Non-Terminal blodprøvetaking Teknikker i Guinea Pigs

Summary

Selv om en kjent modell, representerer marsvin for tiden en nisje i eksperimentelle dyre vitenskaper og begrenset informasjon er tilgjengelig for utførelse av de fleste fremgangsmåter. Her presenterer vi fire forskjellige tilnærminger til ikke-terminal in vivo blodprøvetaking teknikker i enten bevisst eller bedøvede marsvin.

Abstract

Marsvin har flere biologiske likheter med mennesker, og er validert eksperimentelle dyremodeller ^1-3. Imidlertid representerer bruk av marsvin i dag et relativt smalt område for forskning og beskrivende data om spesifikke metode er tilsvarende begrenset. De anatomiske trekk av marsvin er litt forskjellig fra andre gnagere modeller, derav modulering av sampling teknikker for å tilrettelegge for artsspesifikke forskjeller, f.eks. Mot mus og rotter, er nødvendig for å oppnå tilstrekkelig og høy kvalitet prøver. Som både lang og kort sikt in vivo studier ofte krever gjentatt blod prøvetaking valg av teknikk bør være godt vurderes for å redusere stress og ubehag for dyrene, men også for å sikre overlevelse samt etterlevelse av kravene i utvalgsstørrelse og tilgjengelighet. Venøse blodprøver kan fås på en rekke steder i marsvin f.eks., Saphenous og venavener, hver teknikk som inneholder både fordeler og ulemper ^4,5. Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Prosedyrene er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr ^seks. Alle de beskrevne metodene har blitt grundig testet og anvendt for gjentatt in vivo blodprøvetaking av studier innenfor vår forskning anlegget.

Introduction

Marsvin er en verdifull og validert eksperimentell dyremodell på grunn av en rekke biologiske likheter med mennesker slik som et krav for et diett-tilførsel av vitamin C, tilsvar plasma lipoprotein metaboliserende enzymer og lipoproteinprofiler, samt felles likheter med human og placentation prenatal utvikling ^1-3,7,8. Dette gjør marsvin en attraktiv og egnet modell for å studere effektene av diettrelaterte sykdommer slik som ikke-alkoholholdige fettleversykdom, kardiovaskulære sykdommer og mulige effekter av vitamin C-mangel, men også virkningen av f.eks. Maternal kost inngrep på utvikling avkom.

Gjentatte blodprøvetaking er ofte nødvendig i både lang og kort sikt in vivo studier. Med hensyn til det artsspesifikke anatomiske forskjeller modulering av prøvetagningsteknikk er nødvendig for å oppnå blodprøver hos marsvin sammenlignet med andre gnagermodeller <sup> 4,5. Dette inkluderer variasjon i løpet av vener og arterier, og også at marsvin ikke har en hale, og dermed har forskjellige krav og muligheter for både prøvetaking og håndtering. Prøvetaking fra saphena eller tarsal vene, induserer minimalt ubehag og stress i dyret, og krever ikke anestesi ^3,9. Denne teknikken gjør det mulig gjentatte prøver av små mengder av blod (100-400 pl), f.eks. For å bestemme de biokjemiske markørene i plasma. Ved en enda mindre prøvestørrelsen er tilstrekkelig (50-100 ul), kan dette ganske enkelt oppnås ved punktering ørevenen. Denne teknikken kan også bli utført i bevisste dyr og er nyttige for eksempel ved måling av blodglukose ^10,11. Prøvetaking fra vena jugularis tillater innsamling av større mengder av blod (1-2 ml), men krever anestesi.

Her presenterer vi fire forskjellige blodprøvetaking teknikker for enten bevisst eller bedøvede marsvin. Procedures er alle ikke-terminal prosedyrer gitt at prøvevolumer og antall prøver ikke overstiger retningslinjer for blodprøvetaking hos forsøksdyr ^seks. Det er av hensyn til god vitenskap samt dyrevelferd at stress bør holdes på et minimum. Dermed kan bare godt trente og kompetente personlige bør utføre dyre prosedyrer.

Protocol

De viste prosedyrer ble utført i henhold til protokoller som er godkjent av det danske forsøk med dyr Datatilsynet under Ministry of Food, landbruk og fiskeri. 1. Blodprøvetaking fra Lateral saphena eller Tarsal Vein Utfør denne prosedyren uten bedøvelse og ved hjelp av en etterforsker, en håndtering av marsvin, og en innsamling av prøven. Barbere tarsal regionen i bakbenet med en barbermaskin til venene er synlige. Sikre at området er stort nok til å unngå pel…

Representative Results

Fire ulike tilnærminger til ikke-terminal in vivo blodprøvetaking teknikker i enten bevisst eller bedøvede marsvin har blitt presentert. Figur 1 illustrerer løpet av lateral saphena og tarsal blodåre i marsvin og mulige injeksjonssteder. Øret vener synlige på den dorsale overflate av et marsvin øret er illustrert i figur 2. Disse årer kan benyttes ved blodprøvetaking når bare en meget lite volum kreves. Posisjonen til marsvin for jugular blodprøvetaking er viser i <…

Discussion

Sammenlignet med mus og rotter, marsvin er engstelig av natur og må nærmet rolig og håndteres på riktig måte for å redusere stress. Fra et dyrevelferd synspunkt, opptrer med forsiktighet er naturligvis en prioritet; men dette vil også redusere risikoen for angstassosierte effekter på de innsamlede data, f.eks., økte blodnivåer av kortikosteroider og glukose ^12.. Likeledes vil daglige håndtering tilvenne dyrene til normale prosedyrer og kan tjene til å redusere stress ytterligere. Praktisk…

Materials

Name of Material/ Equipment	Company	Catalog Number	Comments/Description
Electric shaver	Wella (Contura), Denmark	273207	Alternative product may be used. Multiple suppliers
Syringes	B.Braun-Omnifix-F, Germany	9161406V	Alternative product may be used. Multiple suppliers
Needles	BD Microlance,Spain	301156	Alternative product may be used. Multiple suppliers
Microvette collection tube	Sarstedt, D-51588Nümbrecht, Germany	201,288,100	Alternative product may be used. Multiple suppliers
Accu-Check analyzer	Roche A/S Diagnostics, Denmark		Alternative product may be used. Multiple suppliers
Heparin 5000 IE/ml	LEO Pharma, Denmark		Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia	Zoletil 50, Chemvet, Denmark		Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia	Narcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, Denmark		Alternative product may be used. Multiple suppliers
Anesthesia	Torbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, Denmark		Alternative product may be used. Multiple suppliers
Neutral eye ointment			Alternative product may be used. Multiple suppliers
Gauze or a cotton swab			Alternative product may be used. Multiple suppliers
Disinfectant (70% alcohol)			Alternative product may be used. Multiple suppliers