में कार्यात्मक प्रदर्शन का आकलन<em> MDX</em> माउस मॉडल
Summary
neuromuscular विकारों के लिए नैदानिक परीक्षणों में प्राथमिक परिणाम उपाय आम तौर पर पेशी समारोह में सुधार है. इसलिए, माउस मॉडल में चिकित्सकीय पूर्व पेशी प्रदर्शन पर संभावित चिकित्सीय यौगिकों के प्रभाव का आकलन करने के लिए काफी महत्व की है. हम यहां यह पता करने के लिए कई कार्यात्मक परीक्षण का वर्णन है.
Abstract
Duchenne पेशी dystrophy (डीएमडी) कोई इलाज उपलब्ध है, जिसके लिए विकार बर्बाद एक गंभीर और प्रगतिशील मांसपेशी है. फिर भी, कई संभावित दवा यौगिकों और जीन थेरेपी दृष्टिकोण नैदानिक परीक्षणों में आगे बढ़े हैं. इन परीक्षणों में सबसे महत्वपूर्ण अंत बिंदु जा रहा मांसपेशी समारोह में सुधार के साथ, बहुत जोर मांसपेशी समारोह, शक्ति, स्थिति, और में समन्वय का आकलन चिकित्सकीय पूर्व के लिए कार्यात्मक परीक्षण करने के लिए, विश्वसनीय प्रतिलिपि प्रस्तुत करने, और आसान स्थापना पर रखा गया है DMD के लिए MDX माउस मॉडल. दोनों आक्रामक और noninvasive परीक्षण उपलब्ध हैं. बीमारी बढ़ा नहीं है कि टेस्ट रोग के प्राकृतिक इतिहास और उपचारात्मक उपायों (जैसे. Forelimb पकड़ शक्ति परीक्षण, एक तार या एक ग्रिड और rotarod चल उपयोग कर या तो दो अलग फांसी परीक्षण) के प्रभाव को निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. वैकल्पिक रूप से, मजबूर ट्रेडमिल चल रोग प्रगति को बढ़ाने और / या आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता हैरोग विकृति पर उपचारात्मक उपायों के सुरक्षात्मक प्रभाव. हम यहाँ एक विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीके से इन सबसे अधिक इस्तेमाल किया कार्यात्मक परीक्षण करने के लिए क्या करते हैं. मानक संचालन प्रक्रियाओं के आधार पर इन प्रोटोकॉल का प्रयोग विभिन्न प्रयोगशालाओं के बीच डेटा की तुलना में सक्षम बनाता है.
Introduction
Duchenne पेशी dystrophy (डीएमडी) 1:5,000 नवजात लड़कों को प्रभावित करने वाले सबसे आम neuromuscular विकार है. यह गंभीर और प्रगतिशील मांसपेशी बर्बाद बीमारी खुला पढ़ने फ्रेम को बाधित और कार्यात्मक dystrophin प्रोटीन के संश्लेषण को रोकने कि DMD जीन में उत्परिवर्तन के कारण होता है. Dystrophin कमी स्नायु तंतुओं प्रेरित नुकसान व्यायाम की चपेट में हैं. पेशी के पुनर्योजी क्षमता की थकावट पर, और कारण क्षतिग्रस्त मांसपेशियों के जीर्ण सूजन, फाइबर बाद में समारोह का एक नुकसान के लिए अग्रणी, संयोजी ऊतक और वसा से बदल रहे हैं. आम तौर पर, DMD रोगियों दूसरे दशक में जल्दी निचले अंगों की ambulation खो देते हैं. बाद में, भी हाथ और कंधे करधनी की मांसपेशियों को प्रभावित कर रहे हैं और रोगियों को अक्सर कारण रीढ़ की हड्डी में समर्थन की मांसपेशियों की असममित कमजोर करने के लिए thoracolumbar स्कोलियोसिस विकसित करना. सहायता वेंटिलेशन आम तौर पर देर से किशोरावस्था या जल्दी बिसवां दशा में आवश्यक है. श्वसन और हृदय की विफलता का नेतृत्वतीसरे या चौथे दशक 1 में मौत के लिए.
प्रेरणा का जीन पर 25 साल पहले 2 की खोज की गई है, DMD के लिए उपलब्ध कोई इलाज नहीं है. हालांकि, स्वास्थ्य देखभाल सुधार और corticosteroids का उपयोग पश्चिमी दुनिया 3 में जीवन प्रत्याशा में वृद्धि हुई है. MDX माउस की तरह पशु मॉडल का उपयोग के साथ, प्रमुख कदम संभावित चिकित्सीय रणनीतियों की खोज में आगे किया गया है. MDX माउस सबसे अधिक इस्तेमाल किया DMD माउस मॉडल है. यह murine DMD जीन की एक्सॉन 23 में एक बिंदु उत्परिवर्तन है और फलस्वरूप dystrophin 4 का अभाव है. वर्ष के पिछले कुछ अधिक है, कई प्रस्तावित रणनीतियों नैदानिक परीक्षणों 5-9 में आगे बढ़े हैं. इन परीक्षणों में मांसपेशियों समारोह के सुधार के परीक्षण की पूर्व नैदानिक चरण के दौरान चूहों में पेशी समारोह पर यौगिकों के लाभ के परीक्षण के महत्व अंतर्निहित, प्राथमिक समापन बिंदु है.
DMD की तरहरोगियों, भी MDX चूहों की dystrophin नकारात्मक मांसपेशी फाइबर प्रेरित नुकसान व्यायाम की चपेट में हैं और उनकी मांसपेशी समारोह C57BL/10ScSnJ जंगली प्रकार चूहों की तुलना में बिगड़ा हुआ है. इस हानि कार्यात्मक परीक्षणों के एक किस्म के साथ मूल्यांकन किया जा सकता है. इन परीक्षणों में से कुछ noninvasive हैं और मांसपेशियों की विकृति (जैसे forelimb पकड़ शक्ति, फांसी परीक्षण और rotarod चल रहा है) के साथ हस्तक्षेप नहीं करते. इसलिए वे इस रोग के प्राकृतिक इतिहास पर नजर रखने या रोग प्रगति पर यौगिकों के प्रभाव को निर्धारित करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. किसी MDX चूहों में पेशी समारोह पर यौगिकों के प्रभाव की गहराई तस्वीर में, इन परीक्षणों के सभी से मिलकर रोग प्रगति के साथ हस्तक्षेप नहीं करता है कि एक कार्यात्मक परीक्षण शासन 10 इस्तेमाल किया जा सकता प्राप्त करने के लिए.
वैकल्पिक रूप से, मजबूर ट्रेडमिल चल जानबूझकर रोग प्रगति को बढ़ा और यौगिक 11 की रक्षात्मक क्षमता का परीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. ट्रेडमिल भी हो सकता हैवे उपचार समूहों 13 के बीच प्रदर्शन में बड़ा मतभेद सुनिश्चित करने के लिए बाद में एक कार्यात्मक परीक्षण में कम अच्छा प्रदर्शन इतना है कि थकावट तक का समय चल रहा है 12 मापा, या थकान MDX चूहों को एक उपकरण के रूप में जो परिणाम उपाय के रूप में इस्तेमाल किया. कार्यात्मक परीक्षण का चयन करते समय MDX माउस 14 की तरह dystrophic चूहों का परीक्षण, खासकर जब रोग प्रगति पर उनके प्रभाव को ध्यान में रखा जाना चाहिए.
हम यहां इलाज एनएमडी नेटवर्क से उपलब्ध मानक संचालन प्रक्रिया पर आधारित एक विश्वसनीय और प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीके में सबसे अधिक इस्तेमाल किया कार्यात्मक परीक्षण करने के लिए कैसे विस्तार से वर्णन है. इलाज एनएमडी यात्रा करने के लिए यहां क्लिक करें .
Protocol
Representative Results
Discussion
यहाँ प्रस्तुत कार्यात्मक परीक्षण, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने के लिए प्रदर्शन करने के लिए आसान और जंगली प्रकार और उनकी उम्र के स्वतंत्र dystrophic चूहों को लागू कर रहे हैं. परीक्षण पूर्व नैदानिक मांसपेशी समा…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
हम उसे फोटोग्राफिक सहायता के लिए Margriet Hulsker धन्यवाद और उनके बहुत रचनात्मक टिप्पणियों के लिए चूहों की छवियों और समीक्षकों प्राप्त करने में मदद करना चाहते हैं. इस काम ZonMw, इलाज एनएमडी (अनुबंध संख्या LSHM सीटी-2006-036825) और Duchenne जनक परियोजना द्वारा समर्थित किया गया.
Materials
| Mouse grip strength meter | Chatillon DFE (re-sold by Columbus Instruments) | # 80529 | |
| Hanging wire 2 limbs device | Cloth hanger or custom made device | ||
| Hanging wire 4 limbs device | Lid of rat cage or custom made device | ||
| Rotarod | Ugo Basil | # 47600 | |
| Treadmill for mice Exer 3/6 | Columbus Instruments | # 1055SRM |
References
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