Telemetri kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Uzun süreli Tansiyon Ölçümü
Summary
The goal of this protocol is to assess systemic blood pressure in conscious freely moving mice using implantable radio-telemetry devices.
Abstract
Yeni vazoaktif ajanların geliştirilmesi sırasında, arteriyel kan basıncı izleme yeni önerilen ilaçların etkinliğini değerlendirmek için çok önemlidir. Nitekim, genetik olarak değiştirilmiş fareler kullanarak yeni potansiyel terapötik hedeflerin keşif odaklanan araştırma sistemik arteriyel basınç değişiminin güvenilir, uzun vadeli değerlendirilmesini gerektirmektedir. Şu anda, ayaktan farelerde kan basıncının uzun süreli ölçümleri elde etmek için altın standart arter kanülasyonu gerektiren implante radyo-vericileri kullanır. Bu teknik frenleyici veya veri örnekleme sırasında stres ve eserleri tanıtmak hayvanlar anestezi, tethering ihtiyacını ortadan kaldırır. Ancak, kateterizasyon yoluyla farelerde kan basıncı izleme nedeniyle damarların küçük boyutu oldukça zor olabilir. Burada radyo vericileri ve karotid arter c başarılı bir deri altı implantasyon için çok önemli anahtar pasajları göstermek için bir adım-adım bir rehber sunuyoruzFarelerde halka oluşturma. Ayrıca ameliyat sonrası bir iyileşme süresinden sonra serbestçe hareket farelerden alınan uzun süreli kan basıncı aktivitesi örnekleri arasında. Bu işlemi takiben aynı anda birden fazla hayvanlardan güvenilir doğrudan kan basıncı kayıtları sağlayacaktır.
Introduction
Hipertansiyon tartışmasız bu gelişmiş ve gelişmekte olan ülkelerde 1 hem önemli bir halk sağlığı sorunu olduğunu kardiyovasküler hastalıklar için önemli risk faktörlerinden biridir. Deneysel hipertansiyon birkaç hayvan modelinde, insanlarda 2 gözlenenlere benzer hipertansif yanıtları taklit etmek için geliştirilmiştir. Diğerlerinin arasında, ayaktan fare oluşumunu ve hipertansiyon kronik maruziyet sonuçları in vivo analizlerde izin hipertansiyon ilerlemesini incelemek için mükemmel bir model temsil eder.
Kan basıncı farelerde (BP) izleme fizyolojisi ve hipertansiyon ve kalp yetmezliği 3, 4 gibi hastalıkların patofizyolojisinde rol birkaç mekanizmaları açıklığa kavuşturabilmek için araştırmacılar yardımcı olmuştur. Gerçekten de, fare genomu manipülasyon hipertansiyon 5, 6 çalışmak için transgenik ya da gen hedefli modelleri uygun üretilmesini sağladı. Ancak, hatta nazik manipülasyonbilinçli farelerin sedasyon veya sakinleştirici kullanımı derinden kan basıncını 7 etkilerken potansiyel, veri toplama sırasında eserleri tanıtmak için heyecanlar neden olur. Bu yönleri özellikle önemlidir ve uzun vadeli BP izleme çalışırken göz önüne alınmalıdır.
Orada farelerde BP kaydetmek için çeşitli yollar vardır ve şu anda mevcut en yaygın teknikler arasında bir karşılaştırma, başka yerde 9 8 tartışılmıştır. Bununla birlikte, kan basıncı ölçümü için AHA tavsiyelerine BP intraarteriyel ölçüm yaparken, çünkü doğrudan zaman 10 uzun bir süre boyunca kan basıncını ölçmek için kabiliyetleri tercih edilir olduğu sonucuna varıldı. Arter basıncı direkt ölçümü ile birleştiğinde Radyo telemetri uyanık fizyolojik fonksiyonları izleme ve stres ve çevre bağlantılı eserler 9, 11 en aza indirerek serbestçe laboratuvar hayvanları taşımak için state-of-the-art yöntemidir.Radyo Telemetri otomatik olarak birden fazla bilinçli hayvanlardan kan basınçları, kalp atım hızı, vücut ısısını ve hayvan aktivitesini toplamak için yeteneği sunar.
Bu metodoloji birçok laboratuvarda çok yaygın olmasına rağmen, farelerde radyo-telemetri implantasyon teknik olarak zor olabilir. Burada farelerde bir basınç transdüktörü implant verilmektedir adım adım protokolünü gösterir. teknik fare vücutta prob deri altı ekleme içerir, boyun kateteri kanal ve sol karotis arter yoluyla aort arkı yakın ileri. Uzaktan yakalanan verileri bilgisayar monitöründe canlı gösterilmiştir. Veriler ayrıca "off-line" analiz için saklanır.
Protocol
Representative Results
Discussion
Implante edilebilir radyo telemetri son on yılda önemli ölçüde iyileşmiştir; Daha küçük prob boyutu hayvan için implant daha az travmatik yapar daha uzun bir pil ömrü maliyetlerini düşürmeye yardımcı olur ve bağımsız telemetre frekans alıcıları arasında karışma ortadan kaldırır. Telemetri serbestçe diğer tekniklerle 8,9 gerekli olan kısıtlama, insan etkileşimi, ya da anestezi kullanımı ile ilgili eserler olmadan hayvan hareket fizyolojik parametrelerin çeşitli toplamak i?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This work was supported by the National Institutes of Health (NIH/NHLBI) [Grant no. HL114869] and the support from UTHSC to SM.
Materials
| Small animal anesthesia system | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | low-Flow small animal anesthesia system | |
| Pad warmer and mouse termometer | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | allows monitoring body temperature, and homeothermic control in small animals. | |
| Binocular Microscope | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | KSCXTS-1121 | binocular body with boom stand pole and top LED. |
| Hemostat Forceps | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750451 | used to clamp blood vessels or tag sutures |
| Small metal Clips, 7mm, Stainless Steel | Kent Scientific Corp, Torrington, Connecticut, USA | INS750344 | used for skin closure |
| Betadine solution | Purdue Products L.P., Stamford, CT, USA | NDC-67618-150-01 | 10% povidone iodine topical solution |
| Normal saline solution | Abott Laboratories | 04930-04-10 | Needed for preventing tissue from drying. |
| Nair (Hair remover lotion) | Needed for fur removal from the site of incision/surgery. | ||
| Braide silk suture | Teleflex Medical OEM, Coventry, Connecticut, USA | Size 5.0, 6.0, 7.0 | |
| Ethanol | 2716 | 70% ethanol for disinfection | |
| Spring scissors | Fine Science Tool | 15000-10 | for minor dissection |
| Scissors (angled to side) | Fine Science Tool | 14063-011 | No. 3 handle |
| Scalpel blade | 2976-0 | No. 10 | |
| Forceps (curved) | Fine Science Tool | 11150-10 | for holding tissue |
| Forceps (straight) | Fine Science Tool | 11151-10 | for holding tissue |
| Needle holder | Fine Science Tool | 12002-12 | for suturing |
| Fine needle nose Forceps | Fine Science Tool | ||
| Isoflurane | Henry Schein Animal Health, Melville, New York, USA | a general inhalation anesthetic agent | |
| Sterilizer | Benchmark Scientific, 116 Corporate Blvd, South Plainfield, NJ, USA | B1000 | sterilize surgical tools in 5-10 seconds using infrared heating |
| Gauze Pads | Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA | JJ8513 | to use for wound cleaning, prepping, scrubbin or dressing. |
| Telemetry Device | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | DSI-PA-C10 | to record blood pressure in freely moving mice |
| Telemetry receiver system coumpled with a PC | Data Sciences International, St. Paul, MN, USA | ||
| small Tubing | Instech Laboratories, Plymouth Meeting, PA USA | BTPE-90 | |
| Vessel Cannulation Forceps, 13cm, 0.5mm OD | World Precision Instruments | 503374 | special vessel cannulation forceps. |
| Tissue adhesive | 3M Animal Care Products, St. Paul, MN, USA | NAC No.: 11380041 | use to close minor wounds, often eliminating the need for sutures and/or bandages |
| Weighing scale | BB300 | Precision Analytical Laboratory Balance |
References
- Danaei, G., et al. The preventable causes of death in the United States: comparative risk assessment of dietary, lifestyle, and metabolic risk factors. PLoS Med. 6 (4), e1000058 (2009).
- Dornas, W. C., Silva, M. E. Animal models for the study of arterial hypertension. J Biosci. 36 (4), 731-737 (2011).
- Henze, M., et al. Persistent alterations in heart rate variability, baroreflex sensitivity, and anxiety-like behaviors during development of heart failure in the rat. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 295 (1), H29-H38 (2008).
- Hoffmann, D. S., et al. Chronic tempol prevents hypertension, proteinuria, and poor feto-placental outcomes in BPH/5 mouse model of preeclampsia. Hypertension. 51 (4), 1058-1065 (2008).
- Lerman, L. O., Chade, A. R., Sica, V., Napoli, C. Animal models of hypertension: an overview. J Lab Clin Med. 146 (3), 160-173 (2005).
- Johns, C., Gavras, I., Handy, D. E., Salomao, A., Gavras, H. Models of experimental hypertension in mice. Hypertension. 28 (6), 1064-1069 (1996).
- Vatner, S. F., Braunwald, E. Cardiovascular control mechanisms in the conscious state. N Engl J Med. 293 (19), 970-976 (1975).
- Zhao, X., et al. Arterial Pressure Monitoring in Mice. Curr Protoc Mouse Biol. 1, 105-122 (2011).
- Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D’Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 286 (6), H2408-H2415 (2004).
- Kurtz, T. W., et al. Recommendations for blood pressure measurement in humans and experimental animals. Part 2: Blood pressure measurement in experimental animals: a statement for professionals from the subcommittee of professional and public education of the American Heart Association council on high blood pressure research. Hypertension. 45 (2), 299-310 (2005).
- Kurtz, T. W., et al. Recommendations for blood pressure measurement in animals: summary of an AHA scientific statement from the Council on High Blood Pressure Research, Professional and Public Education Subcommittee. Arterioscler Thromb Vasc Biol. 25 (3), 478-479 (2005).
