내막 증식증 (IH) 및 정맥 이식 실패의 개발로 이어지는 메커니즘은 아직 제대로 이해하고 있습니다. 이 연구는 제어 흐름과 압력 하에서 인간의 혈관을 관류하는 생체 시스템을 설명합니다. 또한 외부 메쉬 보강 효율 IH의 개발 평가 하였다 제한한다.
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방법 논문
인간 복재 정맥 절차 전의 VIVO 관류 및 외부 보강
* These authors contributed equally
이 논문에서
요약
초록
광범위한 폐색 성 동맥 질환에 대한 현대적인 치료의 주류는 정맥 우회술이다. 그러나, 내구성은 결국 혈관 폐색 이식 실패에 이르게 내막 증식증 (IH)에 의해 위협됩니다. 기계의 힘, 특히 낮은 전단 응력과 높은 벽 장력은, 시작하고 이러한 세포 및 분자 변화를 유지하는 것으로 생각되지만, 자신의 정확한 기여를 풀어 일이다. 선택적 IH의 생물학에 대한 압력과 전단 응력의 역할을 평가하기 위해, 생체 외 관류 시스템 (EVPS)는 동맥 요법에서 인간 복재 정맥 (높은 전단 응력 및 고압)의 세그먼트를 관류하기 위해 만들어졌습니다. 또한, 기술 혁신은 같은 맥락, 외부 메쉬 철근이 하나의 세그먼트를 동시에 관류시켰다. 정맥 노 터치 기술을 사용하여 수확하고 즉시 EVPS에 조립 실험실로 옮겼다. 갓 ISOL의 한 세그먼트나타나는데 정맥 (제어, 일 영)을 관류되지 않았습니다. 다른 두 세그먼트가 최대 칠일 관류하고, 하나는 완전히 4mm (직경) 외부 메쉬 숨겨된다. 압력, 유속 및 맥박수를 연속적으로 모니터링하고 대퇴 동맥에 지배적 혈역학 조건을 모방하도록 조정 하였다. 재관류 완료되면, 정맥 분리하고, 조직 학적 및 분자 분석을 사용 하였다. 생체 외 조건, 고압 하에서 관류 (동맥, = 100 mmHg로 평균) IH 인간 혈관의 리모델링을 생성하기에 충분하다. 이러한 변화들은 외부 메쉬 폴리 에스테르의 존재하에 감소된다.
서론
심장 혈관 질환은 서구 국가 하나의 이환율과 사망률의 주요 원인입니다. 혈관 내 치료에 만든 발전에도 불구하고, 바이 패스 수술을 따라서 만 절반 이상 정맥 이식은 미국에서 매년 수행, 현대 치료의 의지가 남아있다. 그러나 수십 년간의 연구에도 불구하고, 하체의 정맥 이식의 30~60% 인해 내막 증식증 (IH) 2에 첫번째 년 안에 실패한다. 기계의 힘, 특히 낮은 전단 응력 (SS) 및 높은 벽 장력이 증식 응답 3,4의 시작과 발전에 중추적입니다. 이 문제를 해결하기 위해, 생체 혈관의 관류 시스템 (EVPS)을 엄격하게 통제 혈역학 적 상태 (압력, 전단 응력), 인간 복재 정맥의 동작에 따라, 공부 생성되었습니다. 이 연구에서, 동맥 순환 형으로 삽입 다음, 고압 prolif을 자극하기에 충분 하였다 (= 100 mmHg로 의미)eration과 내막 층 (IH) (5) 내로 평활근 세포의 이주.
포유 동물의 연구는 "동맥 화 정맥"지원 급성 혈역학이 한번 정맥 동맥에 주입을 향하는 적 환경 변화에 대처하는 효율적인 방법으로서 외부 보강의 사용을 제안했다. 메시는, 과잉 팽창이 방지 증가 전단 응력 및 벽 장력 결과적 IH 6....
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프로토콜
로잔 대학의 윤리위원회는 인체 조직의 사용을 1983 년 개정, 1975 년 헬싱키 선언에 명시된 원칙에 따라 아르 실험을 승인했다.
1 인간 대 복재 정맥 수확
- 허혈 하체 바이 패스 수술을받은 환자에서 비 정맥류 인간 복재 정맥의 잉여 세그먼트를 얻습니다. 수술실에서, 요오드 용액과 다리 전체를 소독하고 발에 사타구니에서 다리를 노출하는 환자를 내리면.
- 무릎에 사타구니에서 중간 절개를 (중단 피부 부분을 떠나).
- 조직 (노 터치 기술을) 주변의 척추 경에 큰 복재 정맥을 수확. 4-0 실크 넥타이와 혈관의 보안 측면 분기합니다. 즉시 RPMI-1640 G에서 4 ° C에서 9cm 2.5-4 mm의 외부 직경이 큰 복재 정맥의 긴 잉여 세그먼트의 최소 저장lutamax 매체는, 12.5 % 태아 혈청으로 보충하고 실험실로 가져옵니다.
2 EVPS 디자인
- . 그림 1에 나와있는 일반적인 장비를 조립 모든 장비를 오토 클레이브 멸균 조건에서 모든 구성 요소를 유지합니다. 또한, 시스템은 방수 및 배지에 화학 물질이 누출되지 않도록. 표지 폴리 메타 크릴 메틸 (PMMA-GS)를....
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결과
EVPS 인간 복재 정맥 리모델링하고 IH를 접목에 독립적으로 혈역학 적 힘을 평가하는 유용한 도구를 제공합니다.
그림 1은 관류 챔버와 정맥 지원을 보여줍니다. 도 1A 및도 B에서, 이전에 정맥 지지체 (도 1a) 및 후 (도 1B) 조립체는 각각 묘사된다. 그것은 쉽게 (왼쪽에서 오른쪽으로) 밀어 수 2 L 형상 조각 용 지지체로서 기능 9cm 측정 한 일반 스테인레스 스틸 튜브, (위에서 아래로)로 구성하고 신뢰성있는 기술을 제공한다 정맥에지지 크기 조정. 이 조각의 각 통합 나사 (화살촉)에 의해 제자리에 고정 된 강철 실린더 (정맥 커넥터)에 맞게 POM 디스크를 보유하고있다. 그림 1C-D 단독 (C) 및 정맥 지원 (D)의 삽입 후 재관류 챔버를 보여줍니다. 재관류 챔버에서 함몰로 설계장소 (위)에있는 정맥 .......
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토론
이 연구는 인간의 혈관에 광범위한 혈역학 적 연구를 수행 할 수있는 생체 정맥 관류 시스템 (EVPS)을 알게되어. 이 시스템은 생체 내에서 세포를 순환시켜 출시 악화 염증과 성장 요인의 부재에서 정의 혈역학에서 복재 정맥 관류 할 수 있습니다. 따라서, 인간의 혈관 이식 5,11,12,15 IH에서의 제어에 관여하는 기본 경로의 더 나은 이해를 제공한다.
재현성과 정량 혈역학 적 교란은 생체 내에서 제한됩니다. 여러 복잡한 쥐의 미세 절차를 설명 하였다. SS가 심하게 감소 IH 3 개선 흐름 오른쪽 경동맥에 기증자 마우스에서 대정맥의 개재를 통해 바이 패스 isograft 모델과 유출 지점 결찰의 추가 생성, 중반 이식 또는 경동맥 협착을 사용. 바깥 쪽 안쪽으로 리모델링이 더 간 할 수있다 대원위부 경동맥 협착이 16 대 중반에 초점을 사용 rogated. 큰 동물.......
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공개 사항
저자가 공개하는 게 없다.
감사의 글
이 작품은 SNF [31003A-138528], Octav 및 Marcella의 Botnar 재단, 노바티스 재단과 엠마 Muschamp 재단의 보조금에 의해 지원되었다. 우리는 우수한 기술 지원을 마틴 Lambelet하고, 장 - 크리스토프 Stehle 감사합니다.
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재료
| 이름 | 회사 | 카탈로그 번호 | 댓글 |
|---|---|---|---|
| RPMI 1640 - Glutamax | Life Technologies | 61870-010 | |
| 페니실린/스트렙토마이신/진균존 | 바이오컨셉 | 4-02F00-H | |
| 덱스트란 from Leuconostoc spp. 500 g | Sigma-Aldrich | 31390 | |
| Tampon PBS CHUV pH 7.1-7.3 1 L | Laboratorium und Grosse Apotheke Dr. G. Bichsel AG | 100 0 324 00 | |
| 크라이오스크닝 임베딩 매체 - Tissue-Tek OCT Compound | Fisher Scientific | 14-373-65 | |
| 실리콘 튜빙(과산화물) L/S 16 (96400-16 ) - 7.5 m | Idex Health & 과학 GMBH | MF0037ST | |
| Y-스플리터 | Idex 건강 및 과학 GMBH | Y-커넥터 | |
| 35mm 배양 접시 | 시그마-알드리치 | CLS430165-100EA | |
| 15ml 팔콘 튜브 | BD Bioscence | 352096 | |
| 50ml 팔콘 튜브 | BD Bioscence | 352098 | |
| 기어링 펌프 - Reglo-Z | Idex Health & 과학 GMBH | SM 895 | App-Nr 03736-00194 |
| 펌프 헤드 | Idex 건강 및 과학 GMBH | MI0008 | |
| 모니터링 키트 TRANSPAC IV | icumedical | 011-0J736-01 | |
| 20ml 주사기 | B. Braun Medical SA | 4612041-02 | |
| Etibon 3-0 FS-2 | Ethicon- Johnson& Johnson | EH7346H | |
| Mesh ProVena 6-8mm | B. Braun Medical SA | 1105012-14 | |
| NaCl : 염화나트륨 용액 관류 0.9 % (100 ml) | B. Braun Medical SA | 534534 | |
| Masterflex L / S 표준 드라이브 | Cole-Parmer Instrument Co | 7521-10 | |
| 수집 카드 | National Instruments | PCI-6024 E | |
| 유량계 모듈 | Transonic Systems Inc. | TS410 및 T402 | |
| 스톱콕 3방향 | BD Connexta Luerlock | 394600 | |
| Millex 필터 | Milian | SE2M229I04 |
참고문헌
- Sal Go, A., et al. Executive summary: heart disease and stroke statistics--2014 update: a report from the american heart association. Circulation. 129, 399-410 (2014).
- Sal Conte, M., et al.
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재인쇄 및 허가
