急速にマウス腸のホールマウントを準備するための簡単な装置
Summary
The use of a simple device to cut and ‘roll’ mouse intestines to rapidly prepare whole mount preparations is described.
Abstract
その後の分析や定量化のためのマウス小腸および結腸の全体のマウントの準備には時間がかかり、困難な場合があります。我々は、切断し、「ロール」のマウスの腸は、急速に手で達成できるものよりも優れ、均一な品質の全載標本を調製するために簡単な装置の使用を記載しています。装置4は、ステンレス鋼ロッド、切断ガイドとして作用するトップを保持するベースを備えます。ロッドは、小腸[三分のに分割]および結腸の内腔に挿入されます。ロッド、サンプルは、デバイスのベースに保持スロットにろ紙またはカードの一枚の上に配置されています。装置の上面は、その後に配置され、切断ガイドとして機能します。トップピースの中央に2つの傾斜部分は、ナイフまたはメスを導くために使用され、ロッドの上に縦方向に腸を切断します。腸の切片を切断した後、上部が除去され、カード、TISSUEとロッドを穏やか装置から取り出し、ベンチ上に置きました。ロッドはそっとろ紙またはカードの基礎となる作品に腸部分を平らにし、固執する横ロールバックされます。最終調製物は、次いで、調べまたは固定し、後の分析のために保存することができます。製剤は、正常または遺伝的に改変されたマウスモデルにおける腸の変化の研究のための貴重です。製剤は、損傷、前癌病変は（異常クリプト巣（ACFを）と枯渇病巣（のMDFを）ムチン）、炎症の影響（炎）の研究と定量化のために使用されており、ポリープまたは腫瘍。
Introduction
マウスおよび遺伝子改変マウス1-3は、様々な病理特に癌および胃腸管の炎症との関係の研究のための貴重なモデルです。これは多くの場合、小腸および/または結腸のホールマウントの準備が必要です。
ホールマウントの準備はオフセットはさみの精密ペアで行うことができますが、それはマウス 4当たり約20分を取ることができます。これは、マウスのかなりの量を必要とする比較研究のための非常に実用的ではありません（統計分析にグループ対象ごとに10を言います）。また、撮影した時間の長さは、組織の劣化の危険性を増大させます。この問題を軽減しようとすると、さまざまな切削製剤助剤の試験につながりました。最初は、切削溝と、金属プレートのシリーズに基づいているが、プレートは、組織を不明瞭にし、切断を制御することが困難でした。
conventiona私たちはその後、半分鉛筆の形状はメスのための良いガイド（ 図1）を作成する方法を見ることができるようリットル六面鉛筆は、最終的に、切断装置のためのインスピレーションを提供しました。これは、4切断ガイド5とフレームのデザインになりました。 図4の準備がはさみ準備とデバイスの準備の間の差を実証するように、このデバイスの有効性は劇的でした。
元のデバイスの頂部は、金属のいくつかの部分が、後のものから構成され、現在のモデルは、ジュラルミンの固体片から機械加工されました。ベースは、最高品質の高密度樹脂から機械加工しました。
デバイスは、それが大幅に高速化し、広範囲の用途を持つ製剤の品質と一貫性を向上させるように、マウス腸のホールマウントを調製するための非常に有用であることが証明されています。
Protocol
Representative Results
Discussion
2つの演算子が完全に6分以内にマウスを剖検することができるようにデバイスを大幅にプロセスをスピードアップします。これは明らかな肉眼的病変と計量と主要な臓器を固定するための目視検査が含まれます。また、オペレータは、すすぎブロットと胃、盲腸、小腸および結腸の重さと全体のマウントを準備することができます。フラット化組織は非常に迅速に固定され、したがって、分?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The evolution of the device started with somewhat different cutting prototype demonstrated at the Imperial Cancer Research Fund (ICRF) mouse club by Bass Hassan, following this there were several discussions with Rob Rudling and Nikki Mandir in the containment facility at ICRF Clare Hall. Jo Kitau of the mechanical workshop at ICRF constructed the initial versions and Andy Lucas designed and perfected the final model in the CRUK workshop in Oxford.
Materials
| Delrin | Ryan Plastics, Earls Barton, UK | N/A | High-density acetal resin similar material would suffice |
| Duralumin plate | Metal Supplies Ltd, Park Road,Dukinfield. SK16 5LP UK | N/A | Aluminium allow dating back to 1909 so alterative suppliers are available |
| Finished device(s) ready for use | Contact Dr Goodlad r.goodlad@imperial.ac.uk | N/A | Contact r.goodlad@imperial.ac.uk for supply details |
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