Reproducable Paraplegia por Thoracic Aorta Oclusão em um modelo murino de Medula Espinhal A isquemia-reperfusão

Summary

A falta de entendimento mecanicista da medula espinhal lesão de isquemia-reperfusão tem dificultado mais adjuntos para evitar paraplegia após operação da aorta alto risco. Assim, o desenvolvimento de modelos animais é imperativo. Este manuscrito demonstra reprodutível menor paralisia extremidade após oclusão da aorta torácica em um modelo murino.

Abstract

Fundo
Baixa paralisia extremidade continua a complicar intervenções aorta. A falta de compreensão da patologia subjacente tem dificultado avanços para diminuir a ocorrência desta lesão. O modelo atual demonstra reprodutível menor paralisia extremidade após oclusão da aorta torácica.

Métodos
Camundongos C57BL6 machos adultos foram anestesiados com isoflurano. Através de uma incisão cervicosternal a aorta foi exposta. A aorta e subclávia esquerda descendente artérias torácicas foram identificados sem entrada para o espaço pleural. Esqueletização destas artérias foi seguido pelo fechamento imediato (Sham) ou oclusão de 4 min (isquemia moderada) ou 8 min (isquemia prolongada). A esternotomia e pele foram fechados eo rato foi transferido para a cama aquecimento para a recuperação. Após a recuperação, análise funcional foi obtida em 12 intervalos hr até 48 horas.

<p class= ""> Resultados jove_content
Os ratos que foram submetidos à cirurgia sham não mostraram déficit membro posterior observável. Ratos submetidos à isquemia moderada por 4 min teve déficit funcional mínimo em 12 horas seguido de progressão para completar a paralisia em 48 horas. Ratos submetidos à isquemia prolongada teve uma paralisia imediata com qualquer movimento posterior de membros observável em qualquer ponto no pós-operatório. Não houve mortalidade intra-operatória observada ou pós-operatório.

Conclusão
Reprodutível menor paralisia extremidade imediato ou retardado pode ser alcançado em um modelo murino. Além disso, usando uma esternotomia mediana e cuidadosa dissecação, as taxas de sobrevivência elevadas, e reprodutibilidade pode ser conseguida.

Introduction

Menor paralisia extremidade continua a complicar as intervenções toracoabdominal. A lesão, conhecido como medula espinhal lesão de isquemia-reperfusão (SCIR), resulta em paralisia em até 20% dos pacientes de alto risco ^1. Adjuntos cirúrgicos, tais como desvio esquerda coração, drenos fluidos cerbrospinal lombares, parada circulatória hipotérmica e reimplante da artéria intercostal ter reduzido a incidência desta complicação ^2, no entanto, demasiado muitos pacientes continuam a ser afetados.

Clinicamente, a isquemia medular e reperfusão é visto como imediatos ou retardados paralisia após a intervenção ^3. No entanto, a nossa compreensão desta lesão foi sufocada pela falta de detalhes mecanicista. Como resultado, algumas opções estão disponíveis para atenuar a lesão, uma vez que tenha ocorrido.

Temos, assim, se alistou um animal pequeno, murino, o modelo de isquemia medular, e reperfusão demelhor caracterizar sua patogênese. A maioria dos estudos até agora usaram modelos animais maiores para caracterizar esta lesão, ou seja, ⁴ rato, coelho ^5, e porco ⁶ modelos. No entanto, estes são limitados pelo seu custo, complexidade, reprodutibilidade variável, e, mais importante, a falta de técnicas disponíveis para a manipulação genética. O mais confiável desses modelos animais publicados envolve pinçamento infra-renal da aorta abdominal em coelhos. No entanto, anterior humana neurônios espinhais na maioria das vezes derivam seu suprimento vascular dos ramos mais proximais ^7. Anatomia vascular variável da medula espinal em modelos estes adiciona à dificuldade em fazer a transição seus resultados em utilização clínica.

Este manuscrito apresenta um modelo de paraplegia imediato ou tardio, após oclusão da aorta torácica que é clinicamente relevante e fácil de empregar. A exposição do arco aórtico via mini-esternotomiao meu é menos invasiva e pode provocar resultados altamente reprodutíveis com morbidade e mortalidade mínima. Embora este modelo em não sem desafios e nuances técnicas, estas podem ser superadas com dissecção cuidadosa e manipulação de tecidos para produzir um modelo de paralisia dos membros traseiros que podem ser facilmente implementados.

Protocol

1. Pré-operatório Preparação e Anestesia Não deixe de observar técnica estéril durante todo o procedimento. Deite fora todos os instrumentos. Ligue o leito de controlo da temperatura antes da indução da anestesia de modo que ele pode aquecer até à temperatura apropriada (36,5 ° C). Ligue o monitor de laser Doppler perfusão de modo que ele pode iniciar durante a indução. Posicione o mouse na câmara de indução. Monitorar cuidadosamente a frequência respiratória d…

Representative Results

Ratos foram submetidos a cirurgia sham (n = 3) ou oclusão aórtica por 4 (n = 3) a 8 min (n = 3). Camundongos pós-operatório foram classificados pelo Índice de Basso Mouse (Figura 1). Os ratos que foram submetidos à cirurgia sham não tinha déficits funcionais observáveis ​​em qualquer ponto no pós-operatório. Ratos submetidos à isquemia moderada (4 min) tiveram perto de função normal traseira de membros em 12 horas com o declínio funcional progressivo para completar paralisia por 48 ho…

Discussion

Paraplegia secundária a isquemia reperfusão medular, é o resultado de um complexo de patologias mal compreendidos ^9. Embora este é mais comumente visto após a cirurgia da aorta toracoabdominal, uma variedade de outros insultos, como dissecções aórticas, trauma, fenômenos embólicos, vasculite e hipotensão sistêmica ¹⁰ pode resultar em paraplegia. Para obter uma maior compreensão desta lesão e fornecer metas futuras para eliminar esse prejuízo, os modelos animais se tornaram uma necess…

Materials

VMS Anesthesia Machine	MDS Matrx
Isoflurane	Vet One	13985-528-60	2.0% through nose cone
Induction Chamber	Vet Equip	941444
Heating Bed	Vestavia Scientific
Laser Doppler Monitor	Moor Instruments	VMS-LDF1
5-0 Suture, Polyester	Surgidac	VD-551	Taper Needel
Microdissecting Clips	Biomedical Research Insturments	14-1030, 14-1060
Surgical Instruments	Fine Surgical Instruments		Forceps, needle holder