Kobaylardaki Sigara Terminal Kan Örnekleme Teknikleri
Summary
Bilinen bir modeli olsa da, kobay şu anda deneysel hayvan bilimleri bir niş temsil eder ve sınırlı veri çoğu prosedürlerin yürütülmesi mevcuttur. Burada bilinçli ya da anestezi kobay ya vivo kan örnekleme teknikleri terminal olmayan dört farklı yaklaşımlar sunuyoruz.
Abstract
Kobaylar insanlara çeşitli biyolojik benzerliklere sahip ve deneysel hayvan modelleri 1-3 doğrulanır. Belirli metodoloji de çok az üzerinde Ancak, kobay kullanımı halen araştırma ve açıklayıcı veri, nispeten dar bir alanı temsil eder. Kobayların anatomik özellikleri, fare ve sıçanlara kıyasla,. Dolayısıyla örnekleme teknikleri modülasyonu, örneğin, türe özgü farklılıklar için yerleştirmek için, diğer kemirgen modellerinde farklı olmaktadır yeterli ve yüksek kalitede örnekleri elde etmek için gereklidir. In vivo çalışmalar hem uzun hem de kısa süreli sık sık örnekleme kan tekrarlanan gerektiren olarak tekniğinin seçimi de hayvanlarda stres ve rahatsızlığı azaltmak için düşünülmelidir ama aynı zamanda örneklem büyüklüğü ve ulaşılabilirlik gereksinimleri ile sağkalım yanı sıra uyum sağlamak için. Venöz kan örnekleri kobay gibi sitelerin bir dizi elde edilebilir., Safen ve şah damarınıvenler, hem avantajları ve dezavantajları içeren her tekniği 4,5. Burada, biz bilinçli veya anestezi kobay biri için dört farklı kan örnekleme teknikleri sunuyoruz. Prosedürler olmayan tüm terminal prosedürler, laboratuar hayvanlarında 6 kan toplanması için kurallar aşmamak numune hacimleri ve örneklerin sayısını temin vardır. Tüm tarif edilen yöntemler iyice test ve araştırma tesisi bünyesinde çalışmalar in vivo kan örneklemesi tekrarlanmıştır için uygulanmıştır.
Introduction
Kobay nedeniyle vitamin C, insan plasenta ile enzim ve lipoprotein profillerini yanı sıra ortak benzerlik metabolize benzer plazma lipoprotein bir besin kaynağı için bir gereklilik olarak, insanlarda biyolojik benzerlikler bir dizi değerli ve valide deneysel hayvan modelidir Prenatal gelişim 1-3,7,8. Bu kobay gibi non-alkolik yağlı karaciğer hastalığı, kardiyovasküler hastalıklar ve C vitamini eksikliğinin varsayılan etkileri değil, aynı zamanda örneğin bir etkisi olarak diyet ilişkili hastalıkların etkilerinin araştırılması için bir çekici ve uygun bir model yapar., Anne diyet müdahale gelişmekte üzerinde değinilir.
Tekrarlanan kan örnekleme çoğu zaman in vivo çalışmalar, hem uzun hem de kısa vadede gereklidir. Nedeniyle türe spesifik anatomik farklılıklara bağlı olarak örnekleme tekniği modülasyonunun diğer kemirgen modelleri ile karşılaştırıldığında, kobaylarda kan örneklerinin elde edilmesi için gerekli olan <sup> 4,5. Böylece örnekleme ve taşıma hem de farklı gereksinimleri ve seçenekleri vardır, bu damarların ve arterlerin içerisinde değişiklik içerir ve aynı zamanda kobay bir kuyruk yok. Safen veya tarsal ven örnekleme, hayvan minimal rahatsızlık ve stres neden olur ve 3,9 anestezi gerektirmez. Bu teknik, kan (100-400 ul), örneğin, az miktarda numune tekrar sağlar., Plazmadaki biyokimyasal belirteçlerini. Daha küçük bir numune boyutu (50-100 ul) yeterli değilse, bu oldukça kolay kulak damarından iğne ile elde edilebilir. Bu teknik aynı zamanda bilinçli hayvanlarda gerçekleştirilen ve kan glukoz ölçümü, örneğin 10,11 için yararlıdır edilebilir. Şahdamarından Örnekleme kan daha büyük miktarda (1-2 ml) toplanması için izin verir ama anestezi gerektirir.
Burada, biz bilinçli veya anestezi kobay biri için dört farklı kan örnekleme teknikleri sunuyoruz. Procedures olmayan tüm terminal prosedürler, laboratuar hayvanlarında 6 kan toplanması için kurallar aşmamak numune hacimleri ve örneklerin sayısını temin vardır. Bu stres minimumda tutulması gerektiğini hayvan refahı yanı sıra iyi bilim çıkarınadır. Sonuç olarak, sadece iyi eğitimli ve yetkin kişisel hayvan işlemleri yapmalıdır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Fareler ve sıçanlar ile karşılaştırıldığında, kobay doğası gereği korku ve sakince yaklaştı ve stresi azaltmak için doğru ele alınması gerekir. Görünümünde bir hayvan refahı açısından, dikkatle hareket doğal bir önceliktir; Bununla birlikte, bu da,. toplanan veriler örneğin anksiyete ile ilişkili etkilerin riskini azaltmak kortikosteroid artmış kan glikoz düzeyleri ve 12 olacaktır. Aynı şekilde, günlük kullanım normal prosedürler için hayvanları alıştıra…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Biz Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft ve Deneysel Tıp, Frederiksberg Kampüsü, Sağlık ve Tıp Bilimleri Fakültesi, Kopenhag, Danimarka Üniversitesi Bölümü'nde hayvan bakıcıları maharetli yardım kabul. Jacob Lønholdt prosedürleri filme yaptığı mükemmel teknik yardım için teşekkür etti. Bu çalışma, in vivo Farmakoloji ve Kopenhag Üniversitesi LIFEPHARM Merkezi tarafından kısmen desteklenmiştir.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Electric shaver | Wella (Contura), Denmark | 273207 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Syringes | B.Braun-Omnifix-F, Germany | 9161406V | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Needles | BD Microlance,Spain | 301156 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Microvette collection tube | Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany | 201,288,100 | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
| Accu-Check analyzer | Roche A/S Diagnostics, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Heparin 5000 IE/ml | LEO Pharma, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Zoletil 50, Chemvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Anesthesia | Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark | Alternative product may be used. Multiple suppliers | |
| Neutral eye ointment | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Gauze or a cotton swab | Alternative product may be used. Multiple suppliers | ||
| Disinfectant (70% alcohol) | Alternative product may be used. Multiple suppliers |
References
- DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
- Fernandez, M., Volek, J. S. Guinea pigs a suitable animal model to study lipoprotein metabolism, atherosclerosis and inflammation. Nutr Metab (Lond). 3 (17), (2006).
- Frikke-Schmidt, H., Tveden-Nyborg, P., Birck, M. M., Lykkesfeldt, J. High dietary fat and cholesterol exacerbates chronic vitamin C deficiency in guinea pigs. Br J Nutr. 105 (1), 54-61 (2011).
- Hem, A., Smith, A. J., Solberg, P. Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink. Lab Anim. 32 (4), 364-368 (1998).
- Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. J Pharmacol Pharmacother. 1 (2), 87-93 (2010).
- Guillen, J. FELASA guidelines and recommendations. J Am Assoc Lab Anim Sci. 51 (3), 311-321 (2012).
- Ye, P., Cheah, I. K., Halliwell, B. High fat diets and pathology in the guinea pig Atherosclerosis or liver damage. Biochim Biophys Acta. 1832 (2), 355-364 (2013).
- Tveden-Nyborg, P., et al. Maternal vitamin C deficiency during pregnancy persistently impairs hippocampal neurogenesis in offspring of guinea pigs. PLoS One. 7 (10), 12-18391 (2012).
- Schjoldager, J. G., Tveden-Nyborg, P., Lykkesfeldt, J. Prolonged maternal vitamin C deficiency overrides preferential fetal ascorbate transport but does not influence perinatal survival in guinea pigs. Br J Nutr. 110 (9), 1573-1579 (2013).
- Greulich, S., et al. Secretory products of guinea pig epicardial fat induce insulin resistance and impair primary adult rat cardiomyocyte function. J Cell Mol Med. 15 (11), 2399-2410 (2011).
- Swifka, J., Weiss, J., Addicks, K., Eckel, J., Rosen, P. Epicardial fat from guinea pig a model to study the paracrine network of interactions between epicardial fat and myocardium. Cardiovasc Drugs Ther. 22 (2), 107-114 (2008).
- Pilny, A. A. Clinical hematology of rodent species. Vet.Clin North Am Exot Anim Pract. 11 (3), 523-vii (2008).
- Franco, N. H., Olsson, I. A. Scientists and the 3Rs: attitudes to animal use in biomedical research and the effect of mandatory training in laboratory animal science. Lab Anim. 48 (1), 50-60 (2014).
- Van, L. J., et al. eAssessing the application of the 3Rs a survey among animal welfare officers in The Netherlands. Lab Anim. 47 (3), 210-219 (2013).
- Sloan, R. C., et al. High doses of ketamine-xylazine anesthesia reduce cardiac ischemia-reperfusion injury in guinea pigs. J Am Assoc Lab Anim Sci. 50 (3), 349-354 (2011).
- Jacobson, C. A. A novel anaesthetic regimen for surgical procedures in guinea pigs. Lab Anim. 35 (3), 271-276 (2001).
- Saha, J. K., Xia, J., Grondin, J. M., Engle, S. K., Jakubowski, J. A. Acute hyperglycemia induced by ketamine xylazine anesthesia in rats mechanisms and implications for preclinical models. Exp Biol Med(Maywood). 230 (10), 777-784 (2005).
