نموذج الفئران من جديد اللف الأورطي إصلاح تمدد الأوعية الدموية
Summary
التعديلات النسيجية والكيميائية الحيوية بعد تمدد الأوعية الدموية الاستبعاد endograft لا تزال غير واضحة. وصفنا نموذجا جديدا من زرع endograft على تمدد الأوعية الدموية الفئران. من خلال تحليل خثرة مع وبدون المثابرة تيار الدورة الدموية واجهة، وتقييم المواد الحيوية الجديدة اللف، وهذا النموذج يساعد على فهم أفضل اللف تمدد الأوعية الدموية البيولوجيا المرضية الاستبعاد.
Abstract
استبعاد تمدد الأوعية الدموية اللف هو أسلوب التحقق من صحة لمنع تمزق تمدد الأوعية الدموية. النتائج على المدى الطويل تسليط الضوء على القيود التقنية وجوانب جديدة من الأبهر البطني (AAA) الفيزيولوجيا المرضية. لا يوجد الأبهر البطني endograft نموذج الاستبعاد رخيصة وقابلة للتكرار، والتي من شأنها أن تسمح تحقيقات عميقة من AAA قبل وبعد العلاج. وصفنا هنا كيف للحث على، ثم لاستبعاد مع stentgraft التاجي غطت الأبهر البطني في الفئران. وذكرت ومعروفة إيلاستاز يسببها AAA نموذج لأول مرة في 1990 1 في الفئران، ثم وصفها في الفئران 2. الإيلاستين تدهور يؤدي إلى تمدد الشريان الأورطي مع تسلل التهاب في جدار البطن وخثرة داخل اللمعية، مطابقة مع AAA الإنسان. ثم يتم تنفيذ الإقصاء اللف مع stentgraft صغيرة مغطاة، مع استبعاد أي تفاعلات بين تعميم الدم والجلطة تمدد الأوعية الدموية. استبعاد المناسبة والمباح هو stentgraftأكد قبل القتل الرحيم بواسطة تصوير الأوعية الدموية يعتقد الشريان السباتي الأيسر. سيطرة جزئية من الإيلاستاز نشرها يجعل شكل تمدد الأوعية الدموية المختلفة لكل حيوان. فمن الصعب خلق تمدد الأوعية الدموية، والتي سوف تسمح للطول المناسب من الشريان الأورطي دون تمدد الأوعية الدموية للحصول على مقدمة stentgraft سهلة، ومع الرقبة القريبة والبعيدة كافية لمنع endoleaks. يمكن أن الكثير من الفشل يؤدي إلى مقدمة stentgraft التي تؤدي أحيانا إلى الشريان الأبهر المسيل للدموع مع الألم والمتاعب لغرزة ذلك، والضرر البطانية مع آخر OP تخثر الشريان الأورطي. إعطاء الأسبرين للفئران قبل زرع stentgraft يقلل نسبة الفشل دون نزف الكبرى. لقط الوقت ينشط العدلات، البطانة والصفائح الدموية، وربما يتعارض مع التحليل البيولوجي.
Introduction
قد حققت تقدما المهارات اللف منذ أول اللف الأبهر إصلاح تمدد الأوعية الدموية (EVAR) بواسطة بارودي في 1991 3، ما يقرب من نصف جميع تمدد الأوعية الدموية في البطن يتم التعامل الآن من قبل EVAR 4. على عكس الجراحة، EVAR يترك خثرة، استبعاده من مجرى الدم النظامية. وتتميز تمدد الأوعية الدموية عن طريق الهيموغلوبين الغنية خثرة متعدد الطبقات، وسائل الإعلام رقيقة، والبرانية fibrosed وملتهبة. وقد تجلى الدور الحاسم من التحلل البروتيني 5 في تطور أم الدم قبل ثلاثين سنة 6، 7: ويرتبط تمدد الأوعية الدموية كيس خثرة مع جدار الأبهر رقيقة، تحلل من الإيلاستين، ومنخفض الكثافة من خلايا العضلات الملساء في وسائل الإعلام، وعلى مستوى عال من المناعة رد فعل للالتهابات براني 8،9. هذه التغيرات تشير إلى أن النشاط الأنزيمي بروتين يحدث داخل خثرة، وليس مباشرة في جدار الشريان الأبهر.
وبالإضافة إلى ذلك، وطبقة اللمعية من خثرة غنية في التصق الدم الحمراء CELLS الإفراج عن الهيموغلوبين. وهم يشاركون في المقام الأول في تشكيل الليفين، وتفعيل الصفائح الدموية ويحفز تشكيل ثرومبين. وأخيرا، كما يدفع خثرة T-PA ومنشط الاحتفاظ، التي تشارك في انحلال الفيبرين وتجنيد الكريات البيض، وذلك أساسا العدلات. هذه هي 12 مرات أكثر أهمية في خثرة منه في مجرى الدم 10. ويرتبط وجودهم مع نسبة عالية من نوع مصفوفة الفلزي 8 (MMP-8)، MMP-9 والإيلاستاز: أنها تطلق البروتياز سيرين الحبيبية وكلاء الأكسدة الموالية مما أدى إلى تدهور المصفوفة ييفي، وتمزق جدار الشريان الأبهر في نهاية المطاف 9،11 -13.
ويهدف التدخل تمدد الأوعية الدموية انتخابي لمنع تمزق. EVAR يترك كل من جدار الأوعية الدموية والجلطة سليمة. وهكذا، يدعى نضح تمدد الأوعية الدموية عن طريق الضمانات الأبهر (الشرايين القطنية، الشريان المساريقي السفلي …)، endoleak، واختلاط محددة من العلاج اللف 14،15، مما يؤدي في بعض الأحيان إلى تمزق حواءN مع endoleaks الضغط المنخفض. وعلاوة على ذلك، في بعض المرضى، وليس هناك زيادة في قطر أم الدم 16. التفاعل بين تعميم الدم وجدار أم الدم يحافظ على النشاط البيولوجي داخل اللمعية خثرة المذكورة. وبالتالي، نوع endoleaks V، الذي يعرف بأنه التوسع في كيس تمدد الأوعية الدموية دون endoleak التي تم تحديدها، ويمكن تفسير من حيث نوع النشاط الأنزيمي داخل خثرة تمدد الأوعية الدموية.
لا التصوير الإشعاعي (PET-18FDG المسح الضوئي، الصفائح الدموية مضان تنشيط والحديد أوكسيد النقيض MRI17) ولا اخذ عينات من الدم المحيطي (MMP-9، الصفائح الدموية المجهرية الدقيقة المستمدة، بلازمين / مجمع المضادة للبلازمين) المستخدمة لاستكشاف أثر اللف على تمدد الأوعية الدموية الأبهري في البشر مباشرة تقييم المسارات البيوكيميائية.
في علمنا، لا يوجد أي تمدد الأوعية الدموية النماذج الحيوانية الاستبعاد التجريبية استنساخه ورخيصة. هذا واحد يسمح تمدد الأوعية الدموية استبعاد التعديلات البيولوجية والنسيجية ما قبل وما بعد من يكتشفها.
Protocol
Representative Results
Discussion
وقد وصفت نموذجين من AAA بالفعل في مختبرنا: طعم أجنبي 19 و الإيلاستاز نماذج يسببها 1 نموذج الإيلاستاز هو الأكثر مماثلة لتمدد الشريان الأورطى الإنسان:. ثم تم استبعاد خثرة كبيرة داخل اللمعة كفافي بواسطة إصلاح أم الدم داخل الأوعية الدموية.
<p class="jove_content" style=";text-…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
فإن الكتاب أود أن أشكر كريستين Guesdon (أبوت) لهدايا من Stentgrafts.
Materials
| Animals | |||
| Wistar rats | aged from 8 to 9 weeks. Weight range from 350 to 400 g | ||
| Instruments | |||
| Isoflurane anesthesic system | 4,5% at the beginning, then 2% | ||
| Penthobarbital | Ceva sante animale, Libourne, France | ||
| Dissection stereomicroscope | |||
| Steriles gloves | |||
| Microsurgical Steriles instruments | Moria, Antony, France | Needle holder, Forceps, Scissors,Gilbert approximator o 3 Micro clamps | |
| N°40 Silk string | |||
| Prolen 9-0 and 10-0 | Ethicon, Johnson & Johnson, Auneau, France | ||
| Heat-tapered polyethylene tubing | PE 10 | ||
| Syringe infusion pump | |||
| Porcine pancreatic elastase | Sigma, St. Louis, Mo., USA | 550 μl of salin is mixed with 175 μl of elastase | |
| Indeflator | |||
| 9 to 16 mm length, 3 mm diameter coronary PTFE covered stentgraft | Abbott, Abbott Park, Illinois, USA | ||
| C-Arm OEC 9800 | GE Medical Systems, Milwaukee, WI | ||
| Aspegic 1000 mg | Aspirin, Sanofi-Aventis, Paris, France | ||
| Reagent | |||
| Aerane isoflurane 100ML | Baxter | Aerane | |
| Penthobarbital | Centravet | 053pen203 | |
| Silk Suture 4-0 | Fine Science | 18020-40 | |
| Microsurgical steriles instruments | Moria | 9980-9983-9987-204/A-204/D-8148-4877A-4878A | |
| Prolen 9-0 and 10-0 | Ethicon | W2829 – NS2850 | |
| Heat tapered Polyethylene tubing : PE 10 | Bioseb | MRE-010 | |
| Infusion pump | World precision instrument | AL-1000 | |
| Porcine pancreatic elastase | Sigma | E1250-100MG | |
| Indeflator | Longreal | KY025 25 100 | |
| Aspegic 1000mg (Aspirin) | Sanofi-Aventis | 3400931898191 | |
| C-Arm OEC 9800 | General electric. | OEC 9800 | |
| Stentgraft : Jostent | Abbott | 210CG1230 210CG1630 |
References
- Anidjar, S., et al. Elastase-induced experimental aneurysms in rats. Circulation. 82, 973-981 (1990).
- Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase. J. Vis. Exp. (29), e1280 (2009).
- Parodi, J. C., Palmaz, J. C., Barone, H. D. Transfemoral intraluminal graft implantation for abdominal aortic aneurysms. Ann. Vasc. Surg. 5, 491-499 (1991).
- Lees, T., Stansby, G. . The nationalvascular database report, 2009. , (2012).
- Sakalihasan, N., Limet, R., Defawe, O. D. Abdominal aortic aneurysm. Lancet. 365, 1577-1589 (2005).
- Busuttil, R. W., Abou-Zamzam, A. M., Machleder, H. I. Collagenase activity of the human aorta. A comparison of patients with and without abdominal aortic aneurysms. Arch. Surg. 115, 1373-1378 (1980).
- Michel, J. B. Contrasting outcomes of atheroma evolution: intimal accumulation versus medial destruction. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 21, 1389-1392 (2001).
- Vorp, D. A., et al. Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening. J. Vasc. Surg. 34, 291-299 (2001).
- Kazi, M., et al. Influence of intraluminal thrombus on structural and cellular composition of abdominal aortic aneurysm wall. J. Vasc. Surg. 38, 1283-1292 (2003).
- Kuijper, P. H., et al. Neutrophil adhesion to fibrinogen and fibrin under flow conditions is diminished by activation and L-selectin shedding. Blood. 89, 2131-2138 (1997).
- Touat, Z., et al. Renewal of mural thrombus releases plasma markers and is involved in aortic abdominal aneurysm evolution. Am. J. Pathol. 168, 1022-1030 (2006).
- Fontaine, V., et al. Role of leukocyte elastase in preventing cellular re-colonization of the mural thrombus. Am. J. Pathol. 164, 2077-2087 (2004).
- Sakalihasan, N., Delvenne, P., Nusgens, B. V., Limet, R., Lapiere, C. M. Activated forms of MMP2 and MMP9 in abdominal aortic aneurysms. J. Vasc. Surg. 24, 127-133 (1996).
- Alsac, J. M., et al. The significance of endoleaks in thoracic endovascular aneurysm repair. Ann. Vasc. Surg. 25, 345-351 (2011).
- Buth, J., Harris, P. L., van Marrewijk, C., Fransen, G. The significance and management of different types of endoleaks. Semin. Vasc. Surg. 16, 95-102 (2003).
- Fransen, G. A., et al. Rupture of infra-renal aortic aneurysm after endovascular repair: a series from EUROSTAR registry. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 26, 487-493 (2003).
- van der Vaart, M. G., et al. Application of PET/SPECT imaging in vascular disease. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 35, 507-513 (2008).
- Close, B., et al. Recommendations for euthanasia of experimental animals: Part 2. DGXT of the European Commission. Lab. Anim. 31, 1-32 (1997).
- Allaire, E., Guettier, C., Bruneval, P., Plissonnier, D., Michel, J. B. Cell-free arterial grafts: morphologic characteristics of aortic isografts, allografts, and xenografts in rats. J. Vasc. Surg. 19, 446-456 (1994).
- Gawenda, M., Jaschke, G., Winter, S., Wassmer, G., Brunkwall, J. Endotension as a result of pressure transmission through the graft following endovascular aneurysm repair–an in vitro study. Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 26, 501-505 (2003).
- Delbosc, S., et al. Porphyromonas gingivalis Participates in Pathogenesis of Human Abdominal Aortic Aneurysm by Neutrophil Activation. Proof of Concept in Rats. PLoS One. 6, e18679 (2011).
- Trollope, A., Moxon, J. V., Moran, C. S., Golledge, J. Animal models of abdominal aortic aneurysm and their role in furthering management of human disease. Cardiovasc Pathol. 20, 114-123 (2011).
- Yamaguchi, T., et al. Factors influencing mortality in the rat elastase-induced-aneurysm model. J. Surg. Res. 94, 81-83 (2000).
- von Bruhl, M. L., et al. Monocytes, neutrophils, and platelets cooperate to initiate and propagate venous thrombosis in mice in vivo. J. Exp. Med. 209, 819-835 (2012).
- Smith, P. D. Neutrophil activation and mediators of inflammation in chronic venous insufficiency. J. Vasc. Res. 36, 24-36 (1999).
- Zaragoza, C., et al. Animal models of cardiovascular diseases. J. Biomed. Biotechnol. 2011, 497841 (2011).
- Kuivaniemi, H., Elmore, J. R. Opportunities in abdominal aortic aneurysm research: epidemiology, genetics, and pathophysiology. Ann. Vasc. Surg. 26 (12), 862-870 (2012).
- Schanzer, A., et al. Predictors of abdominal aortic aneurysm sac enlargement after endovascular repair. Circulation. 123, 2848-2855 (2011).
