सभी प्रक्रियाओं LSUHSC संस्थागत पशु की देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित कर रहे हैं और एनआईएच के अनुसार बाहर किए गए "प्रयोगशाला जानवरों की देखभाल के सिद्धांतों।" 1. कृंतक दशानुकूलन और खाद्य प्रतिबंध प्रयोग के शुरू में 3 महीने पुरानी हैं कि वयस्क Wistar चूहों का प्रयोग करें। अकेले एक उलट 12 घंटा / प्रकाश अंधेरे चक्र पर तापमान और आर्द्रता नियंत्रित, AAALAC मान्यता प्राप्त पशु की देखभाल की सुविधा में एक लामिना का प्रवाह इकाई और हवा फिल्टर के साथ सुसज्जित पिंजरों में सदन चूहों (0600 घंटा पर बंद रोशनी)। 400 ग्राम – शरीर के वजन लगभग 380 हैं, जब तक स्वतंत्र रूप से पानी और मानक कृंतक चाउ प्रदान करें। इसके बाद चूहों खाद्य प्रतिबंधित और methamphetamine के जवाब के अधिग्रहण और रखरखाव की सुविधा के लिए प्रायोगिक सत्र के दौरान उनके मुक्त खिला शरीर के वजन के 85 से 90% पर बनाए रखें। प्रयोगात्मक भर आगमन से दैनिक घर पिंजरे कमरे में कृन्तकों हैंडलआदेश में सत्र शरीर के वजन रिकॉर्ड और दैनिक भोजन आवंटन समायोजित करने के लिए। लक्ष्य वजन हासिल कर रहे हैं एक बार, एक जीर्ण निबाह कंठ कैथेटर और intracranial उत्तेजक इलेक्ट्रोड के साथ प्रत्येक चूहे प्रत्यारोपण शल्य चिकित्सा के लिए तैयार करते हैं। 2. गले नस कैथीटेराइजेशन कैथेटर तैयारी 0.012 x 0.025 के एक भीतरी व्यास के साथ Silastic टयूबिंग की एक 13 सेमी लंबाई तैयार ', एक सिलिकॉन गेंद अतिरिक्त सिलिकॉन टयूबिंग और विद्युतदहनकर्म का उपयोग कर ट्यूबिंग के एक छोर से 4 सेमी बनाने के लिए, और शुष्क हवा की अनुमति देते हैं। कुछ मिनट के लिए नींबू से ली गई एक लाइमीन आधारित विलायक में ट्यूबिंग के दूसरे छोर डुबकी और विस्तार करने की अनुमति देते हैं। एक सही कोण पर एक स्टेनलेस स्टील का मार्गदर्शन प्रवेशनी तुला के लिए विस्तार ट्यूबिंग कनेक्ट करें। दंत एक्रिलिक सीमेंट का उपयोग biocompatible की जाली एक 1 "वर्ग के लिए स्टेनलेस स्टील का मार्गदर्शन प्रवेशनी की तुला आधार लंगर। इथेनॉल और आसुत wate के साथ अंदर और बाहर कैथेटर फ्लशआर। अवशिष्ट तरल बूंदों को खत्म करने ट्यूबिंग के माध्यम से हवा इंजेक्षन। हे / एन सूखे की अनुमति दें। बाँझ तकनीक सड़न रोकनेवाला सर्जिकल तकनीक का उपयोग कर एक समर्पित पशु शल्य सूट में सभी सर्जरी प्रदर्शन। एक आटोक्लेव का उपयोग कर के साधन और प्रत्यारोपण जीवाणुरहित और एक बाँझ तौलिया (एस) के साथ कवर या मेज पर निविड़ अंधकार कागज रखकर एक बाँझ क्षेत्र तैयार करते हैं। बाँझ दस्ताने पहनें और प्रक्रिया के दौरान बाँझ क्षेत्र पर सभी उपकरणों, प्रत्यारोपण शल्य चिकित्सा और धुंध रहते हैं। एकाधिक सर्जरी प्रदर्शन कर रहे हैं जब प्रक्रियाओं के बीच एक मनका अजीवाणु में 20 सेकंड के बाद एक शराब झाड़ू के साथ प्रत्येक साधन नीचे साफ कर लें। बेहोशी Pentobarbital द्वारा पीछा atropine (सल्फेट) (0.04 मिलीग्राम / किग्रा वर्ग) के साथ चूहों Pretreat (20 – 50 मिलीग्राम / किग्रा, आईपी) संज्ञाहरण प्राप्त करने के लिए। बाँझ पेनिसिलिन जी प्रोकेन निलंबन के साथ जानवरों (75,000 इकाइयों, आईएम) और एक एनाल्जेसिक एजेंट इंजेक्ट (carprofen, 5-10 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति या बाजारoprofen, 2 – सर्जरी के लिए तुरंत पहले 5 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति), क्रमशः perioperative संक्रमण और दर्द कम करने के लिए। कोई जवाब नहीं होता है, तो आगे बढ़ना है, जानवर के लिए एक उदारवादी पैर की अंगुली चुटकी देने से पर्याप्त संज्ञाहरण के लिए जाँच करें और। दोनों आंखों के लिए नेत्र स्नेहक लागू करें। शल्य साइट तैयारी सिर्फ कंधे ब्लेड जोड़ने के लिए एक लाइन के पीछे चूहे की पीठ पर एक 2 एक्स 2 सेमी पृष्ठीय पैच दाढ़ी। जबड़े की हड्डी और उरोस्थि के बीच सही गर्दन के क्षेत्र में एक 1 एक्स 1 सेमी उदर पैच दाढ़ी। Betadine समाधान के द्वारा पीछा शराब पैड के साथ मुंडा क्षेत्रों साफ कर लें। एक बाँझ तौलिया पर चूहे रखें और betadine आगे बढ़ने से पहले सूखे की अनुमति। कैथेटर आरोपण एक 10-ब्लेड चाकू का उपयोग कर पीठ पर midscapular क्षेत्र में कंधे ब्लेड जोड़ने के लिए एक लाइन के लिए एक चीरा समानांतर बनाओ। के लिए एक विमान बनाने के लिए अंतर्निहित संयोजी ऊतक से त्वचा को अलग करने के लिए एक hemostat का प्रयोग करेंकैथेटर आधार जाल। बाँझ खारा के साथ क्षेत्र में सिंचाई और अपनी पीठ पर चूहे मोड़ करने से पहले बाँझ धुंध के साथ कवर किया। सही जबड़े की हड्डी और एक 10-ब्लेड चाकू का उपयोग उरोस्थि के बीच एक विकर्ण चीरा। गले नस का पता लगाने के लिए अंतर्निहित संयोजी ऊतक से त्वचा को अलग करने के लिए एक hemostat का प्रयोग करें। नोट: गले नस सफेद / चांदी और चमकदार दिखाई देता है और महिलाओं की तुलना में नर चूहों में बड़ा है। नस एक रंग नीचे रखें उजागर नस के शीर्ष (समीपस्थ हिस्सा) के आसपास धीरे 4-0 रेशम सीवन टाई और गर्दन को पीछे की नस में धक्का। Inferolateral गर्दन की त्वचा के नीचे लेकिन मांसपेशियों के ऊपर एक सतही जेब बनाने के लिए संयोजी ऊतक अलग करें। हाथ और ऊपर की ओर पीछे वापस सुरंग द्वारा midscapular चीरा के लिए गर्दन चीरा से एक निष्फल trocar पुश। गर्दन अंत से और बाहर का कैथेटर में trocar के माध्यम से एक कड़ा गाइड तार ऊपर डालने से गर्दन को पीछे से कैथेटर चलाएँ। खींचेंगर्दन चीरा और पालन करेंगे जुड़ी बाहर का कैथेटर के माध्यम से वापस तार मार्गदर्शन। पहले से रखा समीपस्थ सीवन पर ऊपर खींच कर एक रंग सही गले नस अलग। नस का जहाज़ की छत पर एक छोटा सा आंशिक कटौती करने के लिए एक गेंद कैंची का प्रयोग करें। इसे खोलने के लिए नस चीरा में एक घुमावदार संदंश डालें। अलग संदंश रखते हुए लेकिन जगह में, के बारे में 2 संदंश सुझावों के बीच और नस में में कैथेटर टिप पास – यह सही प्रांगण के बाहर समाप्त होगा जहां 3 सेमी। बाहर का नस के आसपास 4-0 रेशम सीवन बांधने से कैथेटर सुरक्षित। अतिरिक्त स्थिरता को जोड़ने के लिए एक साथ एक "बॉक्स" गाँठ में समीपस्थ और बाहर का टांके बाँधो। Heparinized बाँझ खारा के साथ फ्लश कैथेटर और वापस खींचना रक्त सफल प्रत्यारोपण पुष्टि करने के लिए। समुद्री मील ऊपर 2 मिमी और गर्दन की त्वचा के तहत शेष समीपस्थ कैथेटर टक – टांके 1 ट्रिम। अपने को चुनने के लिए एक उपयुक्त सिवनी / विधि के साथ बंद हुआ। गैर absor हैंBable टांके या स्टेपल इस्तेमाल कर रहे हैं, वे सामान्य संज्ञाहरण के तहत 10-14 दिनों में हटा दिया जाना चाहिए। एक बाँझ कपास टिप applicator का उपयोग कर एंटीबायोटिक मलहम के साथ चीरा कवर। जाल बेस के विरोध कोनों में से दो पर absorbable sutures का उपयोग चमड़े के नीचे वापस ऊतकों को बाहर का कैथेटर / गाइड प्रवेशनी / मेष विधानसभा लंगर। बाधित, गैर उल्टे absorbable sutures का उपयोग गाइड प्रवेशनी चारों ओर वापस चीरा बंद करें। एक बाँझ कपास टिप applicator का उपयोग कर एंटीबायोटिक मलहम के साथ चीरा कवर। पश्चात की देखभाल एक 3 मिलीलीटर सिरिंज का उपयोग heparinized 0.9% बाँझ खारा समाधान के साथ कैथेटर फ्लश और clogging रोकने के लिए गाइड प्रवेशनी में एक गवाक्ष जगह है। प्रत्यक्षता बनाए रखने के लिए एक दैनिक आधार पर एक चूहे की कैथेटर फ्लश। इसके तत्काल बाद प्रक्रिया के बाद, शल्य सूट में एक हीटिंग पैड पर अपने घर पिंजरे में चूहे जगह है और चेतना और सहज आंदोलन वापसी तक निरीक्षण करते हैं। कॉलोनी के कमरे में बरामद चूहे लौटें और पांच से सात दिन इंट्राक्रेनियल सर्जरी से पहले पारित करने के लिए अनुमति देते हैं। संक्रमण के लिए जाँच और पशुओं के व्यवहार, उपस्थिति और गतिविधि के स्तर का मूल्यांकन सहित, वजन संभाल, और दैनिक उनकी सामान्य हालत का आकलन करें। कोई समस्या पैदा करता है, तो पशु संसाधन पशु चिकित्सक से परामर्श और किसी भी सिफारिश की उपचार परहेजों का पालन करें। जरूरत के रूप में perioperative दर्द के इलाज के लिए (5 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति – – 10 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति या ketoprofen, 2 carprofen, 5) एक एनाल्जेसिक एजेंट के साथ जानवरों इंजेक्षन। 3. Intracranial इलेक्ट्रोड नियुक्ति शल्य चिकित्सा की तैयारी धारा 2.2 में वर्णित के रूप में बाँझ शर्तों के तहत सभी सर्जरी प्रदर्शन। बेहोशी एक संज्ञाहरण प्रेरण कक्ष में पशु रखें और 1000 में चेंबर में गैस का प्रवाह isoflurance प्रदान – 5% पर सेट vaporizer के साथ 2,000 मिलीग्राम / मिनट। पशु लेटा हुआ है एक बार, चैम्बर एक से निकालनेएन डी गद्देदार स्टीरियोटैक्टिक ऑपरेटिंग मंच पर नाक शंकु में जगह है। नाक शंकु के लिए कक्ष से गैस का प्रवाह स्विच और 2 पर सेट vaporizer के साथ गैस चलाने – 3%। स्थिर श्वास और सर्जरी के दौरान उत्तेजना को कोई जवाब नहीं बनाए रखने के लिए जरूरत के रूप में vaporizer समायोजित करें। क्रमश: perioperative संक्रमण और दर्द कम करने के लिए बाँझ पेनिसिलिन जी प्रोकेन निलंबन के साथ चूहा (75,000 इकाइयों, आईएम) और तुरंत सर्जरी से पहले (0.5 मिलीग्राम / किग्रा अनुसूचित जाति के लिए buprenorphine 0.05) एक एनाल्जेसिक एजेंट इंजेक्षन। कोई जवाब नहीं होता है, तो आगे बढ़ना है, जानवर के लिए एक उदारवादी पैर की अंगुली चुटकी देने से पर्याप्त संज्ञाहरण के लिए जाँच करें और। दोनों आंखों के लिए नेत्र स्नेहक लागू करें। शल्य साइट तैयारी चूहे के सिर के ऊपर दाढ़ी और प्रक्रिया के दौरान उसके सिर स्थिर रखने के लिए कान सलाखों में चूहे जगह है। Betadine समाधान के द्वारा पीछा शराब पैड के साथ मुंडा क्षेत्र साफ कर लें। Betadine के आगे बढ़ने से पहले सूखे की अनुमति दें। इलेक्ट्रोड आरोपण बीच खोपड़ी समझ और थोड़ा संदंश के साथ कान के लिए पूर्वकाल और आधार भर में कटौती करने के लिए कैंची का उपयोग करें। इस manuveur मध्य खोपड़ी पर त्वचा के एक 1.5 एक्स 1 सेमी क्षेत्र को हटा देगा। परिमार्जन और कपाल की हड्डी का आवरण दूर करने के लिए खोपड़ी और एक घुमावदार संदंश के लिए नीचे कपाल की हड्डी का आवरण के माध्यम से एक परिधीय चीरा बनाने के लिए एक 10-ब्लेड का प्रयोग करें। , बाँझ खारा के साथ क्षेत्र में सिंचाई धुंध के साथ अतिरिक्त रक्त और खारा थपका, और खोपड़ी पर्वबिन्दु सहित पूरी तरह से तो बोनी स्थलों, शुष्क करने की अनुमति स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है। द्विपक्षीय सर्जरी के लिए, दो द्विध्रुवी प्लैटिनम iridium इलेक्ट्रोड, स्टीरियोटैक्टिक संचालन मंच के दोनों तरफ प्रत्येक इलेक्ट्रोड धारक में एक माउंट। शीर्षस्थान पर स्थिति में ~ 1 मिमी पहले इलेक्ट्रोड ले जाएँ और पूर्वकाल पीछे (एपी) के लिए स्टीरियोटैक्टिक निर्देशांक लिख और औसत दर्जे का पार्श्व डिजिटल डिस्प्ले पर दिखाया जाएगा, जो (माले) के पदों पर। वास्तव में एसके करने के लिए इलेक्ट्रोड टिप मत छुओull समारोह इलेक्ट्रोड नहीं रह जाएगा क्योंकि। अन्य इलेक्ट्रोड के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएं। अंतिम एपी की गणना और एमएल ब्याज के लक्ष्य संरचना के आधार पर निर्देशांक। प्रारंभिक dorsoventral (डीवी) प्राप्त डिजिटल डिस्प्ले पर समन्वय स्थापित करने के लिए सिर्फ खोपड़ी के ऊपर टिप के साथ इस स्थिति के लिए इलेक्ट्रोड ले जाएँ। ब्याज के लक्ष्य संरचना के आधार पर अंतिम डीवी गहराई की गणना। नोट: नाभिक खोल शीर्षस्थान के सापेक्ष निर्देशांक निम्नलिखित स्टीरियोटैक्टिक का उपयोग कर दवा-consummatory व्यवहार 8 में अपने ज्ञात भागीदारी को देखते हुए इस उदाहरण में निशाना बनाया गया था accumbens: एपी प्रविष्टि = समन्वय स्थापित + 1.6 [डिजिटल शीर्षस्थान पर समन्वय स्थापित प्रदर्शित किया] एमएल प्रविष्टि = [डिजिटल शीर्षस्थान पर समन्वय स्थापित प्रदर्शित किया] समन्वय बाईं / सही के लिए 2.4 ± डीवी गहराई = [डिजिटल एपी / एमएल प्रविष्टि पर खोपड़ी की सतह पर समन्वय स्थापित प्रदर्शित किया] – 8.5 एक स्थायी मा के साथ खोपड़ी की सतह पर प्रत्येक इलेक्ट्रोड का अनुमान प्रविष्टि स्थिति निशानrker। टक्कर या इस पैंतरेबाज़ी के दौरान इलेक्ट्रोड की नोक पर नहीं टिकते। प्रत्येक निशान पर एक 1.4 मिमी छेद ड्रिल करने के लिए एक गोल गेंद हीरे लेपित गड़गड़ाहट का प्रयोग करें। उच्च गति ड्रिल के साथ इंट्राक्रेनियल तिजोरी में खोपड़ी के माध्यम से छलांग लगाने के लिए नहीं सावधान रहना होगा। खोपड़ी दूर drilled किया गया है एक बार ड्यूरा पंचर करने के लिए एक घुमावदार संदंश का प्रयोग करें। खोपड़ी शिकंजा की नियुक्ति के लिए इलेक्ट्रोड प्रविष्टियों के पीछे एक अतिरिक्त चार स्थानों में 0.7 मिमी छेद ड्रिल करने के लिए एक गोल गेंद हीरे लेपित गड़गड़ाहट का प्रयोग करें। Midline के प्रत्येक पक्ष पर खोपड़ी, दो में चार 0.8 (व्यास) x 3.2 (लंबाई) मिमी स्टेनलेस स्टील शिकंजा जगह के लिए एक मैनुअल पेचकश का प्रयोग करें। वे आने वाले हफ्तों और महीनों के लिए जगह में कपाल टोपी का आयोजन करेगा कि प्रमुख बुनियादी ढांचा कर रहे हैं क्योंकि कसकर खोपड़ी में के बारे में उनकी आधी लंबाई तक इन शिकंजा सुरक्षित है। ध्यान से मैन्युअल प्रबंधन करता है कि घुंडी बदल द्वारा गणना डीवी गहराई तक मस्तिष्क में अपनी burrhole के माध्यम से पहली इलेक्ट्रोड डालने के Z समन्वयइलेक्ट्रोड धारक। इलेक्ट्रोड की नोक को अनुचित नुकसान को रोकने के लिए प्रति सेकंड 1/2 बारी करने के लिए लगभग बराबर दर से घुंडी बारी। मस्तिष्क में प्रवेश जब burrhole की बोनी बढ़त स्पर्श नहीं करता है इलेक्ट्रोड टिप सुनिश्चित करें। दंत सीमेंट के द्वारा पीछा burrhole और पीछे शिकंजा पर स्तरित सुपर गोंद का उपयोग करते हुए पहले इलेक्ट्रोड सुरक्षित। इस निर्माण पूरी तरह से सूख गया है, इसके धारक से इलेक्ट्रोड को हटा दें। दूसरे इलेक्ट्रोड के लिए प्रविष्टि और जोड़नेवाला प्रक्रिया को दोहराएं। सही त्वचा किनारे करने के लिए दंत सीमेंट लागू करें लेकिन इस कपाल सीमेंट टोपी लंबी अवधि loosens क्योंकि त्वचा के साथ ओवरलैप नहीं है। पश्चात की देखभाल Clogging रोकने के लिए इलेक्ट्रोड pedestals पर दो धूल टोपियां रखें। इसके तत्काल बाद प्रक्रिया के बाद, शल्य सूट में एक हीटिंग पैड पर अपने घर पिंजरे में चूहे जगह है और चेतना और सहज आंदोलन वापसी तक निरीक्षण करते हैं। वें बरामद चूहे लौटेंई कॉलोनी कमरे और पांच दिनों के प्रयोग शुरू करने से पहले पारित करने के लिए अनुमति देते हैं। संक्रमण के लिए जाँच और पशुओं के व्यवहार, उपस्थिति और गतिविधि के स्तर का मूल्यांकन सहित, वजन संभाल, और दैनिक चूहों 'सामान्य स्थिति का आकलन करें। कोई समस्या पैदा करता है, तो पशु संसाधन पशु चिकित्सक से परामर्श और किसी भी सिफारिश की उपचार परहेजों का पालन करें। जरूरत के रूप में perioperative दर्द के इलाज के लिए एक एनाल्जेसिक एजेंट (buprenorphine 0.05-1 मिलीग्राम / किलो सुप्रीम कोर्ट) के साथ जानवरों इंजेक्षन। (- 10 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति या ketoprofen, 2 – carprofen, 5 5 मिलीग्राम / किग्रा, अनुसूचित जाति) intracranial रक्तस्राव गैर स्टेरायडल दर्द दवाओं के उपयोग के साथ और अधिक प्रचलित हो सकता है तो इंट्राक्रेनियल सर्जरी के लिए perioperatively buprenorphine का उपयोग करें। 4. Operant उपकरण व्यवहार प्रयोगों को चलाने के लिए ध्वनि attenuating बाड़ों के भीतर निहित प्लास्टिक और स्टेनलेस स्टील कंडीशनिंग कक्षों का प्रयोग करें। वेंटिलेशन और सफेद हनोई की आपूर्ति करने के लिए एक निकास पंखा के साथ प्रत्येक बाड़े संगठनएसई असंगत लगता मुखौटा करने के लिए। प्रयोगात्मक डेटा प्रक्रियाओं कार्यक्रम और इकट्ठा करने के लिए एक व्यक्तिगत कंप्यूटर और एक व्यवहार सॉफ्टवेयर इंटरफेस प्रणाली का प्रयोग करें। सामान्य सेटअप प्रत्येक लीवर के ऊपर स्थित एक प्रोत्साहन प्रकाश के साथ चैम्बर के एक दीवार पर मुहिम शुरू की दो प्रतिक्रिया लीवर के साथ प्रत्येक प्रायोगिक कक्ष से लैस। जब दबाया यह एक प्रोग्राम परिणाम में यह परिणाम है कि इतनी लीवर में से एक "सक्रिय" लीवर नामित। दवा की उपलब्धता का संकेत है, हर स्फूर्त सत्र के दौरान रोशन करने के लिए सक्रिय प्रतिक्रिया लीवर ऊपर सीधे स्थित एक प्रेरणा प्रकाश कार्यक्रम। सामने की दीवार 5 सेकंड के लिए चल रहा है और प्रोत्साहन प्रकाश जा रहा पर घर में प्रकाश के साथ 2.8 सेकंड से अधिक methamphetamine (100 μl 0.9% सोडियम क्लोराइड में 0.05 मिलीग्राम / किग्रा / अर्क) की एक प्रेरणा वितरण में सक्रिय लीवर परिणाम पर एक प्रतिक्रिया है दूर एक 30 सेकंड मध्यांतर के लिए। सक्रिय लीवर पर प्रतिक्रियाओं गणना लेकिन वे कोई अनुसूचित Conse होनी चाहिए30 सेकंड मध्यांतर अवधि के दौरान quences। समापन के लिए, रिकॉर्ड निष्क्रिय लीवर पर प्रतिक्रियाओं लेकिन वे कोई अनुसूचित परिणाम नहीं देना चाहिए। 5. अंतःशिरा (चतुर्थ) मेथामफेटामाइन स्वयं प्रशासन प्रक्रिया जनरल तैयारी के रूप में जल्दी और शांति के रूप में संभव स्फूर्त कक्षों में लोड चूहों व्यवहार कलाकृतियों को कम करने के लिए। कृंतक की पीठ पर और स्फूर्त कक्ष के ऊपर निलंबित एक रिसाव प्रूफ द्रव कुंडा के लिए गाइड प्रवेशनी के लिए एक स्टेनलेस स्टील वसंत पट्टा देते हैं। ध्वनि attenuating बाड़े के बाहर स्थित एक मोटर चालित पंप में 20 मिलीलीटर दवा सिरिंज के लिए कुंडा से कनेक्शन ट्यूबिंग की अखंडता को सुनिश्चित करें। यह मध्यम खींच के साथ बंद स्लाइड नहीं होगा जब तक ऐसा करने के लिए, धातु कुंडा टिप और दवा सिरिंज सुई की नोक पर प्लास्टिक कनेक्शन ट्यूबिंग एक इंच से कम से कम एक चौथाई धक्का। अपेक्षाकृत अनर्गल मीटर की अनुमति के लिए कुंडा और पट्टा विधानसभा काउंटर के संतुलनजानवर की ovement। शुक्रवार के माध्यम से लगभग एक ही समय में प्रत्येक दिन सोमवार स्फूर्त सत्र का संचालन। अर्जन 4-5 दिनों के लिए लगातार दैनिक 6 घंटे की सत्र पर चतुर्थ methamphetamine के स्व-प्रशासन के तेजी से अधिग्रहण, चलाने के चूहों की सुविधा के लिए आदेश में। जैसे, कोई क्यू या दबाने के साथ परिणामों घटित इनाम (चूहों एक 30 सेकंड टाइम-आउट के द्वारा पीछा सक्रिय लीवर पर प्रत्येक प्रेस के लिए चतुर्थ methamphetamine की एक प्रेरणा प्राप्त है जो एक निश्चित अनुपात reinforcementduring की एफआर-1 + 30 सेकंड के समय पर इन सत्रों का संचालन या तो लीवर की)। नोट: यह प्रारंभिक लंबे समय तक और "आसान" पहुँच एक सप्ताह (चित्रा 3) के बराबर या उससे कम में व्यवहार लेने के महत्वपूर्ण दवा प्राप्त करने कृन्तकों के बहुमत में परिणाम होगा। रखरखाव प्रशिक्षण के दूसरे सप्ताह के दौरान शुक्रवार के माध्यम से दैनिक 2 घंटे की सत्र सोमवार को चलाने के चूहों को बनाए रखने और चतुर्थ METHAM को निखारने के लिएphetamine स्वयं प्रशासन। सुदृढीकरण का एक निश्चित अनुपात एफआर-1 + 30 सेकंड मध्यांतर के समय पर आचार सत्र। प्रत्येक सत्र के पार methamphetamine प्रस्तुतियों की कुल संख्या लगातार तीन सत्रों (चित्रा 4) और पहले 30 मिनट भर में सुई लेनी की संचयी संख्या दौरान सुई लेनी की संचयी संख्या से अधिक है के लिए कम से कम 10% बदलता है जब जवाब स्थिर, तीव्र दस्तावेज़ दूसरा 30 मिनट (चित्रा 5)। नोट: इस कसौटी चूहों नशे की लत व्यवहार 19 और बस आकस्मिक नहीं प्रयोग इंगित करता है कि सत्र की शुरुआत में एक दवा की लोडिंग पद्धति विकसित करता है। बाद सत्र प्रत्येक सत्र के अंत में, कृंतक की पीठ से पट्टा काट। रक्त के थक्के रोकने के लिए 800 आइयू streptokinase युक्त 0.9% खारा समाधान के 0.1 मिलीलीटर के साथ कैथेटर फ्लश। आर लौटने से पहले clogging रोकने के लिए प्रत्येक गाइड प्रवेशनी में एक गवाक्ष डालेंघर पिंजरों एटीएस। तुरंत प्रयोग के पाठ्यक्रम में बुधवार को एक प्रायोगिक सत्र के अंत के बाद कैथेटर की प्रत्यक्षता का परीक्षण करें। कैथेटर प्रत्यक्षता परीक्षण करने के लिए heparinized बैक्टीरियोस्टेटिक खारा युक्त, एक 22 जी सुई के साथ, एक 3 सीसी सिरिंज तैयार करें। सुई के लिए प्लास्टिक टयूबिंग की एक 4 से 6 इंच लंबा टुकड़ा और जानवर की पीठ पर कैथेटर प्रवेशनी विधानसभा की धातु पद के लिए दूसरे छोर के एक छोर संलग्न। एक स्पष्ट प्रवाह को सुनिश्चित करने और फिर वापस सिरिंज सवार आकर्षित करने के लिए खारा के 0.1 से 0.2 मिलीलीटर दिखे। कैथेटर पेटेंट है, तो यह चाहिए दोनों को आसानी से फ्लश और ट्यूबिंग में दिखाई जाएगी कि रक्त वापस खींचना। सवार को छोड़ दें और वापस कैथेटर के माध्यम से रक्त के सभी फ्लश करने के लिए एक और 0.2 मिलीलीटर पानी में डालना। रक्त वापस ले लिया नहीं किया जा सकता है, तो धातु पद से 3 सीसी सिरिंज और ट्यूबिंग हटा दें। Methohexital सोडियम युक्त, एक 22 जी सुई के साथ एक 1 सीसी सिरिंज तैयार, एक तेजी से अभिनयसंवेदनाहारी, आगे परीक्षण कैथेटर प्रत्यक्षता करने के लिए। सुई के लिए प्लास्टिक टयूबिंग की एक 4 से 6 इंच लंबा टुकड़ा और जानवर की पीठ पर कैथेटर प्रवेशनी विधानसभा की धातु पद के लिए दूसरे छोर के एक छोर संलग्न। जानवर की पीठ पर धातु पद से 1 सीसी सिरिंज और ट्यूबिंग हटाने जल्दी से 1.5 मिलीग्राम दिखे और। Heparinized बैक्टीरियोस्टेटिक खारा से भरा 3 सीसी सिरिंज जोड़ने और 0.1 उड़ेलना – 0.2 मिलीलीटर। पशु 3 सेकंड के भीतर मांसपेशियों टोन खो देता है, तो कैथेटर पेटेंट और कार्यात्मक है। Methamphetamine, मेथाम्फेटामाइन स्वयं प्रशासन के अधिग्रहण की विफलता है, और चूहे की निकासी कठिनाई को प्रतिकूल प्रतिक्रिया पते एक नुकसान अनुभाग के लिए पूरक फाइल "आम नुकसान" देखें। 6. मस्तिष्क उत्तेजना उपकरण डीबीएस प्रयोगों को चलाने के लिए 10 से 12 Plexi-कांच के बक्से में (12 x 18 x 18) (WxHxD) का प्रयोग करें। कड़ी अपारदर्शी के साथ बाहर की दुनिया में प्रत्येक बॉक्स कवरदेखने या एक दूसरे के साथ बातचीत से चूहों को रोकने के लिए बॉक्स के पीछे और पक्षों को शामिल किया गया है कि कागज। परीक्षक उत्तेजना सत्र के दौरान जानवरों देख सकते हैं पर्दाफाश स्पष्ट पैनल के सामने छोड़ दें। Airflow की अनुमति है जबकि भागने से चूहों को रोकता है कि एक अर्द्ध पारगम्य पैनल के साथ बक्से के सबसे ऊपर कवर। कृंतक सिर की टोपी और उत्तेजना प्रणाली के बीच बिजली के कनेक्शन की सुविधा के लिए प्रत्येक बॉक्स के ऊपर स्थित हैं कि commutators समर्थन करने के लिए इस पैनल का प्रयोग करें। डीबीएस प्रयोगों के लिए एक साथ कई जानवरों के लिए लगातार चालू वितरित कर सकते हैं कि एक उत्तेजना प्रणाली का प्रयोग करें। एक उपयोगकर्ता प्रोग्राम डिजिटल सिग्नल प्रोसेसर / संचार इंटरफेस के होते हैं कि एक प्रणाली का उपयोग, एक उत्तेजक, एक उत्तेजक बैटरी पैक, एक चैनल फाड़नेवाला बॉक्स, और साथ सॉफ्टवेयर (सामग्री शीट देखें)। प्रत्येक commutat के बेहतर इलेक्ट्रॉनिक कुरसी के लिए उत्तेजक के चैनल बंदरगाहों को जोड़ने के लिए कस्टम लंबाई तारों का उपयोग करेंया। नोट: अलग-अलग प्रयोगशाला पर निर्भर करेगा की जरूरत लंबाई। इन तारों पशु क्षेत्र के बाहर हैं और स्टेनलेस स्टील वसंत में शामिल किया जा की जरूरत नहीं है। स्टेनलेस स्टील वसंत के साथ कवर 16 में केबल का उपयोग कृंतक के सिर की टोपी पर प्रत्यारोपित इलेक्ट्रोड कुरसी के लिए कम्यूटेटर के अवर इलेक्ट्रॉनिक कुरसी कनेक्ट करें। केबल के सिर की टोपी पर महत्वपूर्ण तनाव के बिना बाड़े के हर क्षेत्र में मुक्त आवाजाही की अनुमति देने के लिए पर्याप्त लंबे होते हैं कि सुनिश्चित करें। नोट: सभी चार पैरों पर खड़ा जब चूहे के सिर होगा जहां मोटे तौर पर समाप्त हो जाती है कि एक केबल आमतौर पर पर्याप्त है। मस्तिष्क उत्तेजना प्रोग्रामिंग उत्तेजना मानकों (जैसे, तरंग, आवृत्ति, पल्स चौड़ाई, अंतर प्रोत्साहन देरी, वर्तमान आयाम) और इकट्ठा प्रयोगात्मक डेटा कार्यक्रम के लिए एक व्यक्तिगत कंप्यूटर और प्रोग्रामिंग सॉफ्टवेयर का प्रयोग करें। एक दृश्य प्रोग्रामिंग भाषा का उपयोग करना, प्रत्येक डिवाइस के अनुभव को पूरा करने के लिए प्रदर्शन करेंगे जो कार्य निर्दिष्टमानसिक endpoints और जो डेटा संग्रहीत और / या वास्तविक समय में देखने के लिए पेश किया जाएगा। इस विशेष परियोजना को चलाने के आदेशों चित्रा 1 में प्रदर्शन कर रहे हैं। प्रयोग के शुरू करने से पहले दृश्य नियंत्रण कक्ष (चित्रा 2) में वांछित आवृत्ति, पल्स चौड़ाई, और आयाम निर्दिष्ट करें। चूहों में उच्च आवृत्ति उत्तेजना के लिए विशिष्ट मानदंडों नैदानिक मानव गहरी मस्तिष्क उत्तेजना में इस्तेमाल उन लोगों के लिए समान हैं: 130 to180 हर्ट्ज की आवृत्ति, 60 से 90 मिसे के पल्स चौड़ाई और 250 μA 4,8-10 के लिए 100 की वर्तमान आयाम। नोट: एक कम मौजूदा कारण रहनुमा की तुलना में इसके आकार में कटौती करने के लिए कृंतक में प्रयोग किया जाता है। 7. गहरी मस्तिष्क प्रोत्साहन प्रक्रिया बक्से में चूहों का लोड करने के लिए, सिर की टोपी पर प्रत्येक इलेक्ट्रोड कुरसी के लिए कम्यूटेटर से स्टेनलेस स्टील वसंत केबल देते हैं। एक आवृत्ति पर वर्तमान के 5 μA चलाकर प्रत्येक इलेक्ट्रोड का मुक़ाबला टेस्ट2 सेकंड के लिए 1000 हर्ट्ज की। प्रतिबाधा के बराबर या 125 kOhm की तुलना में कम है, तो इलेक्ट्रोड चिकित्सीय उत्तेजना देने में सक्षम है, क्योंकि तब प्रयोग के साथ आगे बढ़ना है। प्रतिबाधा से अधिक 125 kOhm है इलेक्ट्रोड के उच्च प्रतिरोध संभावित उप उपचार के स्तर के लिए वर्तमान में काटना सकता है, क्योंकि प्रयोग से पशुओं को हटाने पर विचार करें। वे इलेक्ट्रोड केबल (एस), लेकिन किसी भी सक्रिय चिकित्सा प्राप्त नहीं करने के लिए संलग्न किया जाएगा, जिसके दौरान आदी होना के लिए एक या दो नकली सत्रों के माध्यम से चूहों चलाएँ। नकली परीक्षण किसी भी गैर विशिष्ट व्यवहार प्रभाव को समाप्त होगा। तुरंत एक नकली सत्र के बाद, चतुर्थ methamphetamine के स्व-प्रशासन की दैनिक 2 घंटे की सत्र के लिए स्फूर्त बक्से के लिए चूहों परिवहन। दो समूहों के एक सक्रिय उत्तेजना और एक दिखावा उत्तेजना पलटन में काउंटर संतुलन चूहों आधारभूत दवा का सेवन समूहों के बीच काफी अलग नहीं है कि इतनी। दैनिक डीबीएस सत्र प्रदर्शनवे सक्रिय बिजली के मस्तिष्क की उत्तेजना या 3 घंटा उनके समूह के काम पर निर्भर करता है के लिए कोई उत्तेजना या तो प्राप्त है, जिसके दौरान 5 दिनों के लिए कृंतक पलटन पर है। इसके तत्काल बाद चतुर्थ methamphetamine के स्व-प्रशासन की दैनिक 2 घंटे की सत्र के लिए स्फूर्त बक्से के लिए प्रत्येक डीबीएस सत्र, परिवहन चूहों के बाद। उत्तेजना पशुओं के व्यवहार में स्पष्ट परिवर्तन के कारण नहीं है सुनिश्चित करने के लिए सावधानी से प्रत्येक डीबीएस सत्र के कम से कम एक हिस्से के दौरान पशुओं का निरीक्षण करें। किसी भी असामान्य व्यवहार उत्तेजना के बाद / दौरान होते हैं, इन टिप्पणियों दस्तावेज़ देखभाल करने के लिए। नोट: लेखकों के लिए इस आलेख में वर्णित प्रयोग के दौरान महत्वपूर्ण व्यवहार परिवर्तन या खाना / पानी के सेवन में परिवर्तन नहीं देखा है। डीबीएस उपचार, बिजली के मानकों, और डीबीएस सत्र और परिकल्पना के आधार पर जरूरत के रूप में स्फूर्त सत्र के बीच समय की लंबाई को बदलने।