अंतर्गर्भाशयी टेलीमेटरी माउस सिकुड़ा दबाव मापने के लिए<em> Vivo</em
Summary
This manuscript provides a protocol for implanting telemeters in the mouse for the purpose of measuring intrauterine pressures during pregnancy.
Abstract
आणविक और इलेक्ट्रिकल संकेतों के एक जटिल एकीकरण गर्भावस्था के अंत में एक सिकुड़ा अंग में एक मौन गर्भाशय को बदलने की जरूरत है। गर्भाशय सिकुड़ना के प्रमुख नियामकों की खोज के बावजूद, इस प्रक्रिया को अभी भी पूरी तरह से समझ नहीं है। ट्रांसजेनिक चूहों प्रसव का अध्ययन करने में जो एक आदर्श मॉडल प्रदान करते हैं। इससे पहले, माउस में गर्भाशय सिकुड़ना अध्ययन करने के लिए एकमात्र तरीका कई कारणों के लिए suboptimal हैं जो पूर्व vivo Isometric तनाव रिकॉर्डिंग थी। गर्भाशय अपनी शारीरिक वातावरण से हटा दिया जाना चाहिए, जांच की एक सीमित समय के पाठ्यक्रम संभव है, और चूहों का बलिदान किया जाना चाहिए। radiometric टेलीमेटरी की हाल ही में विकास चूहों में vivo में अंतर्गर्भाशयी दबाव के अनुदैर्ध्य, वास्तविक समय मापन के लिए अनुमति दी गई है। प्रसव वर्णन किया गया है, जब तक यहां, एक अंतर्गर्भाशयी दूरमापी का आरोपण मध्य गर्भावस्था से माउस गर्भाशय में दबाव में परिवर्तन को मापने के लिए। प्रेस में की तुलना अंतर सेजंगली प्रकार और ट्रांसजेनिक चूहों के बीच ures, ब्याज की एक जीन के शारीरिक प्रभाव elucidated किया जा सकता है। इस तकनीक को अपरिपक्व श्रम सहित गर्भावस्था के दौरान myometrial विकारों के इलाज के लिए प्रयोग किया जाता चिकित्सा विज्ञान के विकास में तेजी लाने चाहिए।
Introduction
अपरिपक्व जन्म प्रसवकालीन रुग्णता और विकसित देशों में मृत्यु दर का प्रमुख कारण है; यह प्रसवकालीन रुग्णता का 50% और प्रसवकालीन मृत्यु दर 1,2 के 75% के लिए जिम्मेदार है। अपरिपक्व श्रम बहुमुखी है और अज्ञातहेतुक हो सकता है। अधिक से अधिक शोध एक सिकुड़ा एक में एक मौन ऊतक से myometrium बदलने आणविक और बिजली के रास्ते पर उभरा है हालांकि, अपरिपक्व श्रम का सही pathophysiology मायावी बनी हुई है। अंत: स्रावी, सूजन, और जीन विनियमन सभी अपरिपक्व श्रम 3,4 से जोड़ा गया है। हालांकि, नैतिक चिंताओं मानव में अपरिपक्व श्रम के तंत्र पर शोध कार्य करने की क्षमता की सीमा।
इन सीमाओं को देखते हुए कई शोधकर्ताओं प्रसव के शरीर क्रिया विज्ञान का अध्ययन करने के साथ जो एक मॉडल प्रणाली के रूप में चूहों में बदल गया है। चूहे कम gestations लगभग तीन सप्ताह तक चलने वाले और आसानी से आनुवंशिक रूप से हेरफेर किया जा सकता है। इसके अलावा, कई आनुवंशिक माउस मॉडल हैश्रम 5 के लिए आवश्यक हैं कि संकेत दे रास्ते निर्धारित करने के लिए विकसित किया गया। माउस और मानव उत्पत्ति के बीच मुख्य अंतर के बावजूद, चूहों और इंसानों अंतर्गर्भाशयी सूजन और संक्रमण के 6 सहित श्रम के लिए आवश्यक हैं कि एक ही तंत्र के कई साझा करें। इस प्रकार, चूहों गर्भाशय गतिविधि की जांच के लिए एक अमूल्य उपकरण के रूप में सेवा करते हैं। तिथि करने के लिए, सोने के मानक चूहों में गर्भाशय सिकुड़ना को मापने के लिए पूर्व vivo Isometric तनाव रिकॉर्डिंग कर दिया गया है; हालांकि, इस प्रयोग के प्रति एक गर्भावधि समय बिंदु तक ही सीमित है और इसकी शारीरिक पर्यावरण से गर्भाशय को हटाने की आवश्यकता है। एक अन्य महत्वपूर्ण कारक इन जांच के लिए आवश्यक जानवरों की एक बड़ी संख्या है। अन्त में, इस पद्धति श्रम और अपरिपक्व pathophysiology के शामिल होने की जांच अनुदैर्ध्य अध्ययन के लिए अनुमति नहीं है।
धमनी दबाव अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया radiometric टेलीमेटरी उपकरणों में किए गए हाल की प्रगति में चूहों और int में सात में परिवर्तनचूहों 8 में rauterine दबाव में उसी तकनीक का गर्भावस्था के दौरान चूहों में अंतर्गर्भाशयी दबाव में परिवर्तन का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि क्या करने के लिए प्रश्न विनती की। प्रारंभिक समस्या निवारण करने के बाद, एक विधि सफलतापूर्वक एक माउस में श्रम प्रेरण और प्रगति को मापने के लिए विकसित किया गया था। यह इन विवो दृष्टिकोण सशक्त श्रम संकुचन का संकेत उच्च दबाव राज्य के लिए मौन गर्भाशय के कम दबाव के राज्य से संक्रमण उपाय कर सकते हैं। इस विधि को भी जीन अभिव्यक्ति 9 के शारीरिक प्रभाव का प्रदर्शन समझौता प्रसव और जंगली प्रकार चूहों के साथ ट्रांसजेनिक चूहों के बीच महत्वपूर्ण दबाव मतभेदों का पता लगाने में सक्षम है। इस प्रोटोकॉल गर्भावस्था के दौरान माउस गर्भाशय दबाव का अध्ययन करने के विवो विधि में, एक वास्तविक समय प्रदान करता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
Myometrial सिकुड़ना की जांच मांसपेशियों में तनाव की पूर्व vivo मापन पर भरोसा किया है। इस पद्धति जानवरों जीने के लिए प्रशासित नहीं किया जा सकता कि नव विकसित uterotonic दवाओं के प्रारंभिक चरण के परीक्षण के लिए उपयोग?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by funding from the March of Dimes FY12-133 (S.K.E.) and the National Institutes of Health R01HD037831 (S.K.E.). We would like to thank Dr. Deborah Frank for critical review of the manuscript.
Materials
| Name of Material/ Equipment | Company | Catalog Number | Comments/Description |
| Surgical Glue | 3M Vetbond | 1469SB | Tissue Adhesive–stored in Drierite |
| Absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | J212H | Vicryl |
| Non-absorbable 6-0 Sutures | Ethicon | 8706H | Prolene |
| Water Jacket Blanket + Heating Pad | Gaymer | T/Pump PN 11184-000 Blanket-66N111CC | Specialized for rodents |
| Bead sterilizer | Keller | Z378577 | Steri 250 Sterilizer |
| Disecting Microscope | Nikon | SMZ754 | Fibre optic gooseneck external light source |
| Sterile Surgical Gloves–Latex | Cardinal Health Triflex | 2D7253 | |
| PhysioTel PA-C10 Pressure Transmitter | Data Sciences International | 270-0135-001 | TA11PA-C10 |
| Telemeter Reciever | Data Sciences International | 272-6001-001 | RPC-1 |
| Dataquest ART 4.3.2 Analysis Platinum | Data Sciences International | 271-0147-141 | Analysis software |
| Diet Recovery Gel | Clear H2O | 72-01-5022 | Purified Soft Diet for Rodents |
| Tergazyme | Sigma-Aldrich | Z273287 | Enzyme detergent |
References
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