Эта рукопись описывает подробный протокол для сбора данных давления объемом от мыши.
Понимание причин и прогрессирования сердечно-сосудистых заболеваний представляет собой серьезную проблему для биомедицинского сообщества. Генетический гибкость мыши обеспечивает большой потенциал для изучения функции сердца на молекулярном уровне. Небольшой размер мыши представляет некоторые проблемы в отношении проведения подробного сердца фенотипирования. Миниатюризация и другие достижения в области технологии сделали много методов оценки сердечной возможной у мышей. Из них одновременный сбор данных давления и объема обеспечивает детальную картину сердечной функции, которая не доступна через любой другой модальности. Вот подробная процедура сбора данных контура давления объема описывается. В комплект входит обсуждение принципов, лежащих в основе измерения и потенциальные источники ошибок. Обезболивающий управления и хирургические подходы обсуждаются в мельчайших подробностях, как они оба важны для получения измерения гемодинамического высокого качестваs. также рассматриваются принципы разработки протокола гемодинамика и соответствующие аспекты анализа данных.
Сердечно – сосудистые заболевания по- прежнему является важной причиной смертности и заболеваемости по всему миру 1. Болезни сердца представляют особенно сложные проблемы в разработке новых методов лечения. Достижения в области генетики обеспечивают возможность идентифицировать множество потенциальных генетических доноров к развитию сердечно-сосудистых заболеваний. Интегративный характер сердечно-сосудистой системы требует, чтобы эти генетические цели быть подтверждено в интактных животных моделях. Генетические гибкость и низкие издержки на жилье мыши принесли его на первый план для оценки физиологической роли данного гена. Небольшой размер мыши представляет некоторые уникальные проблемы для оценки функции сердца. Есть несколько условий, которые могут предоставить информацию о функции сердца, но только одновременное измерение давления и объема желудочка позволяет давление-объем (PV) анализ петли функции левого желудочка. PV петли всевл сердечной функции для анализа зависит от его соединения с сосудистой сетью; Важным фактором при определении функциональной роли конкретного генетического элемента.
Оценка контуров давления объема было экспериментально и клинически используется на протяжении многих лет , и обширная литература существует относительно анализа этих наборов данных 2,3. Адаптация технологии петли PV к мыши стала важным шагом вперед в понимании мышиной физиологии сердца 4-6. Катетер на основе технологии контура PV пара датчик давления и использование проводимости для оценки желудочковой объема. Желудочков объем определяется путем анализа изменений в электрическом поле, создаваемом с помощью катетера. Этот метод моделирует желудочек как цилиндр, высота которого определяется расстоянием между электродами на катетере и радиус вычисляется по проводимости электрического поля через кровь вжелудочек 7-9. Сигнал Проводимость измеряется с помощью катетера имеет два компонента. Первым из них является проводимость через кровь; это зависит от объема желудочка и представляет собой первичный сигнал, используемый для определения желудочковой объема. Второй компонент является результатом проводимости через и вдоль стенки желудочка. Это называется параллельная проводимость и должны быть удалены, чтобы определить абсолютный объем желудочков. Есть два коммерчески доступные системы для сбора данных давления объема в научно – исследовательской лаборатории и метода , используемого для расчета и удаления параллельной проводимости является основным различием между ними 6,10,11. Електропроводимостьи катетеры требуют инъекцию гипертонического раствора для расчета параллельной проводимости. Эта инъекция скоротечно изменяет проводимость крови в желудочке, в то время как проводимость стенки остается постоянной. Исходя из этих данных можно определитьсоставляющая сигнала проводимости, который берет свое начало из крови и что исходит от стенки желудочка. Такой подход предполагает, что параллельно проводимость не изменяется в течение сердечного цикла. Метод допуска зависит от фазовых превращений в электрическом поле, чтобы оценить вклад стенки желудочков к общему сигналу громкости. Этот метод основан на множестве заранее определенных констант для проводимости крови и миокарде, чтобы определить конечный объем, но делает непрерывные меры параллельной проводимости в течение сердечного цикла. Обе эти системы обеспечивают хорошие оценки объема левого желудочка и различия между ними, вероятно, не быть физиологически значимым. Цилиндрическая модель желудочка и других предположений делают эти катетерной подходы не столь точны, как другие методы, но эти данные предоставляются на основе ритм-по-ударом, который имеет важное значение для оценки нагрузки независимых мер сердечной функции.
Процедура , описанная здесь используется в моей лаборатории и предоставила данные для большого количества исследований по изучению основных патофизиологических механизмов дистрофических кардиомиопатия 12-18. Процедура, описанная ниже, является одним из двух, которые могут быть использованы для получения данных контура PV. В то время как многие принципы применимы для любого подхода, этот протокол будет сосредоточено на открытой грудной клетке верхушечного подхода; закрытый протокол грудной клетки был подробно описан в другом месте 19,20. В то время как процедура будет описана подробно, важные основополагающие принципы должны подвергать сердце с минимальным повреждением либо сердца или легких. На протяжении всего протокола, важно помнить, что это процедура непроявленности и имеющие хорошее воздействие на сердце является критически важным для правильного размещения катетера.
Есть три важных шагов в этой процедуре: 1) размещение интубационной трубки и соответствующей вентиляции, 2) размещение яремной IV катетера, и 3) надлежащее размещение PV катетера в левом желудочке. Определение подходящего дыхания является важной частью обеспечения респираторной поддержк?…
The authors have nothing to disclose.
Автор хотел бы отметить финансирование от NHLBI (K08 HL102066 и R01 HL114832).
Dumont 5/45 (2) | Fine Science Tools | 11251-33 | |
Vessel Dilating Forceps | Fine Science Tools | 18153-11 | |
Castroviejo Micro Dissecting Spring Scissor | Roboz Instruments | RS-5668 | |
Octogon Forceps – Serrated/Curved | Fine Science Tools | 11041-08 | |
Octogon Forceps – Serrated/Straight | Fine Science Tools | 11040-08 | |
Dissector Scissors- Heavy Blade | Fine Science Tools | 14082-09 | |
Transpore Surgical Tape | 3M | 1527-1 | |
3-0 Silk Suture | Fine Science Tools | 18020-30 | |
TOPO Ventilator | Kent Scientific | TOPO | |
Martin ME 102 Electrosurgical Unit | Harvard Apparatus | PY2 72-2484 | |
Syringe Pump | Lucca Technologies | GenieTouch | |
Stereomicroscope with boom stand | Nikon | SMZ-800N | |
Thermocouple Thermometer | Cole Parmer | EW-91100-40 | |
T/Pump Warm Water Recirculator | Kent Scientific | TP-700 | |
ADVantage Pressure-Volume System | Transonic | ADV500 | |
Data Acquision and Analysis | DSI | Ponemah ACQ-16 |