सिनेजेनिक इम्यूनोसंट्यूड मेजबानों में मूल्यांकन किया गया, कैंसर स्टेम सेल (सीएससी) आधारित डेंड्रिटिक सेल (डीसी) वैक्सीन ने विषम थोक ट्यूमर कोशिकाओं के साथ स्पंदित पारंपरिक डीसी टीकों की तुलना में काफी अधिक एंटीट्यूमर प्रतिरक्षा का प्रदर्शन किया।
हमने कैंसर स्टेम सेल (सीएससी) की पहचान की- मुरीन मेलानोमा डी 5 सिनेजेनिक से C57BL/6 चूहों तक समृद्ध आबादी और एक मार्कर के रूप में ALDEFLUOR/ALDH का उपयोग करके C3H चूहों को स्क्वैमस कैंसर SCC7 सिनेनिक, और पल्स के लिए एंटीजन के स्रोत के रूप में सेल lysate का उपयोग कर उनकी इम्यूनोजेनिसिटी का परीक्षण किया (डीसी) । एएलडीएचउच्च सीएससी लाइसेट्स के साथ स्पंदित डीसी ने दोनों मॉडलों में और फेफड़ों के मेटास्टेसिस सेटिंग और एस.c में अनसोर्ट्ड पूरे ट्यूमर सेल लाइसेट्स के साथ स्पंदित डीसी की तुलना में काफी अधिक सुरक्षात्मक एंटीट्यूमर प्रतिरक्षा को प्रेरित किया। ट्यूमर विकास सेटिंग, क्रमशः। यह घटना सीएससी वैक्सीन-प्रेरित ह्यूमरल के साथ-साथ सेलुलर एंटी-सीएससी प्रतिक्रियाओं के कारण हुई थी। विशेष रूप से, सीएससी-डीसी वैक्सीन के अधीन मेजबान से अलग किए गए स्प्लेनोसाइट्स ने मेजबान से अलग किए गए स्प्लेनोसाइट्स की तुलना में IFNγ और जीएम-सीएसएफ की काफी अधिक मात्रा का उत्पादन किया। ये परिणाम एक सहायक सेटिंग में नैदानिक उपयोग के लिए एक ऑटोलॉगस सीएससी-आधारित चिकित्सीय टीका विकसित करने के प्रयासों का समर्थन करते हैं।
कैंसर स्टेम सेल पारंपरिक कीमोथेरेपी और रेडियोथेरेपी1,2के लिए अपेक्षाकृत प्रतिरोधी हैं। दूसरी ओर, कोशिकाओं की यह आबादी पारंपरिक कैंसर चिकित्सा1-4के बाद कैंसर के पतन और प्रगति के लिए जिम्मेदार कोशिकाओं हो सकता है । कैंसर स्टेम कोशिकाओं पर विभेदित ट्यूमर एंटीजन की अभिव्यक्ति की कमी के कारण, कैंसर स्टेम सेल कैंसर के लिए चिकित्सा के वर्तमान इम्यूनोलॉजिक हस्तक्षेप से बच सकते हैं, जो ज्यादातर विभेदित ट्यूमर कोशिकाओं पर एंटीजन को लक्षित करने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं । इसलिए, नई रणनीतियों के विकास विशेष रूप से लक्षित और कैंसर स्टेम कोशिकाओं को नष्ट करने के लिए वर्तमान कैंसर के इलाज की चिकित्सीय प्रभावकारिता बढ़ाने का वादा पकड़ सकता है । इस उद्देश्य के लिए, हमने कैंसर स्टेम सेल (सीएससी) को दो पशु ट्यूमर (मेलानोमा डी 5 और स्क्वैमस सेल कैंसर एससी 7) से समृद्ध आबादी को अलग किया, और सीएससी-टीपीडीसी वैक्सीन तैयार करने के लिए उन्हें पल्स एंटीजन पेश करने वाली कोशिकाओं (डेंड्रिटिक सेल, डीसी) के लिए एक एंटीजन स्रोत के रूप में इस्तेमाल किया। इसके बाद हमने सिनेजेनिक इम्यूनोसंपिटेंट मेजबानों, बी 6 चूहों और C3H चूहों में सीएससी-टीपीडीसी वैक्सीन द्वारा प्रेरित एंटीट्यूमर प्रतिरक्षा का मूल्यांकन किया। सीएससी-टीपीडीसी-प्रेरित एंटीट्यूमर प्रभावकारिता की तुलना पारंपरिक डीसी वैक्सीन के साथ की गई थी, जिसे अनसंबंधित विषम ट्यूमर कोशिकाओं (एच-टीपीडीसी) से लाइसेट के साथ स्पंदित किया गया था, जिसका उपयोग पहले हमारे समूह5,6द्वारा किया जाता था, साथ ही अन्य जांचकर्ताओं द्वारा7 दोनों प्रीक्लिनिकल अध्ययनों में और नैदानिक परीक्षणों में।
इम्यूनोसमझौता मेजबान, जैसे SCID चूहों, मेजबानों के भीतर अनुकूली प्रतिरक्षा की कमी के कारण सीएससी के प्रतिरक्षा आकलन को बाधित करते हैं । इस अध्ययन में, हमने इम्यूनोसंटिव मेजबानों में सीएससी की इम्यूनोजेनिसिटी का मूल्यांकन किया, जो रोगी सेटिंग्स की अधिक बारीकी से नकल कर सकता है। समृद्ध सीएससी इम्यूनोजेनिक होते हैं और अधिक प्रभावी ट्यूमर सुरक्षात्मक प्रतिरक्षा को प्रेरित कर सकते हैं जब उनके लाइसेट्स को अचयनित ट्यूमर सेल लाइसेट-स्पंदित डीसी की तुलना में टीके के रूप में डीसी को लोड किया जाता है। मशीनी रूप से, सुरक्षा सीएससी-प्रतिक्रियाशील एंटीबॉडी और टी कोशिकाओं8 के चयनात्मक प्रेरण के साथ-साथ टाइप 1 साइटोकिन के उत्पादन, जैसे IFNγ और जीएम-सीएसएफ द्वारा प्रदान की गई थी।
डेंड्रिटिक सेल आधारित टीकों और दत्तक टी सेल हस्तांतरण सहित अधिकांश वर्तमान इम्यूनोथेरपी, ट्यूमर-विभेदित एंटीजन को लक्षित करने के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। सीएससी, जो इन विभेदित एंटीजन को व्यक्त नहीं कर सकते हैं, इसलिए इन इम्यूनोलॉजिकल लक्ष्यीकरण से बच सकते हैं । इसके विपरीत, सीएससी टीका विशेष रूप से कैंसर स्टेम कोशिकाओं को लक्षित करने के लिए डिज़ाइन कैंसर कोशिकाओं की इस विशेष आबादी को नष्ट कर सकते हैं, और इस तरह ट्यूमर पतन और मेटास्टेसिस को रोकने के द्वारा वैक्सीन की चिकित्सीय प्रभावकारिता में सुधार ।
दोनों सुसंस्कृत ट्यूमर कोशिकाओं और हौसले से काटा ट्यूमर में, हम उच्च एल्डिहाइड dehydrogenase गतिविधि के आधार पर प्रवाह साइटोमेट्री द्वारा सीएससी समृद्ध आबादी की पहचान की । इस तरह के ALDHउच्च कोशिकाओं को प्रवाह छंटाई द्वारा अलग किया जा सकता है सीएससी-TPDCs उत्पन्न करने के लिए पल्स डीसी के लिए एक एंटीजन स्रोत के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है । ताजा काटा ट्यूमर से बनाम सुसंस्कृत ट्यूमर कोशिकाओं से अलग ALDHउच्च कोशिकाओं का उपयोग कर तुलना विरोधी सीएससी प्रतिरक्षा8के प्रेरण की अवधि में कोई महत्वपूर्ण अंतर का प्रदर्शन किया । इन परिणामों को या तो सुसंस्कृत ट्यूमर कोशिकाओं से या नैदानिक आवेदन के लिए हौसले से काटा ट्यूमर से अलग CSCs का उपयोग करने की क्षमता का पता चला ।
चिकित्सकीय रूप से प्रासंगिक होने के लिए, एक टीके की चिकित्सीय सेटिंग में जांच करने की आवश्यकता होती है। ये प्रयोग अब हमारी प्रयोगशाला में किए जा रहे हैं।
The authors have nothing to disclose.
इस काम को मिशिगन विश्वविद्यालय के व्यापक कैंसर केंद्र के विल और जीन काल्डवेल संपन्न अनुसंधान कोष द्वारा समर्थित किया गया था और एनआईएच ग्रांट CA82529 और गिलसन लॉन्गेनबॉग फाउंडेशन द्वारा भाग में।
ALDHEFLOUR KIT | Stemcell Technologies | 1700 |
Murine IL-4 | Pepro Tech | 214-14 |
Murine GM-CSF | Pepro Tech | 315-03 |
Mouse IFN-ɣ ELISA KIT | BD Biosciences | 555138 |
Mouse GM-CSF ELISA KIT | BD Biosciences | 555167 |
OptiPrep Density Gradient Medium | Sigma Aldrich | D1556 |
BD OptEIA TMB Substrated Reagent Set | BD Biosciences | 555214 |
Equipment | ||
BD FACS Aria Cell Sorter | BD Biosciences | 336834 |
Kcjunior | Bio-Tek Instruments | 176058 |