वयस्क Zebrafish Gavaging
Summary
एक पशु मॉडल के रूप में zebrafish के बढ़ते उपयोग यौगिकों और समाधान के ज्ञात मात्रा के वितरण के लिए प्रभावी तरीकों के विकास की आवश्यकता है. नीचे वर्णित नलिका – पोषण प्रक्रिया वयस्क zebrafish को सुरक्षित रूप से और कुशलता से, मज़बूती से समाधान की सटीक मात्रा के मौखिक प्रसव के लिए अनुमति देता है.
Abstract
zebrafish जैव चिकित्सा अनुसंधान में vivo मॉडल में एक महत्वपूर्ण बन गया है. प्रभावी तरीके विकसित और वैज्ञानिक अनुसंधान के लिए समाधान में यौगिकों या एजेंट देने के लिए उपयोग किया जाना चाहिए. वयस्क zebrafish के लिए मौखिक रूप से यौगिकों के प्रशासन के लिए मौजूदा तरीकों मछली द्वारा स्वैच्छिक खपत में परिवर्तनशीलता के कारण गलत कर रहे हैं. एक नलिका – पोषण प्रक्रिया जैव चिकित्सा अनुसंधान के क्षेत्र में अध्ययन के लिए zebrafish को संक्रामक एजेंटों की सटीक मात्रा में वितरित करने के लिए विकसित किया गया था. उम्र के 6 महीनों में वयस्क zebrafish के 150 मिलीग्राम / एल के साथ anesthetized थे एमएस-222 बफर और एक कट 22 जी सुई की नोक से जुड़ी लचीला कैथेटर आरोपण ट्यूबिंग का उपयोग कर समाधान के 5 μl के साथ gavaged. ट्यूबिंग की नोक गहरे नाले (लगभग 1 सेमी) पिछले बढ़ाया तक लचीला टयूबिंग zebrafish के मौखिक गुहा में उतारा गया. समाधान तो धीरे से आंत्र पथ में इंजेक्ट किया गया था. इस विधि मछली uneventfully उबरने के साथ, समय के 88% प्रभावी था. यहएक व्यक्ति एक घंटे में 20-30 मछली नलिका – पोषण कर सकते हैं प्रक्रिया के रूप में भी कुशल है. इस विधि के ठीक वयस्क zebrafish में संक्रामक रोगों के अध्ययन, या अन्य यौगिकों की पढ़ाई के लिए एजेंट के प्रशासन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
Introduction
Zebrafish के लिए मौखिक रूप से यौगिकों के प्रशासन के लिए मौजूदा तरीकों प्रशासन यौगिकों फ़ीड पर शीर्ष में लिपटे, जिलेटिन आहार 1 में मिलाया, नमकीन चिंराट 2 में bioencapsulated, लिपिड समझाया आहार 3, मोम स्प्रे मोती 4 के साथ और लस आधारित आहार के माध्यम से मिलाया शामिल हैं. के 5 सीमाएं मौखिक प्रशासन के इन तरीकों उच्च लीचिंग दरों और व्यक्ति मछली से अधूरा या अप्रत्याशित परिसर खपत में शामिल हैं. संक्रामक रोग के अध्ययन में, मछली को दिलाई संक्रामक खुराक अध्ययन की सफलता के लिए महत्वपूर्ण हो सकता है जानने क्योंकि ये चर समस्याग्रस्त हैं. इसके अलावा, पिछले काम पानी स्नान में प्रशासित कुछ यौगिकों अध्ययन के तहत हो सकता है कि पेट के प्रभाव होते हैं पहले गहरे नाले zebrafish को विषाक्त घाव कारण है कि दिखाया गया है. 6
नलिका – पोषण एके साथ एक उत्पाद की सटीक मात्रा में प्रशासन के लिए अन्य प्रयोगशाला जानवरों की प्रजातियों में इस्तेमाल एक मानक तरीका हैजैव चिकित्सा और दवा अनुसंधान के क्षेत्र में अध्ययन के लिए nown एकाग्रता. हाल ही में साहित्य में वर्णित किया गया zebrafish gavaging के लिए तरीके हैं. वर्णित एक तकनीक समाधान के 5 μl वितरित करने के लिए एक 2-20 μl विंदुक से जुड़ी एक 24 जी कैथेटर म्यान का उपयोग कर एक दो व्यक्ति विधि है. वर्णित 7 विधि पहले और दूसरे पर एक मृत्यु दर 8.7% की दर और 39% था क्रमशः परीक्षण, मृत्यु का सबसे गर्भवती महिलाओं के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था. दूसरी नलिका – पोषण तकनीक 5 medakas के समाधान के μl (Oryzias latipes). मृत्यु दर पर 8 दी गई जानकारी नहीं किया गया था और नलिका – पोषण वर्णित नहीं किया गया था प्रदर्शन की सही प्रक्रिया के प्रशासन के लिए इस्तेमाल किया कुंद इत्तला दे दी नलिका – पोषण सीरिंज का वर्णन किया. ऊपर मछली के शरीर के वजन के 1% से पशु की देखभाल और प्रयोगशाला Zebrafish, पर कनाडा परिषद के अनुसार नलिका – पोषण के माध्यम से प्रशासित किया जा सकता है. 9,10 हमारा लक्ष्य कॉम की सटीक मात्रा में पहुंचाने का एक repeatable, सुरक्षित और कारगर तरीका विकसित किया गया थापाउंड मौखिक रूप से दोनों लिंगों के वयस्क zebrafish करने और प्रजनन के सभी चरणों में. यह प्रक्रिया एक परिसर की सही मौखिक खुराक की आवश्यकता है, जिसमें किसी भी अध्ययन के लिए लागू होगा.
Protocol
Representative Results
Discussion
महत्व
इस तकनीक में एक सुधार है और वयस्क zebrafish gavaging के लिए दो पहले से वर्णित तकनीकों पर कई लाभ प्रदान करता है. सबसे पहले, मछली को नियंत्रित करने के लिए एक स्पंज का उपयोग दो लोगों की आवश्यकता होती है ए…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
रॉकफेलर विश्वविद्यालय के तुलनात्मक बायोसाइंस केंद्र इस परियोजना के लिए सहायता प्रदान की. हम तकनीकी सहायता के लिए Janelle Monnas धन्यवाद.
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
References
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