Stigende Aortakonstriktion i rotter i Oprettelse af trykoverbelastning hjertehypertrofi Model

Summary

Vi beskriver en trinvis procedure til at skabe pres overbelastning og venstre ventrikel hypertrofi i Wistarrotter ved konstriktion af opstigende aorta ved hjælp af en lille metallisk klip. Denne model er flittigt brugt til at studere remodeling ændringer i løbet af hjertehypertrofi og for at identificere og evaluere strategier for regression af sådanne ændringer.

Abstract

Stigende pulsåresammensnøring er den mest almindelige og vellykket kirurgisk model for at skabe trykoverbelastning induceret hjertehypertrofi og hjertesvigt. Her beskriver vi en detaljeret kirurgisk procedure for at skabe pres overbelastning og hjertehypertrofi i rotter ved konstriktion af opstigende aorta ved hjælp af en lille metallisk klip. Efter anæstesi trachea intuberet ved indsættelse af en kanyle gennem en halvvejs indsnit mellem to bruskringene af luftrøret. Så en hud incision på niveau med den anden interkostale plads på venstre bryst væg og muskellag er godkendt til at lokalisere opstigende del af aorta. Opstigende aorta indsnævres til 50-60% af sin oprindelige diameter ved anvendelse af en lille størrelse titanium klip. Efter pulsåresammensnøring, andet og tredje ribben tilnærmes med PROLENE suturer. Den trakealkanyle fjernes en gang spontan vejrtrækning blev genoprettet. Dyret får lov til at komme on varmepuden ved gradvist at sænke anæstesi. Intensiteten af ​​pres overbelastning skabt ved konstriktion af opstigende aorta bestemmes ved at registrere trykgradient hjælp transtorakal todimensionalt Doppler-ekkokardiografi. Samlet denne protokol er nyttigt at studere remodeling begivenheder og kontraktile egenskaber af hjertet under den gradvise opståen og udvikling fra kompenseret hjertehypertrofi til hjertesvigt scenen.

Introduction

Små dyremodeller er de mest foretrukne værktøjer til undersøgelse af kroniske forandringer i udviklingen af ​​hjertehypertrofi, og dens progression til hjertesvigt. Hjertesvigt modeller af kirurgiske metoder blev oprindeligt udviklet i rotter, da disse dyr er mest velegnede til åben bryst kirurgiske procedurer, ekkokardiografi og evaluering af hæmodynamiske parametre. De giver også tilstrækkelige efter slagtning prøver til væv, cellulære og undersøgelser molekylære niveau ^1. Konstriktion af den opstigende aorta er en af de mest almindelige og vellykkede kirurgiske modeller til at skabe trykoverbelastning hjertesvigt ^{2, 3.} Denne model er velegnet til at studere cellulære og sub cellulære remodeling begivenheder og kontraktile egenskaber af hjertet under overgangen fra hypertrofi af hjertesvigt ^4.

En stor fordel ved denne model er den gradvise indtræden af trykoverbelastning på hjertet ^{5 <}/ Sup> ^6. Denne model er klinisk relevant på grund af sin langsom, men støt progression fra kompenseret hjertehypertrofi til dekompenseret fase og endelig til hjertesvigt scenen. Varigheden for progression af hjertehypertrofi til hjertesvigt og de ​​dermed forbundne fysiologiske ændringer er primært påvirket af graden af stenose producerede ^7. Stigende pulsåresammensnøring kan udføres på to måder, enten ved hjælp af suturer eller ved anvendelse af metalliske clips ^{8, 9.} Den største fordel ved at anvende en metallisk clips pulsåresammensnøring er, at de kirurgiske procedurer er mindre kompliceret. I denne metode man har til at finde den supra valvular opstigende aorta og indsætte klippet omkring aorta for at opnå den ønskede grad af konstriktion. En kiste retraktor er ikke nødvendigt i denne procedure. Aorta banding ved suturering kræver flere kirurgiske manipulationer til at placere målernålen siden af ​​opstigende aorta og suturering omkring det atproducere det ønskede niveau af pulsåresammensnøring. Sidstnævnte teknik er mere tidskrævende sammenlignet med brugen af ​​metalklemmer til pulsåresammensnøring. Beskrevet i denne video metode viser den kirurgiske procedure for opstigende aorta indsnævring i rotter, der tillader etablering af tryk overbelastet venstre ventrikel hypertrofi model.

Protocol

Dyreforsøg blev udført efter at have indhentet godkendelse fra Institutional Animal Ethics Committee. Wistarrotter blev huset under en 12 hr mørk til lys cyklus konstant stuetemperatur (24 ± 2 ° C) med mad og vand ad libitum (som pr retningslinjer CPCSEA). 1) Pre-operative pleje og anæstesi Hold rotte (ca. 200 g legemsvægt) under antibiotisk paraply 24 timer før operationen ved indgivelse amoxicillin oralt (dosis: 500 mg / L vand). Sterilisere alle kirurgiske ins…

Representative Results

I vores eksperimenter er vi i stand til at opnå mere end 80% overlevelse. Effektiviteten af ​​pulsåresammensnøring blev bekræftet ved at udføre Doppler ekkokardiografi. Rotter (n = 6) med en trykgradient på omkring 60 mm Hg i aorta indsnævrede stedet blev observeret i 8 uger og aflivet for at analysere for udviklingen af hjertehypertrofi (fig. 1). Efter 8 uger efter operationen ekkokardiografisk evaluering viste en signifikant stigning i venstre ventrikel parametre såsom inter ventrikulær s…

Discussion

Der er flere kirurgiske modeller for induktion af trykoverbelastning samt hjertehypertrofi og hjertesvigt. I små dyr, Lorell og kolleger udviklet den model, vi har beskrevet her, og de ​​rapporterede forekomst af kompenseret hjertehypertrofi otte uger efter aorta banding ^5.. Hjerte ændringer gradvist videre til en dekompenseret tilstand og derefter resultere i hjertesvigt. Den største fordel ved denne model er den gradvise indtræden af ​​stigningen i tryk i venstre ventrikel og dermed svarer til k…

Materials

Wistar rats			Maintained at ARF, RGCB
Inhalation anaesthesia systems	VetEquip	AB19276
Rodent ventilator	CWE Inc	SAR- 830/AP
Rat tracheal cannula	CWE Inc	13-21032
Ultrasound system	Philips	HD7
Ultrasound transducer	Philips	S 12
Titanium clip (small)	Horizon	1204
Clip applicator	Weck	137081
Electric shaver	Vinverth	VBT0817
BP blade (size:11)	Surgeon	REF10111	Preparation of surgical site
Tramadol	Orchid health care	OCH043
Amoxycillin Hydrochloride	Ranbaxy
Isoflurane	Piramal health care	A23M10A
Syringes	BD	2015-09
4-0 braided silk	Diamond
3-0 prolene	Johnson&Johnson	NW018
Surgical tape	Romsons	SH 6301
Povidone iodine	Win Medicare
Temp. controlled heating pad	Flamingo	HC1003