Bir Geçerliliği Endoskopik Puanlama Sisteminin Kullanılması Kolit ve Kolorektal Tümörlerin Şiddetini Değerlendirmek için Farelerde esnek Kolonoskopi
Summary
Son birkaç yılda, yeni nesil endoskoplar kemirgen kolit ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesinde önemli bir tanı araştırma yardımcıları olarak ortaya çıkmıştır. Bu farelerde enflamasyonun ve kolorektal tümörleri endoskopik değerlendirme, hem de kolit ve kolorektal tümörleri endoskopik şiddetini belge ondalık tanımlayıcıları kullanan yeni bir skorlama sistemi için bu tarifnamede detaylı bir protokol mevcut.
Abstract
Araştırma amaçlı, modern endoskopi kullanımı büyük ölçüde gastrointestinal patolojilerin anlayışımızı kolaylaştırmıştır. Özel olarak, deneysel endoskopi, kronik enflamatuar bağırsak hastalığının mekanizmaları ve kolorektal kanserin ilerlemesini değerlendirmek gibi tek bir laboratuar hayvanına tekrar değerlendirme gerektiren çalışmaları için oldukça faydalı olmuştur. Ancak, çalışmalar arasında kullanılan yöntemler oldukça değişkendir. En az üç endoskopik skorlama sistemleri kemirgen kolit yayınlanan ve kolorektal tümörlerin değerlendirilmesi için protokoller eşzamanlı kolon iltihabı varlığını ele başarısız yayınlanmıştır. Bu çalışma, geliştirir ve aynı zamanda inflamasyon ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir tekrarlanabilir bir endoskopik skorlama sistemi doğrular. Perianal bulgularına dayanarak kolorektal inflamasyon ölçüde ve şiddeti 1) değerlendirme (wal şeffaflık: Bu yeni puanlama sistemi üç ana bileşeni vardırl, mukozal kanama, ve fokal lezyonlar), 2) tümör lezyonları (grid harita ve bar grafiği), ve gözlenen lezyonların atanmış kategorilerin ondalık birimlere dayanarak patolojik ve araştırma alaka klinik vakaların 3) sayısal sıralama kantitatif kayıt ve Endoskopik komplikasyonlar (ondalık tanımlayıcılar). Burada sunulan görüntü ve el yazması araştırmacılar yakın endoskopik kolit (D-PECS gelen distalinde ayırt etmek için sistem seçeneği ile, iyi doğrulanmış ve yüksek tekrarlanabilir endoskopik yöntem kullanılarak kendi deneysel fareler puan için izin, IACUC onaylı protokolleri takip hazırlandı .)
Introduction
Mürin endoskopi bir yılda 1-3 için yararlı bir araştırma aracı olarak yapılmıştır. Bazıları da fleksibl sigmoidoskopi kullanılan olmasına rağmen bugüne kadar, kemirgen endoskopi kullanılarak çalışmaların çoğu, rijit endoskoplar kullandık. Mürin endoskopi hemen sonuç sağlar ve bağırsak normallik, inflamasyon şiddeti ve vücut kilo kaybı, ishal, ve histoloji gibi dolaylı önlemler, (lezyonlar yamalı zaman suboptimaldir) kıyasla progresyonla ölçüde daha objektif tahmin ederken kolon genel sağlık anlayışlar sunan. Ötenazi ve iki nokta üst üste analiz 1 için hasat edilecek olan hayvan gerektiren geleneksel histolojik inceleme aksine En önemlisi, endoskopi, zaman içinde laboratuvar hayvan modellerinin tekrar değerlendirilmesi için izin verir. Bu avantajlara rağmen, murin endoskopik teknolojisinin kullanımı yaygın olmamıştır ve implementati için standart protokoller eksikliği ile sınırlıdırve patolojik bulgular puanlama. Düzgün uygulanan, kemirgen endoskopi daha anlayışımızı ve inflamatuvar barsak hastalıkları, kolit, ve kolorektal tümörler dahil olmak üzere birçok kronik gastrointestinal hastalık durumlarında, hayvan modellerinin karakterizasyonu kolaylaştırmak için büyük umut vaat ediyor.
Kemirgen endoskopik teknoloji programı standart bir muayene prosedürlerinin varlığını ve bağırsak patolojileri için tutarlı olmayan gereksiz ve güvenilir puanlama sistemi gerektirir üretilebilmesi ve nesnellik, üzerine menteşeleri. En az üç açıklayıcı puanlama kolit 4-6 endoskopik değerlendirme sistemleri, hem de kolon tümörleri farelerde 4,7,8 için yayınlanmıştır. Ancak, bu rapor yaklaşımlar ve puanlama sistemleri çalışmalar arasında kolayca karşılaştırılabilir değildir. Birçok durumda, lezyonların sınıflandırılması için kullanılan kriterlerin net bir tanımı yoktur, ve kriterler verildiğinde, onlar büyük ölçüde değişmektedir. Ayrıca,kolit ve tümörler, tek bir ölçme aracı haline anda ortaya çıkar ve sonuç üzerinde interaktif etkileri olabilir en yaygın kolon patolojilerin iki, hem de değerlendirmesini entegre bildirilen hiçbir skorlama sistemleri vardır. Son olarak, kolit için var olmayan endoskopik skorlama sistemleri genellikle sınırlı ayrımcılık ile inflamatuvar kategoriler var (yani. Genellikle 1-4 kısa tamsayı ölçekleri üzerinde dar puanlama seçenekleri) düzgün hastalığın ilerlemesi senaryolar temsil ve parametrik istatistiksel analiz kullanımını etkinleştirmek için.
Bu yazıda, murin kolit ve kolonik tümörlerin şiddetini değerlendirmek ve perianal bölge, rektum ve distal kolon anatomik değerlendirilmesinde bu teknolojiyi kullanarak için standart bir protokolü tarif etmek için esnek bir endoskop kullanılmasını tarif eder. Biz Travma ve görüntü bozulmalarını en aza indirmek için endoskopi sırasında etkili giderme göstermek, ve biz bir tekrarlanabilir skorlama sistemi tanımlamakvalide yayınlanan klinik parametrelere dayalı. Skorlama sistemi (özel tanı değeri ile bulgularını vurgulamak için 12 iltihap, tümör haritalama olası notları ve komplo seçenekleri ve yeni bir ondalık birim sistemi (yani, ondalık tanımlayıcılar) ile ayrımcılık yüksek düzeyde kullanarak bağırsak iltihabı ve tümörlerin hem de değerlendirme bütünleştirir yani tümör geliştirme, endoskopi, vb sırasında komplikasyonlar). Ondalık tanımlayıcıların kullanılması daha fazla alt analizi hakkında veri setlerinin hızlı izleme sağlar. Son olarak, kolit ve kolit ile ilişkili kanser (dekstran sülfat sodyum (DSS) kaynaklı-kolit, Clostridium difficile enfeksiyonu ve azoksimetan / DSS-kaynaklı kolon kanseri) birden kemirgen modellerinde güvenilirlik ve puanlama sisteminin geçerliliği test gerçekleştirin.
Protocol
Representative Results
Discussion
Farelerde endoskopik tekniğinin modifikasyonu ve sorun giderme ile ilgili çeşitli hususlar vardır. Esnek endoskopi kullanımı sırasında hakim olması gereken prosedürün kritik yönleri açılanma ve tork kontrollerinin koordinasyonu ile karın şişliği ve fare solunum uzlaşma önlemek için gerekli hava hacmi ayarı ve görünümü kontrol minör teknik yönlerini kapsamaktadır . Tork kontrol intestinal perforasyon riskini en aza indirmek için önemlidir. Düzgün bir şekilde ele alınıp, kemirgen esnek …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Sarah Kossak'ın, Mitchell Guanzon, Sung Yeun Yang ve deney hayvanlarının endoskopik değerlendirilmesi sırasında işbirliği Li Guo Jia, Özel teşekkürler.
Materials
| Isoflurane, USP | Webster Veterinary | ||
| Surgical lubricant | Savage laboratories | surgilube, 0281-0205-45 | |
| Phosphate Buffered Saline | Thermo Scientific | SH30256 | |
| RNAlater | Ambion | AM7021 | |
| Methylene Blue 1% Aqueous Solution | Fisher Science Education | S96393 | |
| Flexible digital ureteroscope | Olympus America | URF-V | |
| Video system center | Olympus America | VISERA Pro OTV-S7 Pro | |
| Xenon light source | Olympus America | VISERA Pro CLV-S40 Pro | |
| Video recorder | MediCapture, Inc. | MediCap USB200 | |
| Flexible biopsy cup forceps | Olympus America | FBC-3115 | |
| Anesthesia machine | Euthanex Corporation | EZ-7000 Classic System |
References
- Huang, E. H., et al. Colonoscopy in mice. Surg. Endosc. 16, 22-24 (2002).
- Wirtz, S., Becker, C., Blumberg, R., Galle, P. R., Neurath, M. F. Treatment of T cell-dependent experimental colitis in SCID mice by local administration of an adenovirus expressing IL-18 antisense mRNA. J. Immunol. 168, 411-420 (2002).
- Funovics, M. A., Alencar, H., Su, H. S., Khazaie, K., Weissleder, R., Mahmood, U. Miniaturized multichannel near infrared endoscope for mouse imaging. Mol Imaging. 2, 350-357 (2003).
- Becker, C., et al. In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy. Gut. 54, 950-954 (2005).
- Ravnic, D. J., Konerding, M. A., Huss, H. T., Wolloscheck, T., Pratt, J. P., Mentzer, S. J. Murine microvideo endoscopy of the colonic microcirculation. J. Surg. Res. 142, 97-103 (2007).
- Hamilton, M. J., et al. Essential role for mast cell tryptase in acute experimental colitis. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 290-295 (2011).
- Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. High resolution colonoscopy in live mice. Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).
- Hensley, H. H., Merkel, C. E., Chang, W. C., Devarajan, K., Cooper, H. S., Clapper, M. L. Endoscopic imaging and size estimation of colorectal adenomas in the multiple intestinal neoplasia mouse. Gastrointest. Endosc. 69, 742-749 (2009).
- Banerjee, S., et al. Infection control during GI endoscopy. Gastrointest. Endosc. 67, 781-790 (2008).
- . Cleaning and disinfection of equipment for gastrointestinal endoscopy. Report of a Working. Party of the British Society of Gastroenterology Endoscopy Committee. Gut. 42, 585-593 (1998).
- Sano, Y., et al. New diagnostic method based on color imaging using narrow band imaging (NBI) system for gastrointestinal tract. Gastrointest. Endosc. 53, 125-12 (2001).
- Davies, J., Burke, D., Olliver, J. R., Hardie, L. J., Wild, C. P., Routledge, M. N. Methylene blue but not indigo carmine causes DNA damage to colonocytes in vitro and in vivo at concentrations used in clinical chromoendoscopy. Gut. 56, 155-156 (2007).
- Chiang, N., Schwab, J. M., Fredman, G., Kasuga, K., Gelman, S., Serhan, C. N. Anesthetics impact the resolution of inflammation. PLoS One. 3, e1879 (2008).
- Zilberman, D. E., et al. The digital flexible ureteroscope: in vitro assessment of optical characteristics. J. Endourol. 25, 519-522 (2011).
- Machida, H., Sano, Y., Hamamoto, Y., Muto, M., Kozu, T., Tajiri, H., et al. Narrow-band imaging in the diagnosis of colorectal mucosal lesions: a pilot study. Endoscopy. 36, 1094-1098 (2004).
- Dohoo, I., Martin, W., Stryhn, H., McPike, S. M. Cohort studies. Veterinary Epidemiologic Research. , 151-162 (2003).
- Yiou, R., et al. The pathophysiology of pelvic floor disorders: evidence from a histomorphologic study of the perineum and a mouse model of rectal prolapse. J. Anat. 199, 599-607 (2001).
