توضح هذه المخطوطة بروتوكول مفصلة لجمع البيانات حجم الضغط من الماوس.
فهم أسباب وتطور مرض القلب يمثل تحديا كبيرا للمجتمع الطب الحيوي. المرونة الوراثية من الفأرة توفر إمكانات كبيرة لاستكشاف وظيفة القلب على المستوى الجزيئي. حجم الفأر الصغير يفعل بعض التحديات في ما يخص أداء phenotyping القلب تفصيلا. جعلت التصغير والتطورات الأخرى في مجال التكنولوجيا العديد من طرق تقييم القلب ممكن في الماوس. من هذه، وجمع في وقت واحد من البيانات الضغط والحجم ويقدم صورة تفصيلية عن وظيفة القلب غير متوفرة من خلال أي طريقة أخرى. هنا يتم وصف إجراءات تفصيلية لجمع البيانات حلقة حجم الضغط. وشملت هو مناقشة المبادئ التي يقوم عليها القياسات والمصادر المحتملة للخطأ. وتناقش إدارة التخدير والنهج الجراحية بقدر كبير من التفصيل لأنها على حد سواء حرجة إلى الحصول على قياس الدورة الدموية جودة عاليةالصورة. وتطرق إلى مبادئ التنمية بروتوكول الدورة الدموية والجوانب ذات الصلة من تحليل البيانات.
لا يزال مرض القلب والأوعية الدموية لتكون سببا هاما من أسباب الوفيات والمراضة في جميع أنحاء العالم 1. أمراض القلب تمثل تحديات صعبة للغاية في تطوير علاجات جديدة. التقدم في مجال علم الوراثة تنص على إمكانية تحديد عدد وافر من المساهمين وراثية محتملة لتطور أمراض القلب. تتطلب طبيعة التكاملية لنظام القلب والأوعية الدموية التي يمكن التحقق من صحة هذه الأهداف الوراثية في النماذج الحيوانية سليمة. وقد أدت تكاليف المرونة ومساكن منخفضة الوراثية من الفأرة ضعها في صدارة لتقييم دور الفسيولوجية لجين معين. صغر حجم الماوس يعرض بعض التحديات الفريدة لتقييم وظيفة القلب. وهناك العديد من الطرائق التي يمكن أن توفر معلومات بشأن وظيفة القلب، ولكن فقط للقياس في وقت واحد ضغط البطين وحجم يسمح حجم الضغط (PV) تحليل حلقة وظيفة البطين. PV حلقات فقطوظيفة القلب آه ليتم تحليل مستقل لارتباطه الأوعية الدموية. عامل مهم في تحديد الدور الوظيفي للعنصر وراثي معين.
وقد استخدم تقييم حلقات الضغط حجم كلا تجريبيا وسريريا لسنوات عديدة ودراسات واسعة النطاق موجود فيما يتعلق بتحليل هذه البيانات يحدد 2،3. وقد تم تطويع التكنولوجيا حلقة PV على الماوس تقدما هاما لفهم علم وظائف الأعضاء القلب الفئران 4-6. القسطرة على أساس التقنيات الكهروضوئية حلقة زوجين محول الضغط واستخدام تصرف لتقدير حجم البطين. يتم تحديد حجم البطين من خلال دراسة التغيرات في حقل الكهربائية المولدة عن طريق القسطرة. يتم احتساب هذه النماذج طريقة البطين على شكل أسطوانة، ويعرف ذروة التي كتبها المسافة بين الأقطاب على القسطرة وفي دائرة نصف قطرها من التوصيل من مجال كهربائي عن طريق الدم فيالبطين 7-9. إشارة تصرف تقاس القسطرة اثنين من المكونات. الأول هو التوصيل عن طريق الدم. هذا يختلف مع حجم البطين ويشكل إشارة الأولية المستخدمة لتحديد حجم البطين. النتائج العنصر الثاني من التوصيل من خلال وعلى طول جدار البطين. وهذا ما يسمى تصرف الموازي ويجب إزالتها من أجل تحديد حجم البطين المطلق. هناك نوعان من النظم المتاحة تجاريا لجمع البيانات حجم الضغط في مختبر البحوث والطريقة المستخدمة لحساب وإزالة تصرف مواز هو الفرق الأساسي بينهما 6،10،11. تتطلب القسطرة تصرف حقن محلول ملحي مفرط التوتر لحساب تصرف الموازي. هذه الحقن يتغير عابر التوصيل من الدم في البطين، بينما يبقى التوصيل الجدار مستمر. من هذه البيانات فمن الممكن لتحديدمكون من إشارة تصرف الذي ينشأ من الدم وما يأتي من جدار البطين. يفترض هذا النهج أن تصرف مواز لا تختلف خلال دورة القلب. يعتمد أسلوب القبول على التغييرات المرحلة في المجال الكهربائي لتقييم مساهمة جدار البطين للإشارة حجم الشاملة. ويعتمد هذا الأسلوب على مجموعة متنوعة من ثوابت محددة سلفا لالموصلية من الدم وعضلة القلب لتحديد الحجم النهائي، ولكن يجعل التدابير المستمرة للتصرف الموازي خلال دورة القلب. كل من هذه الأنظمة توفر تقديرات جيدة من حجم البطين الأيسر والخلافات بينهما وليس من المرجح أن تكون كبيرة من الناحية الفسيولوجية. نموذج أسطواني من البطين وافتراضات أخرى تجعل هذه النهج القائم على القسطرة ليست دقيقة مثل طرائق أخرى، ولكن يتم توفير هذه البيانات على أساس ضربات تلو ضربات التي لا غنى عنها لتقييم التدابير الحمل مستقلة من وظيفة القلب.
يتم استخدام الإجراء المذكورة هنا في مختبري وقدمت بيانات لعدد كبير من الدراسات دراسة الآليات الفيزيولوجية المرضية الأساسية من التصنع عضلة القلب 12-18. الإجراء المبين أدناه هو واحد من اثنين من التي يمكن استخدامها للحصول على بيانات PV حلقة. في حين أن العديد من المبادئ قابلة للتطبيق لكلا النهجين، وسوف يركز هذا البروتوكول على نهج قمي الصدر المفتوح؛ وقد وردت تفاصيل بروتوكول الصدر مغلقة في أي مكان آخر 19،20. في حين سيتم وصف الإجراء بالتفصيل، والمبادئ الشاملة الهامة لفضح القلب بأقل ضرر إما إلى القلب أو الرئتين. في جميع أنحاء بروتوكول من المهم أن نتذكر أن هذا الإجراء غير البقاء على قيد الحياة وأن وجود التعرض جيدة للقلب من الأهمية بمكان لتحديد المكان المناسب للقسطرة.
هناك ثلاث خطوات حاسمة في هذا الإجراء: 1) وضع الأنبوب الرغامي والتهوية المناسبة، 2) وضع القسطرة الرابع الوريد، و3) تحديد المكان المناسب للقسطرة الكهروضوئية في البطين الأيسر. تحديد معدل التنفس المناسب هو جزء مهم من تقديم الدعم التنفس الصناعي. الفئران واعية عموما الحفاظ ?…
The authors have nothing to disclose.
يود الكاتب أن نعترف التمويل من NHLBI (K08 HL102066 وR01 HL114832).
Dumont 5/45 (2) | Fine Science Tools | 11251-33 | |
Vessel Dilating Forceps | Fine Science Tools | 18153-11 | |
Castroviejo Micro Dissecting Spring Scissor | Roboz Instruments | RS-5668 | |
Octogon Forceps – Serrated/Curved | Fine Science Tools | 11041-08 | |
Octogon Forceps – Serrated/Straight | Fine Science Tools | 11040-08 | |
Dissector Scissors- Heavy Blade | Fine Science Tools | 14082-09 | |
Transpore Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
3-0 Silk Suture | Fine Science Tools | 18020-30 | |
TOPO Ventilator | Kent Scientific | TOPO | |
Martin ME 102 Electrosurgical Unit | Harvard Apparatus | PY2 72-2484 | |
Syringe Pump | Lucca Technologies | GenieTouch | |
Stereomicroscope with boom stand | Nikon | SMZ-800N | |
Thermocouple Thermometer | Cole Parmer | EW-91100-40 | |
T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
ADVantage Pressure-Volume System | Transonic | ADV500 | |
Data Acquision and Analysis | DSI | Ponemah ACQ-16 |