Summary

Fare Kısa ve Uzun Vadeli Lokomotor Aktivite video Takip Yazılımı ile Analiz

Published: June 20, 2013
doi:

Summary

Lokomotor aktivite (LMA) farelerde davranış basit ve kolay uygulanabilir bir ölçüsüdür. Video izleme yazılımı (VTS) ve LMA Kaplin LMA analizi manuel, çizgi geçiş yöntemi ile karşılaştırıldığında, özellikle, özgüllük ve duyarlılık geliştirilmesi için izin verir. Ayrıca VTS fare LMA uzun vadeli izleme sağlar.

Abstract

Lokomotor aktivite (LMA) fare ve diğer kemirgenler davranış basit ve kolay uygulanabilir bir ölçüsüdür. Video izleme yazılımı (VTS) gelişmeler bu manuel puanlama ile hat geçişi yöntemi ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde özgüllük ve duyarlılığı geliştirmek, LMA test birleştiğinde izin var. Buna ek olarak, VTS yüksek verimli bir deney sağlar. Açık alan testi (OFT) için kullanılan Otomatik film izleme benzer, LMA test benzersiz olmasına rağmen bu bu fareler kendi kafes içinde kalmasını sağlar ve ışık-karanlık aktif aşamasında parlak aydınlatma anksiyojenik uyarıcı kullanmak değildir döngüsü. Artık hareket çalışmaları (saat-gün) sık kullanılan vericileri ve biyotelemetri implante varken Geleneksel olarak, LMA, zaman (dakika) kısa bir süre için kullanılmıştır. Gerçek zamanlı izleme seçeneği ile, uzun, kısa vadeli LMA test gibi, şimdi çekmesi kullanılarak yapılabilir. Uzun vadeli LMA testler, uzman gerektirir, Ancak gıda ve su (ki genellikle kafes üzerine konumlandırılmış) video çekmesi engel olmadığını bu kadar kolay, kafes inşa. Önemlisi, videografisi ve VTS zor veya çizgi geçme ve / veya biyotelemetri ile ölçmek olanaksız olan bu tür fare hareket yolu gibi parametrelerin, miktarının sağlar. Özetle, VTS için birleştiğinde LMA test fare hareketi bir daha eksiksiz bir açıklaması ve uzun bir süre boyunca hareket incelemek yeteneği tanıyor.

Protocol

1. Kısa vadeli LMA Kurma ve Prosedürü Kısa vadeli LMA kafes kurmak Tek yer fare evde kafes içinde kısa vadeli LMA test edin. VTS bağımlı görüntü analizi kolaylaştırmak için, fare renk (beyaz fareler ve siyah fareler için açık renkli yatak için yani koyu renkli yatak) ile yüksek aksine yatak kullanın. Kısa vadeli LMA test sırasında, 11 x ¼ çaplı delikler uygun havalandırma destek ile pleksiglas net ¼ ile kafesleri kapsamaktadır. </…

Representative Results

Tekrarlanan bir önlem elde edilen sonuçların bir örnek, kısa süreli LMA testi Şekil 1 'de gösterilmiştir. Bu rakam lipopolisakkarid (LPS) uygulamasından sonra, fareler daha hızlı ortam çevre kafes (AEC) 6 içinde yer farelere göre daha kısa vadeli lokomotor aktivite kurtarmak tek tek havalandırmalı kafes (IVC) içinde yer olduğunu göstermektedir. Lokomotor aktivite ilk kaybı LPS enjekte gruplar arasında benzer olsa da, bazal LMA için kurtarma IVC-ev sahipliği farele…

Discussion

Farelerde hastalık belirtileri uyuşukluk, sosyal ve çevresel ortamda ilgi kaybı, halsizlik ve iştahsızlık 2-3 içerir. Farenin ve kemirgenlerde, LMA immün aktivasyon 4-5 sonra hastalık değerlendirmek için de kullanılabilir. Ayrıca, uzun vadeli LMA sirkadiyen davranış veya uyku / uyanıklık desen bozuklukları tedavi bağlı değişiklikler analizi sağlayan 24 saat (veya daha büyük) süre içinde hareketini takip olanağı sunar. Bu non-invaziv, kolayca tekrar ölçü veya sürekl…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Destek: Bu araştırma, Ulusal Sağlık Enstitüleri (DK064862, NS058525 ve GGF için AA019357) tarafından desteklenmiştir.

Materials

Name of Reagent/Material Company Catalog Number Comments
Video camera Sony HDR-XR500V Other, similar video cameras may work as well. The file storage format (codec/container) must be compatible with the VTS used. It is recommended when initially establishing a VTS to choose the VTS first and work with the vendor in choosing an appropriate camera, especially with respects to file format and video resolution compatibility.
Opaque cage dividers     Custom fabricated based on specific cage dimensions. To facilitate image analysis, dividers should be of a similar color to the cage bedding. Structurally fixed dividers are preferrable because they speed setup between multi-mice experiments, such as those involving repeated measurements. Sturdy transportable cage dividers can be constructed of 1/2 inch opaque plastic and joined via a series of cross laps.
Light or Dark bedding (opposite of mouse coat color)     Available from several laboratory animal supply distributors, depending on location.
Clear Plexiglas cage tops     Custom fabricated based on cage dimensions.
Automated video tracking software (EthoVision XT 7) Noldus Information Technology   A variety of VTS manufacturers exist, use of other software may suffice.
PC Dell Inc.   See VTS software providers minimum PC .requirements
White noise generator Dohm DS A variety of white noise generators are available, depending on need.
Brooder clamp lights with red light bulbs     Several sizes and styles available. Number required depends on room size/lighting needs. Do not exceed 125 lumens in the testing room.
Lab bench or butcher paper     Paper should match or be very similar in color to the cage bedding.

References

  1. Goulding, E. H., Schenk, A. K., Juneja, P., MacKay, A. W., Wade, J. M., Tecott, L. H. A robust automated system elucidates mouse home cage behavioral structure. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 20575-20582 (2008).
  2. Kent, S., Bluthé, R. M., Kelley, K. W., Dantzer, R. Sickness behavior as a new target for drug development. Trends Pharmacol. Sci. 13, 24-28 (1992).
  3. Dantzer, R. Cytokine, sickness behavior, and depression. Immunol. Allergy Clin. North Am. 29, 247-264 (2009).
  4. Godbout, J. P., et al. Exaggerated neuroinflammation and sickness behavior in aged mice following activation of the peripheral innate immune system. FASEB J. 19, 1329-1331 (2005).
  5. York, J. M., et al. The biobehavioral and neuroimmune impact of low-dose ionizing radiation. Brain Behav. Immun. 26, 218-227 (2012).
  6. York, J. M., et al. Individually ventilated cages cause chronic low-grade hypoxia impacting mice hematologically and behaviorally. Brain Behav. Immun. 26, 951-958 (2012).
  7. Jennings, M., et al. Refining rodent husbandry: the mouse. Report of the Rodent Refinement Working Party. Lab. Anim. 32, 233-259 (1998).
  8. York, J. M., Blevins, N. A., Baynard, T., Freund, G. G. Mouse testing methods in psychoneuroimmunology. Methods in Molecular Biology. 934, 243-276 (2012).
  9. Dantzer, R., O’Connor, J. C., Freund, G. G., Johnson, R. W., Kelley, K. W. From inflammation to sickness and depression: when the immune system subjugates the brain. Nat. Rev. Neurosci. 9, 46-56 (2008).
  10. Crawley, J. N. Behavioral phenotyping of rodents. Comp. Med. 53, 140-146 (2003).
  11. Karelina, K., et al. Social isolation alters neuroinflammatory response to stroke. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 106, 5895-5900 (2009).

Play Video

Cite This Article
York, J. M., Blevins, N. A., McNeil, L. K., Freund, G. G. Mouse Short- and Long-term Locomotor Activity Analyzed by Video Tracking Software. J. Vis. Exp. (76), e50252, doi:10.3791/50252 (2013).

View Video