जौव में इस महीने: नवम्बर 2012

Summary

इस मुद्दे में, Oestreicher<em> एट अल.</em> हमें पता चलता है कि मीठे पानी के नमूनों से magnetotactic बैक्टीरिया को अलग करने के लिए, और एक केशिका गिलास के एक छोर पर बैक्टीरिया का ध्यान केंद्रित है. magnetotactic बैक्टीरिया तो प्रकाश और संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा visualized किया जा सकता है, और विभिन्न अन्य assays के लिए प्रयोग किया जाता है.

Abstract

In this issue, Oestreicher et al. show us how to isolate magnetotactic bacteria from freshwater samples, and concentrate the bacteria at one end of a glass capillary. The magnetotactic bacteria can then be visualized by light and transmission electron microscopy, and used for various other assays.

Also in the November 2012 issue, Boland et al. demonstrate how to reprogram fibroblasts into induced pluripotent stem cells (iPSCs), and how to isolate iPSC lines for injecting into tetraploid blastocysts, as demonstrated previously in JoVE. While mouth pipetting is generally not recommended because it can have adverse effects, this protocol requires the technique, executed carefully, to manipulate the embryos. This is one of the rare occasions when it’s actually OK to mouth pipet in the lab. If the induced cells are fully pluripotent, they can result in full-term mice derived completely from iPSCs.

In JoVE Neuroscience, Heermann and Krieglstein demonstrate a method for visualizing Schwann cell development along growing axons. To do this, our authors culture cervical ganglia explants onto collagen matrices, and treat the explants with nerve growth factor or other substances. The collagen gels can then be visualized using time-lapse imaging with fluorescence or bright-field microscopy, migrating along axons towards the periphery.

Also in JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. put tiny headphones on songbirds to study how they use auditory feedback to adjust their singing. The authors demonstrate how to construct the headphones and attach them to the bird’s head; then, by adjusting the acoustic signal, they can study the computational and neurophysiological basis of vocal learning in birds.

In JoVE Clinical & Translational Medicine, Iyengar et al. use a zebrafish tumor model to study genes that can modify the pathogenesis of melanoma. This is done by first creating transgenic zebrafish that express a gene of interest. Various assays can then be performed to study how different genes affect melanoma, including onset, invasion, and transplantability.

In JoVE Bioengineering, Martin et al. demonstrate a gliding assay to measure the flexural rigidity of biopolymers (such as microtubules). By attaching motor proteins to a microscope slide, and adding fluorescently labeled microtubules, our authors can analyze the dynamics of cytoskeletal polymers.

This preview summarizes just a few notable video-articles in the November 2012 issue of JoVE. Stop by throughout the month of November to check out the full length versions of these articles and many more.

Protocol

प्रेरित pluripotent स्टेम सेल से व्युत्पन्न चूहों की पीढ़ी माइकल जे 1 Boland, जेनिफर एल 1 Hazen, Kristopher Nazor एल 1, अल्बर्टो आर Rodriguez 2, ग्रेग 2 मार्टिन, सेर्गेई Kupriyanov 2, क्रिस्टिन लालकृष्ण बाल्डविन 1 1 Dorris तंत्रिका विज्ञान केंद्र और सेल बायोलॉजी विभाग, स्क्रिप्स रिसर्च इंस्टीट्यूट, 2 माउस आनुवंशिकी कोर सुविधा, स्क्रिप्स रिसर्च इंस्टीट्यूट जनरेटिंग प्रेरित pluripotent स्टेम सेल लाइनों (iPSC) विकास संभावित भिन्न लाइनों का उत्पादन भी जब वे pluripotency के लिए मानक परीक्षणों के पास. यहाँ हम एक iPSCs, जो पूर्ण pluripotency 1 रखने के रूप में iPSC लाइनों को परिभाषित करता है पूरी तरह से व्युत्पन्न चूहों के उत्पादन के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन करता है. Murine का विश्लेषणबढ़ती Axons साथ श्वान सेल विकास स्टेपहान Heermann 1, 2, Kerstin Krieglstein 1, 3 1 की आण्विक भ्रूणविज्ञान विभाग, एनाटॉमी के संस्थान और सेल बायोलॉजी, Freiburg विश्वविद्यालय, 2 neuroanatomy के विभाग, हीडलबर्ग विश्वविद्यालय के, 3 FRIAS, विश्वविद्यालय के Freiburg यहाँ हम एक श्वान (SC) सेल प्रवास परख में जो अनुसूचित जातियों के साथ का विस्तार axons विकसित करने में सक्षम हैं का वर्णन करता है. Songbirds में श्रवण प्रतिक्रिया से छेड़छाड़ करने के लिए एक हल्के, Headphones आधारित प्रणाली Lukas Hoffmann ए 1, 2, Conor डब्ल्यू केली 1, 3, डेविड ए निकोल्सन 1, 2, शमूएल जे शांत 1 जीवविज्ञान के 1 विभाग, Emory विश्वविद्यालय, 2 तंत्रिका विज्ञान ग्रेजुएट प्रोग्राम, Emory विश्वविद्यालय, 3 ठेलातंत्रिका विज्ञान और व्यवहार जीवविज्ञान, Emory विश्वविद्यालय में राम हम डिजाइन और छोटी एक चालाकी से ध्वनिक संकेत के साथ एक songbird प्राकृतिक श्रवण प्रतिक्रिया की जगह के लिए उपयुक्त headphones के विधानसभा का वर्णन. ऑनलाइन ध्वनि प्रसंस्करण हार्डवेयर गीत में हेरफेर करने के लिए उत्पादन, headphones के माध्यम से श्रवण प्रतिक्रिया में वास्तविक समय त्रुटियों परिचय, और मुखर मोटर सीखने ड्राइव करने के लिए प्रयोग किया जाता है. मेलेनोमा संशोधक एक Zebrafish autochthonous ट्यूमर मॉडल का उपयोग करने के लिए स्क्रीनिंग शरण्या 1 आयंगर, Yariv Houvras 2, 3, क्रेग जे Ceol 1 आण्विक और कैंसर जीवविज्ञान के मेडिसिन विभाग में 1 कार्यक्रम, मैसाचुसेट्स मेडिकल स्कूल के विश्वविद्यालय, सर्जरी और मेडिसिन के 2 विभागों, वेल कॉर्नेल मेडिकल कॉलेज, सर्जरी और चिकित्सा के 3 विभागों, न्यूयॉर्क प्रेस्बिटेरियन अस्पताल <p claएस एस = "jove_content"> मेलेनोमा एक zebrafish autochthonous ट्यूमर मॉडल का उपयोग संशोधक के लिए स्क्रीन करने के लिए एक तेजी से रास्ता प्रस्तुत किया है. यह miniCoopR वेक्टर जो उम्मीदवार melanocytes में मेलेनोमा जीन की अभिव्यक्ति के लिए अनुमति देता है का लाभ लेता है. मेलेनोमा से मुक्त अस्तित्व घटता, एक आक्रमण परख पैमाने melanocytes के एंटीबॉडी धुंधला के लिए एक प्रोटोकॉल और एक मेलेनोमा प्रत्यारोपण परख प्राप्त करने के लिए एक तरीका वर्णित हैं. ग्लाइडिंग assays का उपयोग Biopolymers की flexural कठोरता माप डगलस एस मार्टिन, लू यू, ब्रायन एल वान Hoozen भौतिकी विभाग, लॉरेंस विश्वविद्यालय दृढ़ता लंबाई या biopolymers की flexural कठोरता को मापने के लिए एक विधि का वर्णन है. विधि एक microtubule kinesin संचालित ग्लाइडिंग परख का उपयोग करता है करने के लिए प्रयोगात्मक व्यक्ति सूक्ष्मनलिकाएं के हठ लंबाई निर्धारित और actin आधारित ग्लाइडिंग assays के लिए अनुकूल है. / P> संग्रह है, और स्वाभाविक रूप से पर्यावरण से Magnetotactic बैक्टीरिया उत्पन्न का अलगाव संवर्धन Zachery Oestreicher 1, स्टीवन लालकृष्ण लोअर 1, 2, वी 3 लिन, ब्रायन एच. लोअर 2 पृथ्वी विज्ञान, ओहियो स्टेट यूनिवर्सिटी, पर्यावरण और प्राकृतिक संसाधन, ओहियो स्टेट यूनिवर्सिटी, 3 भूविज्ञान और भूभौतिकी संस्थान, विज्ञान की चीनी अकादमी के 2 स्कूल के 1 स्कूल हम एक के लिए है कि प्राकृतिक जल के लिए लागू किया जा सकता है magnetotactic बैक्टीरिया (एमटीबी) इकट्ठा विधि प्रदर्शित करता है. एमटीबी और अलग किया जा सकता है तलछट एक अपेक्षाकृत सरल सेटअप है कि बैक्टीरिया प्राकृतिक चुंबकत्व का लाभ लेता है का उपयोग कर नमूने से समृद्ध है. पृथक एमटीबी फिर दोनों प्रकाश और इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी का उपयोग विस्तार से जांच की जा सकता है. Toxoplasma gondii के खिलाफ पूर्व निर्धारित टी सेल रिसेप्टर specificities के साथ 8 "> Transnuclear चूहे SCNT के माध्यम से प्राप्त Oktay Kirak 1, ईवा – मारिया Frickel 1, का Gijsbert एम. Grotenbreg 1, 2, 1 Heikyung Suh, रुडोल्फ Jaenisch 1, 3, Hidde एल 1 Ploegh, 3 जैव चिकित्सा अनुसंधान के लिए 1, व्हाइटहेड संस्थान, सूक्ष्म जीव विज्ञान और जैव विज्ञान, सिंगापुर के राष्ट्रीय विश्वविद्यालय, जीवविज्ञान के 3 विभाग, मैसाचुसेट्स इंस्टीट्यूट ऑफ टेक्नोलॉजी के 2 विभागों हम यहाँ का प्रदर्शन है कि दैहिक सेल परमाणु हस्तांतरण (SCNT) के माध्यम से epigenetic reprogramming करने के लिए एक पूर्व निर्धारित टी सेल रिसेप्टर (TCR) specificities के माउस मॉडल उत्पन्न करने के लिए एक उपकरण के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है. इन transnuclear चूहों अंतर्जात प्रमोटर के नियंत्रण के तहत उनके अंतर्जात बिन्दुपथ से इसी TCR व्यक्त करते हैं.