Summary

간단하고 컴퓨터 지원 마우스에 대한 후각 테스트를

Published: June 15, 2015
doi:

Summary

We present a simple and unbiased olfactory test in mice. With this protocol olfactory discrimination, preference, avoidance and sensitivity to a novel odor as compared to water can be assessed in single behavioral sessions. This method is indicated for a single experimenter and analysis is based on computer-assisted video processing.

Abstract

후각은 매우 종 가운데 보존하고 재생과 생존을 위해 필요합니다.

인간에서, 후각은 노화의 영향을받는 감각 중 하나이며, 신경 퇴행성 질환의 강력한 예측 인자이다. 따라서, 후각 테스트 초기 신경 학적 결손을 검출하는 비 침습적 진단 방법으로 사용된다. 후각 네트워크 감수성 근본적인 메커니즘을 이해하기 위하여, 설치류에서 후각 연구는 지난 10 년간 추진력을 얻고있다.

여기서는 사전 식품이나 물 제한없이 마우스에서 타고난 악취 지각 감도의 매우 간단한 시간 효율적이고 재현 후각 테스트 방법을 제시한다. 시험은 마우스에 익숙한 환경에서 수행되는, 냄새와 취기 노출의 2 분의 세션 만이 필요합니다. 분석에 ImageJ에 컴퓨터 보조 명령을 사용하여, 사후를 수행하기 때문에, 될 수있는한 연구원에 의해 처음부터 끝까지 수행.

이 프로토콜은 특별한 하드웨어 또는 설치를 필요로하지 않으며, 후각 인식과 감도를 테스트에 관심이있는 실험실에 대해 표시됩니다.

Introduction

후각은 포유 동물에서 가장 선진국과 중요한 감각 기능 중 하나입니다. 후각 활동의 손상 차손은 최악의 경우 음식 섭취, 사회적 행동하고, 심지어 생존에 영향을 미칠 수 있습니다. 인간으로, 후각 저하가 1 의존 나이이고 신경 장애 2의 강력한 예측 인자로 간주됩니다 – 6. 펜실베니아 대학에 의해 개발 된 후각 식별 검사는 현재 초기 신경 학적 결손 7을 평가하고 높은 확률로 치매 8,9의 진행을 예측할 수있는 가장, 사용되는 비 침습적 및 정량화, 진단 테스트 중 하나를 나타냅니다.

후각 시스템 및 설치류에서 후각의 굴지의 접근성, 기전 후각 기능 (10)를 다루는 연구의 강렬한 선을 촉발했다. 우리는 이전에 신호 RECEPT의 기능의 손실을 보여 주었다또는 Notch1은 후각 회피 (11)에 영향을 미친다. 이 프로토콜에서 우리는 후각 성능을 연구하는 신경 세포 나 교세포에서 신호 리간드, Jagged1 결핍 된 마우스를 사용합니다.

타고난 후각은 인식과 같은 세 개의 매개 변수, 냄새와 후각 민감도 4 사이의 차별에 의해 정의된다. 설치류 후각 테스트는 다양한 방식으로 수행 될 수 있으며, 일부 행동 연구는 특정 증기 농도 및 정확한 시간 프레임 (12)에 동물에게 냄새를 제공 olfactometers, 사용하게 – 14. 그럼에도 불구하고,이 장비는 고가이고 만 전문 시설에서 사용할 수 있습니다. 우리의 연구에서, 우리는 휘발성 향기를 이용하여 수행되고, 간단한 빠르고 재현성 후각 시험 프로토콜을 제공한다. 테스트는 유인 또는 기피 냄새를 측정 인식을 설명하고 향기와 물 11,15,16 사이의 차별을 평가한다. 와트, 동일한 설정을 사용하여E는 다양한 농도 (16, 17)에서의 냄새에 대한 민감도를 측정 할 수있다. 페이지 및 동료 (18)의 작품에서 영감을 사후 컴퓨터를 이용한 영상 처리, 실험 맹검 전체 실험을 수행 할 수있는 한 사람을 허용 할 필요없이 공정한 결과를 제공합니다.

이 프로토콜은 마우스에서 후각 거동을 연구하기위한 시작점을 제공하기위한 것이다.

Protocol

모든 동물의 절차는 과학적인 목적으로 사용되는 동물의 보호에 관한 유럽 연합 지침 63분의 2,010 / 유럽 연합 (EU)에 따라하고 (프리 부르 주, 스위스) 지역의 동물 관리위원회에 의해 승인됩니다. 1. 동물 준비 실험 동물 성인 남성 야생 유형과 연령 3-5 개월 형질 전환 생쥐 (C57BL / 6 배경)에 대한 실험을 수행합니다. 마우스의 세 그룹은 야생형 한배의 새끼 컨트?…

Representative Results

인식 테스트는 2-MB 산에 땅콩 버터와 회피에 매력을 측정합니다. 세 그룹의 마우스는 시험 물에 비해 "냄새 경계"에서 소요 시간을 정량화한다. 물 (8 t = 2.52, p <0.05)에 비교하여 환경 시험에서, 대조군은 냄새에 상당한 선호도를 표시한다. 반면에, B 군은 땅콩 버터에 상당한 매력을 표시하지 않고 물 (T 6 = 3.22, P <0.05)과 더 많은 시간을 보낸다. 따라서, 대조군 (F 1,7</su…

Discussion

냄새에 대한 인식, 냄새에 물과 감도 대 냄새 사이의 차별이 프로토콜에서 제안 된 테스트는 마우스의 타고난 후각 행동의 다양한 측면을 평가 할 수 있습니다. 이 프로토콜은 이전에 15을 도시 선호도 및 회피 스케일에 따라서 임의의 냄새에 적용될 수있다. 프로토콜 탐색 활동을 기반으로하고 있기 때문에 그것은 마우스가 움직임에 영향을주는 후각 탐사 방해 할 수있는 임의의 모터 또?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This work is funded by the Swiss National Foundation (31_138429) and Synapsis Foundation for the support of research on Alzheimer’s disease.

Materials

Mouse cage Italplast (Italy) 1144B 36 cm length x 20.5 cm width x 13.5 cm height
Chipped wood bedding Abedd (Austria) LTE E-001 3 cm high
Peanut butter Migros (Swizterland) NA 1:10
2-Methylbutyric Sigma Aldrich (Switzerland) W269514 Pure
Female Urine from fertile females of same mouse strain NA NA Dilution series
Camera Olympus (US) Camedia C-8080 MOV files
Quicktime for Java (Windows) Apple (USA) NA video plugin for visualizing MOV files
Image J for Windows NIH (USA) NA Video Processing/Analysis

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Cite This Article
Brai, E., Alberi, L. Simple and Computer-assisted Olfactory Testing for Mice. J. Vis. Exp. (100), e52944, doi:10.3791/52944 (2015).

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