestaties in bijen 19, 20. Het spanningsniveau kan worden verminderd door het plaatsen van de glazen flacon met de bijen direct op ijs direct na afname snel immobiliseren. Moet worden gehouden dat bijen meer tijd hoe langer de anesthesie herstellen periode v…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Wij danken Joachim Erber voor de invoering van ons om de tactiele leren in honingbijen. Dit werk werd ondersteund door de Cluster of Excellence 277 CITEC, gefinancierd in het kader van het Duitse Excellence Initiative.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Pollen foragers, Apis mellifera L. Private hives
Glass vials (22 x 45 mm) Carl Roth GmbH & Co X655.1
Brass tubes, 10 x 30 mm Self-produced
Brass cube, 3 x 5 mm Self-produced
Tipp-Ex (solvent-free) Tipp-Ex GmbH & Co KG
Sucrose solution (30%) Household suger diluted in water
Ethanol (70%) Carl Roth GmbH & Co 9065.3
Syringe (1 ml) and needle (0.6 x 25) Carl Roth GmbH & Co 59.1
Stop Watch Carl Roth GmbH & Co L423.1
Micromanipulator Märzhäuser MM33 00-42-101-0000
Digital video camera Basler A602f-2
Macro lens for camera TechSpec VZM 200
Matlab R2009b The MathWorks

References

  1. Page, R. E., Scheiner, R., Erber, J., Amdam, G. V. The development and evolution of division of labor and foraging specialization in a social insect (Apis mellifera L.). Curr. Top. Dev. Biol. 74, 253-286 (2006).
  2. Menzel, R., Müller, U. Learning and memory in honeybees: From behavior to neural substrates. Annu. Rev. Neurosci. 19, 379-404 (1996).
  3. Seeley, T. D. . The wisdom of the hive. , (1995).
  4. Staudacher, E., Gebhardt, M. J., Dürr, V. Antennal movements and mechanoreception: neurobiology of active tactile sensors. Adv. Insect Physiol. 32, 49-205 (2005).
  5. Martin, H., Lindauer, M. Sinnesphysiologische Leistungen beim Wabenbau der Honigbiene. Z. Vergl. Physiol. 53, 372-404 (1966).
  6. Kevan, P. G., Menzel, R., Mercer, A. Texture sensitivity in the life of honeybees. Neurobiology and behavior of honeybees. , 96-101 (1987).
  7. von Frisch, K. . Tanzsprache und Orientierung der Bienen. , (1965).
  8. Waser, N. M. Flower constancy: definition, cause, and ceasurement. Am. Nat. 127, 593-603 (1986).
  9. Kevan, P. G., Lane, M. A. Flower petal microtexture is a tactile cue for bees. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82, 4750-4752 (1985).
  10. Erber, J., Kierzek, S., Sander, E., Grandy, K. Tactile learning in the honeybee. J. Comp. Physiol. A. 183, 737-744 (1998).
  11. Kisch, J., Erber, J. Operant conditioning of antennal movements in the honey bee. Behav. Brain. Res. 99, 93-102 (1999).
  12. Scheiner, R., Erber, J., Page, R. E. Tactile learning and the individual evaluation of the reward in honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 185, 1-10 (1999).
  13. Erber, J., Scheiner, R., Adelman, G., Smith, B. Honeybee learning. Encyclopedia of Neuroscience. , (2004).
  14. Bitterman, M. E., Menzel, R., Fietz, A., Schäfer, S. Classical conditioning of proboscis extension in honeybees (Apis mellifera). J. Comp. Psychol. 97, 107-119 (1983).
  15. Dacher, M., Gauthier, M. Involvement of NO-synthase and nicotinic receptors in learning in the honey bee. Physiol. Behav. 95, 200-207 (2008).
  16. Haralick, R. M., Shapiro, L. G. . Computer and Robot Vision. I, (1992).
  17. Erber, J., Galizia, C. G., et al. Tactile antennal learning in the honey bee. Honeybee Neurobiology and Behavior. , 439-455 (2012).
  18. Pankiw, T., Page, R. E. Effect of pheromones, hormones, and handling on sucrose response thresholds of honey bees (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 189, 675-684 (2003).
  19. Harris, J. W., Woodring, J. Effects of stress, age, season and source colony on levels of octopamine, dopamine and serotonine in the honey bee (Apis mellifera L.) brain. J. Insect. Physiol. 38, 29-35 (1992).
  20. Scheiner, R., Kuritz-Kaiser, A., Menzel, R., Erber, J. Sensory responsiveness and the effects of equal subjective rewards on tactile learning and memory of honeybees. Learn. Mem. 12, 626-635 (2005).
  21. Mujagic, S., Sarkander, J., Erber, B., Erber, J. Sucrose acceptance and different forms of associative learning of the honey bee (Apis mellifera L.) in the field and laboratory. Front. Behav. Neurosci. 4, 46 (2010).
  22. Scheiner, R., Barnert, M., Erber, J. Variation in water and sucrose responsiveness during the foraging season affects proboscis extension learning in honey bees. Apidologie. 34, 67-72 (2003).
  23. Mujagic, S., Erber, J. Sucrose acceptance, discrimination and proboscis responses of honey bees (Apis mellifera L.) in the field and the laboratory. J. Comp. Physiol. A. 195, 325-339 (2009).
  24. Friedrich, A., Thomas, U., Müller, U. Learning at different satiation levels reveals parallel functions for the cAMP-protein kinase A cascade in formation of long-term memory. J. Neurosci. 24, 4460-4468 (2004).
  25. Erber, J., Pribbenow, B., Grandy, K., Kierzek, S. Tactile motor learning in the antennal system of the honeybee (Apis mellifera L.). J. Comp. Physiol. A. 181, 355-365 (1997).
  26. Lambin, M., Déglise, P., Gauthier, M. Antennal movements as indicators of odor detection by worker honeybees. Apidologie. 36, 119-126 (2005).
check_url/kr/50179?article_type=t

Play Video

Cite This Article
Mujagić, S., Würth, S. M., Hellbach, S., Dürr, V. Tactile Conditioning And Movement Analysis Of Antennal Sampling Strategies In Honey Bees (Apis mellifera L.). J. Vis. Exp. (70), e50179, doi:10.3791/50179 (2012).

View Video