पृथक perfused हड्डीवाला रेटिना के लिए एक तनाव मॉडल के रूप में ग्लूटामेट और hypoxia
Summary
इस अध्ययन के साथ, हम भविष्य के पूर्व नैदानिक चिकित्सीय परीक्षण के लिए पृथक superfused गोजातीय रेटिना के लिए एक मानकीकृत तनाव मॉडल परिचय। एक- और बी-लहर आयाम द्वारा प्रतिनिधित्व रेटिना समारोह पर या तो हाइपोक्सिया (शुद्ध एन 2) या ग्लूटामेट तनाव (250 माइक्रोन ग्लूटामेट) के प्रभाव का मूल्यांकन किया गया था।
Abstract
Neuroprotection पिछले दशकों में नेत्र विज्ञान अनुसंधान के क्षेत्र में जांच की एक मजबूत क्षेत्र दिया गया है और इस तरह के मोतियाबिंद, रेटिना संवहनी रोड़ा, रेटिना टुकड़ी, और मधुमेह रेटिनोपैथी जैसे रोगों को प्रभावित करता है। यह भविष्य के पूर्व नैदानिक चिकित्सीय परीक्षण के लिए एक मानकीकृत तनाव मॉडल को लागू करने के लिए इस अध्ययन का उद्देश्य था।
गोजातीय retinas के तैयार है और एक ऑक्सीजन संतृप्त मानक समाधान के साथ perfused, और एर्ग दर्ज की गई थी गया। स्थिर बी-तरंगों, हाइपोक्सिया (शुद्ध एन 2) या ग्लूटामेट तनाव (250 माइक्रोन ग्लूटामेट) दर्ज करने के बाद 45 मिनट के लिए exerted किया गया था। अकेले फोटोरिसेप्टर समारोह पर प्रभाव की जांच करने के लिए, 1 मिमी aspartate एक-तरंगों प्राप्त करने के लिए जोड़ा गया है। एर्ग-वसूली 75 मिनट के लिए नजर रखी थी।
हाइपोक्सिया के लिए, 87.0% की एक लहर आयाम में कमी 45 मिनट (वार्शआउट पी = 0.03 के अंत के बाद 36.5% की कमी) की एक प्रदर्शनी के समय के बाद (पी <0.01) का उल्लेख किया गया था। इसके अतिरिक्त, एक प्रारंभिक decrसांख्यिकीय महत्व पर पहुंच गया है कि, 87.23% दर्ज की गई थी की बी-लहर आयाम में आसानी (पी <0.01, वार्शआउट के अंत में, पी = 0.03 में 25.5% की कमी)।
250 माइक्रोन ग्लूटामेट, 1.9% (P> 0.05) की कमी के बाद लहर आयाम (P> 0.05) की एक प्रारंभिक 7.8% कटौती के लिए। बी-लहर आयाम (पी <0.01) का उल्लेख किया गया था की 83.7% की कमी; 75 मिनट की एक वार्शआउट के बाद कमी 2.3% (पी = 0.62) था। इस अध्ययन में, एक मानकीकृत तनाव मॉडल भविष्य में संभव न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभाव की पहचान करने के लिए उपयोगी हो सकता है कि प्रस्तुत किया है।
Introduction
Neuroprotection पिछले दशकों में नेत्र विज्ञान अनुसंधान के क्षेत्र में जांच की एक मजबूत क्षेत्र में किया गया है। रेटिना ऑक्सीजन पर काफी निर्भर करता है और उसके आसपास की कोशिकाओं के चयापचय से दृढ़ता से प्रभावित होता है कि एक बेहद संवेदनशील न्यूरोनल नेटवर्क है। तंत्रिका कोशिका क्षति से संबंधित प्रमुख नेत्र विकृतियों रेटिना संवहनी occlusions, मोतियाबिंद, और रेटिना टुकड़ी हैं।
रेटिना धमनी रोड़ा, रेटिना संवहनी रोड़ा के लिए एक उदाहरण के रूप में, कारण भीतरी रेटिना एक की हाइपोक्सिया के लिए दृष्टि के अचानक नुकसान होता है। अक्सर यह दृश्य तीक्ष्णता काफी एक उबरने के रोगियों के केवल 8% के साथ, एक लगातार दृश्य नुकसान एक सामान्य संवहनी विकृतियों दो और नेतृत्व के साथ जुड़ा हुआ है। धमनी फाइब्रिनोलयन एक इलाज के विकल्प के रूप में सुझाव दिया गया है हालांकि, लाभ एक यादृच्छिक चिकित्सीय परीक्षण 3 में दिखाया नहीं जा सका।
मोतियाबिंद और रेटिना टुकड़ीदोनों ग्लूटामेट एकाग्रता 4-6 में वृद्धि हुई है। शारीरिक शर्तों के तहत ग्लूटामेट पूरे केंद्रीय तंत्रिका तंत्र भर में एक उत्तेजक ट्रांसमीटर और भीतरी रेटिना 7,8 के रूप में सामना करना पड़ा है। बुलंद ग्लूटामेट का स्तर न केवल मोतियाबिंद और रेटिना टुकड़ी 5,6 में बल्कि proliferative मधुमेह रेटिनोपैथी 9 में पाया गया है। ग्लूटामेट में वृद्धि हुई है, संभवतः इसलिए, तंत्रिका कोशिका क्षति 10 excitotoxicity की ओर जाता है और। रेटिना टुकड़ी की और रेटिना (Pars प्लाना vitrectomy) पर proliferative मधुमेह रेटिनोपैथी सर्जरी के कुछ मामलों में ज्यादातर मामलों में आवश्यक हैं। Pars प्लाना vitrectomy यांत्रिक हेरफेर के दौरान, ऑप्टिक फाइबर या लंबे समय के आपरेशनों के दौरान सिंचाई के समाधान के लिए उच्च प्रवाह दरों द्वारा लगाए कतरनी तनाव के उज्ज्वल प्रकाश रेटिना 11,12 पर एक अतिरिक्त तनाव डालती है।
सभी उल्लेख रोगों विकृति Retin के लिए स्थानीय है कि आम में हैएक अकेले और एक neurosensory प्रणाली के रूप में रेटिना की रक्षा के लिए तरीके खोजने के लिए चुनौती के साथ आंखों के समुदाय मुद्रा।
electroretinogram (एर्ग) में विवो फोटोरिसेप्टर समारोह (एक लहर) और भीतरी रेटिना (ख-तरंग) के समारोह के मूल्यांकन के लिए मानक तरीका है। एर्ग कॉर्निया में पेश चांदी इलेक्ट्रोड से मापा जाता है और आंखों की छड़ या शंकु में या भीतरी रेटिना में दोष का पता लगाने के लिए प्रकाश की एक बढ़ती हुई स्तर से प्रेरित किया जा रहा है। रेटिना में विभिन्न दोषों आयाम (प्रतिक्रिया की ताकत) या एर्ग की विलंबता (समय से प्रतिक्रिया अंतराल) में परिवर्तन से पता लगाया जा सकता है। विभिन्न एर्ग प्रोटोकॉल और माप तरीकों (पैटर्न-एर्ग, मल्टीफोकल-एर्ग या उज्ज्वल क्षेत्र एर्ग) दोषों के आगे भेदभाव अनुमति देते हैं। पृथक रेटिना की तकनीक यह संभव है एक अध्ययन जानवर जैसे से हस्तक्षेप के बिना रेटिना पर प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए कर रही है, हाल ही में शुरू की गई हैसामान्य प्रतिक्रियाओं 13,14।
यह मूल्यांकन और superfused अलग रेटिना पर हाइपोक्सिया और ग्लूटामेट तनाव के लिए एक परिभाषित और मानकीकृत तनाव मॉडल को लागू करने के लिए इस अध्ययन का उद्देश्य था। इस प्रकार, हम कुछ एजेंट या आंतराक्षि सिंचाई के समाधान के न्यूरोप्रोटेक्टिव प्रभाव पर भविष्य के अध्ययन के लिए नींव रखना करने की उम्मीद कर रहे हैं।
Protocol
Representative Results
Discussion
इस अध्ययन में, हाइपोक्सिया के 45 मिनट के बाद बी-लहर आयाम पर एक महत्वपूर्ण प्रभाव पाया गया था। यह कमी अभी भी वार्शआउट चरण के बाद महत्वपूर्ण था। फोटोरिसेप्टर संभावित पर एक समान प्रभाव देखा जा सकता है।
<p class…Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This paper is dedicated to my beloved wife Maren and our little Karl.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| 120 mM NaCl | Merck Pharma, Germany | 1,064,041,000 | |
| 2 mM KCl, | Merck Pharma, Germany | 1,050,010,250 | |
| 0.1 mM MgCl2, | Merck Pharma, Germany | 58,330,250 | |
| 0.15 mM CaCl2 | Merck Pharma, Germany | 111 TA106282 | |
| 1.5 mM NaH2PO4/13.5 mM Na2HPO4 | Merck Pharma, Germany | 1,065,860,500 | |
| 5 mM glucose | Merck Pharma, Germany | 40,741,000 |
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