Yetişkin Zebra balığı Gavaging
Summary
Bir hayvan modeli olarak zebrabalıkları artan kullanımı bileşikler ve çözeltiler bilinen miktarlarda teslimat için etkili yöntemlerin geliştirilmesini gerektirmektedir. Aşağıda açıklanan sonda prosedür yetişkin zebrafish için güvenli ve verimli bir şekilde, güvenilir bir çözüm hassas hacimleri sözlü teslimat için izin verir.
Abstract
Zebra balığı biyomedikal araştırma in vivo modelde önemli bir hale gelmiştir. Etkili yöntemler geliştirilmiş ve bilimsel araştırma için çözümler bileşikler veya acenteleri sunmak için kullanılmalıdır. Yetişkin zebrafish için sözlü bileşikler yönetmek için mevcut yöntemler balık gönüllü tüketimi değişkenlik nedeniyle yanlış. Bir sonda prosedürü biyomedikal araştırmalarda çalışma için Zebra balığı için enfeksiyöz ajanların hassas miktarlarda sunmak için geliştirilmiştir. Yaş 6 ay içinde Yetişkin Zebra balığı 150 mg / L ile anestezi edildi MS-222 tamponlu ve bir kesim 22-G iğne ucu bağlı esnek kateter implantasyonu boru kullanarak çözüm 5 ul zorla ağız yolundan verilmiştir. Borunun ucu solungaçları (yaklaşık 1 cm) uzamasına kadar esnek boru zebrabalıkları ağız boşluğu içine düşürülmüştür. Bu çözelti daha sonra yavaş yavaş bağırsak içine enjekte edildi. Bu yöntem, balık sorunsuz kurtarma ile, zamanın% 88 etkili olmuştur. Bubir kişi bir saat içinde 20-30 balık sonda gibi prosedürü de etkilidir. Bu yöntem, tam olarak yetişkin zebrabalıkları bulaşıcı hastalıklar çalışmalar ya da diğer bileşikler çalışmaları için ajanlar yönetmek için kullanılabilir.
Introduction
Zebra balığı için sözlü bileşikler yönetmek için mevcut yöntemler yönetmek bileşikler besleme üzerine üst kaplı, jelatin diyetler 1 karışık, tuzlu su karidesi 2 içine bioencapsulated, lipid kapsüllü diyetler 3, mum sprey boncuk 4 ve gluten tabanlı diyetler ile karışık içerir. 5 Sınırlamalar oral bu yöntemler yüksek yıkama oranları ve bireysel balık tarafından eksik veya öngörülemeyen bileşik tüketimi içerir. Bulaşıcı hastalık çalışmalarında, balık uygulanan enfektif doz çalışmasında başarı için kritik olabilir bilerek çünkü bu değişkenler sorunludur. Ayrıca, önceki çalışma su banyoları uygulanan bazı bileşikler çalışılan olabilir bağırsak etkileri ortaya çıkmadan önce solungaçları Zebra balığı için toksik lezyon neden olduğunu göstermiştir. 6
Sonda ak ile bir ürünün kesin miktarda yönetmek için diğer laboratuvar hayvan türlerinde kullanılan standart bir yöntemdirbiyomedikal ve ilaç araştırma çalışma için nown konsantrasyon. Ancak son zamanlarda literatürde tarif edilmiştir zebrabalıkları gavaging için yöntemler vardır. Açıklanan bir teknik çözüm 5 ul teslim etmek için bir 2-20 ul pipet bağlanmış bir 24 G kateter kılıf kullanılarak, iki kişilik bir yöntemdir. Tarif 7 yöntem, birinci ve ikinci bir mortalite oranı% 8.7 ve% 39 oldu sırasıyla deneme; mortalitenin en gebe kadın bağlandı. İkinci sonda tekniği 5 medakas çözüm ul (Oryzias latipes). Mortalite 8 bilgiler bulunmuyordu ve sonda tarif değildi yerine tam süreci yönetmek için kullanılan künt uçlu sonda şırınga nitelendirdi. Kadar balığın vücut ağırlığının% 1 Hayvan Bakım ve Laboratuar Zebra balığı, günü Kanada Konseyi'ne göre sonda ile verilebilir. 9,10 Amacımız com hassas cilt teslim bir tekrarlanabilir, güvenli ve etkili bir yöntem geliştirmektikilo sözlü her iki cinsten yetişkin zebrafish ve üreme her aşamasında. Bu prosedür, bir bileşiğin doğru oral dozlama gerekli olduğu herhangi bir çalışma için geçerli olacaktır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Önem
Bu teknik bir gelişmedir ve yetişkin zebrafish gavaging için iki daha önce açıklanan teknikleri üzerinde çeşitli avantajlar sağlamaktadır. İlk olarak, balık tutmaya bir sünger kullanımı iki kişi gerektiren bir önce açıklanan teknik aksine bir kişi, yordamı gerçekleştirmek için izin verir. 7 İkincisi, kateter implantasyon tüp nedeniyle ikincil travma en aza indirmek yardımcı olabilir, IV kateterler daha esnektir benzer künt uçlu şırınga kullanar…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Rockefeller Üniversitesi Karşılaştırmalı Biyobilim Merkezi bu projeye destek sağladı. Teknik yardım için Janelle Monnas teşekkür ederim.
Materials
| Equipment | |||
| A sponge | |||
| 1-cc luer lock syringe | Becton Dickinson & Co | ||
| 22-G Micro-Renathane Implantation tubing (cut) | Braintree Scientific, Inc. | ||
| 1 22-G needle (cut, if needed) | Becton Dickinson & Co | ||
| pH meter | Hanna probe | ||
| 1 scalpel blade | |||
| [header] | |||
| Reagent/Material | |||
| MS-222 (Finquel) | Argent Laboratories |
References
- Royes, J. -. A. B., Chapman, F. . Preparing Your Own Fish Feeds. , (2009).
- Gomez-Gil, B., Cabanillas-Ramos, J., Paez-Brambila, A., Roque, A. Standardization of the bioencapsulation of enrofloxacin and oxytetracycline in Artemia fransciscana Kellogg. Aquaculture. 196, 1-12 (1906).
- Langdon, C. Microparticle types for delivering nutrients to marine fish larvae. Aquaculture. 227, 259-275 (2003).
- Langdon, C., Nordgreen, A., Hawkyard, M., Hamre, K. Evaluation of wax spray beads for delivery of low-molecular weight, water soluble nutrients and antibiotics to Artemia. Aquaculture. 284, 151-158 (2008).
- Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. A Novel Protocol for the Oral Administration of Test Chemicals to Adult Zebrafish. Zebrafish. 8, 203-210 (2011).
- Goldsmith, J. R., Jobin, C. Think Small: Zebrafish as a Model System of Human pathology. Journal of Biomedicine and Biotechnology. , (2012).
- Tysnes, K. R., Jorgensen, A., Poppe, T., Midtlyng, P. J., Robertson, L. J. Preliminary expermients on use of zebrafish as a laboratory model for Giardia duodenalis infection. Acta Parasitologica. 57, 1-6 (2012).
- Marie, B., Huet, H., et al. Effects of a toxic cyanobacterial bloom (Planktothris agardhii) on fish: Insights from histopathological and quantitative proteomic assessments following the oral exposure of medaka fish (Oryzias latipes). Aquatic Toxicology. 114-115, 39-48 (2012).
- Canadian Council on Animal Care. . CCAC guidelines on: the care and use of fish in research, teaching and testing. , (2005).
- Harper, C., Lawrence, C. . The Laboratory Zebrafish. , (2011).
- De Tolla, L. J., Srinivas, S., et al. Guidelines for the Care and Use of Fish in Research. ILAR Journal. 37 (4), (1995).
- Topic Popovic, N., Strunjak-Perovic, I., et al. Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish anaesthesia. Journal of Applied Ichthyology. 28, 553-564 (2012).
- Field, H. A., Kelley, K. A., Martell, L., Goldstein, A. M., Serluca, F. C. Analysis of gastrointestinal physiology using a novel intestinal transit assay in zebrafish. Neurogastroenterology & Motility. 21, 304-312 (2009).
