मानव आंतों उपकला कोशिकाओं और BALB / ग माउस मैक्रोफेज का उपयोग करना है ठीक फैटी एसिड होता है और हैजा विष सांद्रता का निर्धारण
Summary
हम काफी और प्रतिकूल फैटी एसिड होता है और विष solubilizing और सेल अस्तित्व assays में उन का उपयोग करके सेल अस्तित्व को प्रभावित नहीं किया है कि तीन फैटी एसिड (, ओलिक linoleic और linolenic एसिड) और हैजा विष की सहनीय सांद्रता निर्धारित करने के लिए निकल पड़े.
Abstract
रोकथाम और गैर मानव और मानव रोगों के उन्मूलन में फैटी एसिड की सकारात्मक भूमिका रही है और बड़े पैमाने पर दस्तावेज जारी किया. इन भूमिकाओं में सूजन की रोकथाम के साथ ही संक्रामक रोगों के mucosal उन्मुक्ति सहित संक्रामक और गैर संक्रामक रोगों पर प्रभाव शामिल हैं. हैजा जीवाणु विब्रियो कोलरा की वजह से एक गंभीर आंतों की बीमारी है. यह विकासशील देशों में होता है और अगर अनुपचारित छोड़ दिया, मौत में परिणाम कर सकते हैं. हैजा के लिए टीके मौजूद हैं, वे हमेशा प्रभावी नहीं हैं और अन्य बचाव के तरीकों की जरूरत है. हम क्रमशः माउस / BALB सी मैक्रोफेज और मानव आंतों उपकला कोशिकाओं का उपयोग कर सहनीय तीन फैटी एसिड की सांद्रता (ओलिक, linoleic और linolenic एसिड) और हैजा विष निर्धारित करने के लिए निकल पड़े. हम एकाग्रता पर्वतमाला और नहीं कर रहे हैं कि फैटी एसिड की विशिष्ट सांद्रता निर्धारित करने के लिए ऊपर फैटी एसिड होता है और इस्तेमाल सेल प्रसार assays के solubilizedमानव आंतों उपकला सेल व्यवहार्यता के लिए हानिकारक टी. हम हैजा विष solubilized और एकाग्रता पर्वतमाला और सांख्यिकीय / BALB सी मैक्रोफेज में सेल व्यवहार्यता कमी नहीं है कि हैजा विष की विशिष्ट सांद्रता निर्धारित करने के लिए एक परख में इसका इस्तेमाल किया.
हम इष्टतम फैटी एसिड सांद्रता के बीच 1-5 μl / एनजी, और कहा कि इलाज के प्रति <30 एनजी होना हैजा विष के लिए. हो पाया इस डेटा रोकथाम या हैजा संक्रमण के उन्मूलन में फैटी एसिड के लिए एक सुरक्षात्मक श्लैष्मिक भूमिका को खोजने के लिए लक्ष्य है कि भविष्य के अध्ययन सहायता कर सकते हैं.
Introduction
ऐसे ओलिक, linoleic और linolenic एसिड के रूप में फैटी एसिड होता है, के स्वास्थ्य लाभ दिया गया है और प्रलेखित किया जाना जारी है. उदाहरण के लिए, ओलिक एसिड, शरीर 1,2 में lipophilic दवाओं की पहुंच की सुविधा में मदद करता है संतृप्त फैटी एसिड 3 के लिए प्रतिस्थापित जब 24% से कोरोनरी हृदय रोग को कम कर देता है, और एक्स से जुड़े एक है जो इस तरह के Adrenoleukodystrophy 4 के रूप में चयापचय रोगों का इलाज किया जाता है फैटी एसिड चयापचय की आनुवंशिक विकार. . स्तनधारियों में arachidonic एसिड, linoleic एसिड (ओलिक एसिड के विपरीत) के लिए एक आवश्यक अग्रदूत शरीर द्वारा संश्लेषित नहीं है और इस तरह सन बीज की खपत के रूप में बाहर स्रोतों के माध्यम से प्राप्त किया जाना चाहिए जबकि 5 स्टडीज जैसे लिनोलेनिक एसिड की कई लाभकारी प्रभाव स्वास्थ्य दिखाना: त्वचा के लिए विरोधी उम्र बढ़ने गुण, 6 विरोधी भड़काऊ गुणों, कोलोरेक्टल और प्रोस्टेट कार्सिनोमा कोशिकाओं के 7 कम प्रसार, 8 और मोटापे से लड़ने की क्षमता और संवर्धन ओच हृदय स्वास्थ्य. 9 linolenic एसिड periodontal सूजन, 10 और नियमन थ्राम्बाक्सेन और prostacyclin जैवसंश्लेषण को कम करने में एक भूमिका निभाता है. 11
अर्पिता 12 वी. पर पित्त फैटी एसिड के प्रभाव और कोलेस्ट्रॉल का अध्ययन विषैलापन कारकों और गतिशीलता का कोलरा की अभिव्यक्ति. Yamasaki 13 लाल मिर्च मिर्च, और अन्य प्राकृतिक रूप से निकाले यौगिकों से मेथनॉल निकालने संभावित हैजा विष उत्पादन कम हो सकता है कि संकेत दिया. यह mucosal उन्मुक्ति प्रदान करने के माध्यम से हैजा जैसे संक्रामक रोग की रोकथाम और उन्मूलन में ऊपर फैटी एसिड (जैसे सन बीज के रूप में) में अमीर हैं कि खाद्य उत्पादों के इस्तेमाल पर विचार करने के लिए बोधगम्य है. हम सेल प्रसार assays है, मानव आंतों उपकला कोशिकाओं CE के पर हानिकारक प्रभाव के बिना बर्दाश्त कर सकते हैं कि फैटी एसिड की अधिकतम एकाग्रता का उपयोग कर, फैटी एसिड solubilize करने और निर्धारित करने के लिए जांच का आयोजनटू व्यवहार्यता. हम ओलिक, linoleic और linolenic एसिड कम सांद्रता में सेल व्यवहार्यता पर एक लाभदायक प्रभाव प्रदान धारणा है कि है, लेकिन उच्च सांद्रता में वे कोशिकाओं को विषाक्त हो जाएगा. हम भी हैजा विष solubilized और / BALB सी माउस मैक्रोफेज सेल व्यवहार्यता में एक महत्वपूर्ण कमी के बिना बर्दाश्त कर सकते हैं कि हैजा विष का अधिकतम एकाग्रता निर्धारित की. हम भी बहुत कम स्तर पर सेल व्यवहार्यता पर हैजा विष की एक जहरीले प्रभाव परिकल्पना है. एक हैजा विष solubilizing और कोशिकाओं बचे रहने में एक महत्वपूर्ण कमी के बिना बर्दाश्त कर सकते हैं कि विष की अधिकतम राशि निर्धारित करने के लिए इसे का उपयोग करने की विधि भविष्य के अध्ययन के लिए एक लाभ प्रदान करता है. उदाहरण के लिए, ऊपर के तरीके का एक संयोजन फैटी एसिड हैजा संक्रमण के खिलाफ mucosal प्रतिरक्षा के साथ कोशिकाओं को प्रदान कि क्या यह निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हमारी जानकारी के अनुसार, यह तर्कसंगत और कार्यप्रणाली का पता लगाया नहीं गया है.
हम diहमारे प्रारंभिक आंकड़ों ओलिक, linoleic और linolenic एसिड हैजा संक्रमण के खिलाफ mucosal प्रतिरक्षा के साथ कोशिकाओं को प्रदान अगर यह निर्धारित करने के बाद जांच में इस्तेमाल किया जा सकता है कि कैसे scuss.
Protocol
Representative Results
Discussion
फैटी एसिड की एकाग्रता और हैजा विष का सुझाव
फैटी एसिड mucosal प्रतिरक्षा बढ़ाने कैसे की सटीक व्यवस्था अज्ञात है, कई अध्ययनों उनके लाभकारी प्रभाव की जांच करने का प्रयास किया. हमारे अध्ययन से कोशिका…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम पाउला Cobos और प्रयोगशाला सहायता के लिए डॉ. Evros Vassiliou धन्यवाद और क्रमशः, माउस मैक्रोफेज प्रदान करते हैं. हम भी मार्गदर्शन के लिए हमारी प्रयोगशाला प्रबंधक रिचर्ड Criasia धन्यवाद और सामग्री के साथ मदद. अंत में, लेखकों वीडियो उत्पादन के साथ मदद के लिए Ramanpreet कौर धन्यवाद.
Materials
| Cells/Reagent | |||
| Mus musculus macrophages | ATCC | ATCC RAW 264.7 | |
| Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium | ATCC | 30-2002 | |
| L-glutamine | ATCC | 30-2115 | |
| Fetal bovine serum | Bio-west | S0250 | |
| Antibiotic/antimycotic | Hyclone | SV3007901 | |
| Human intestinal epithelial cells | ATCC | ATTC CCL-241 | |
| HybriCare media | ATCC | 46-X | |
| Oleic Acid | Sigma-Aldrich | O1008 | |
| Linoleic Acid | Sigma-Aldrich | L-1376 | |
| Linolenic Acid | Sigma-Aldrich | L-2376 | |
| Cholera toxin | Sigma-Aldrich | C8052 | |
| Equipment | |||
| BD Falcon 96-Well Cell Culture Plates | BD Biosciences | 351172 | |
| Spectrophotometer with Dynex Revelations 4.22 software | Dynex | 91000101 |
References
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