빠른 분자 탐지 및 인플루엔자 바이러스 A와 B의 차별화
Summary
우리는 분자 기반 인플루엔자 A, 신속하고 B 분석에 대해 설명합니다. 인플루엔자 분석은 분자 표지 프로브와 표적 탐지 뒤에 인플루엔자 특이 프라이머를 등온 증폭을 이용하여 15 분 이내에 각 대상을 감지합니다. 인플루엔자 A와 B의 분석은 사용자 친화적이고 수행 할 최소한의 실습 시간이 필요합니다.
Abstract
인플루엔자는 인간 인플루엔자 바이러스 A 및 B에 의한 전염성 호흡기 질환이며 질병률과 사망률 매년 상당한시킨다. 인플루엔자 A 및 B의 분석은 제 CLIA – 면제 분자 빠른 감기 시험 유효했다. 인플루엔자 A와 B 테스트는 분자 표지 프로브와 표적 탐지 뒤에 인플루엔자 특이 프라이머를 등온 증폭을 사용하여 작동합니다. 여기에, 냉동에 인플루엔자 (A)의 성능과 B의 분석은, 호흡 패널 분석 비교 하였다 표본 바이러스 수송 배지 (VTM)에 저장된 비 인두 면봉 (NPS)를 보관.
인플루엔자 A 및 B 시험의 성능은 호흡 패널 기준있어서 결과를 비교함으로써 평가 하였다. 총 인플루엔자 바이러스 A에 대한 민감도는 67.5 % (95 % CI (CI), 56.6-78.5)이었고, 특이도는 86.9 % (CI, 71.0-100)를했다. 인플루엔자 바이러스 B 테스트에 대한 민감도 및 특이도는 90.2 %였다 (CI, 68.5-100각각)와 98.8 % (CI, 68.5-100).
이 시스템은 완벽하게 통합 된, 폐쇄, 소형 풋 프린트 시스템에서 실행되는 다른 현재 사용 가능한 분자 분석 및 간단한, 피펫없는 절차보다 훨씬 짧은 테스트 시간의 이점이있다. 전반적으로,이 연구에서 평가 된 인플루엔자 A와 B의 분석은 현장 진료 신속 인플루엔자 진단 검사의 역할을 할 가능성이있다.
Introduction
인플루엔자 바이러스 감염은 질병률과 사망률 매년 1, 2, 3 상당량 초래한다. 복잡하지 않은 인플루엔자는 발열, 근육통, 두통, 비 생산성 기침 4, 5로 헌법과 호흡기 증상을 특징으로한다. 기본 동반 질환과 이전 개인, 어린이, 면역 저하 환자, 환자는 폐렴, 심근염, 중추 신경계 질환 또는 사망 6, 7과 같은 심각한 합병증에 대한 높은 위험이 있습니다.
인플루엔자 감염은 질병 심각도와 길이 8을 줄일 수 있습니다 증상 발현 48 시간 이내에 항 바이러스 치료의 메시지 관리에 다른 호흡기 바이러스에서 유일하다. 인플루엔자의 신속한 식별도있다불필요한 항생제 (9) (10)의 사용을 줄이기 위해 도시. 또한, 인플루엔자 감염 입원 환자는 적절한 감염 관리 예방 조치와 격리 된 방에 배치해야합니다. 임상 인플루엔자 구별하기 그러나, 비 인플루엔자 바이러스로 인한 호흡기 질환이 어려울 수있다. 이러한 이유로, 인플루엔자 신속하고 정확한 진단 시험은 임상 환자의 관리를 위해 매우 중요하다.
여러 분석은 검출 및 인플루엔자 바이러스의 식별을 위해 사용할 수 있습니다. 그들이 사용하고, 15 분 11 12 30 내 결과를 제공하는 간단한 때문에 신속한 인플루엔자 항원 검출 검사 (RIDTs)은 광범위 치료 시점 시험으로 임상에서 사용된다; 그러나, 그 감도가 크게 (10-80%) 제조사 및 인구에 따라 시험되는 변화와 인플루엔자 타입 subtyPE 13, 14, 15. 직접 형광 분석법 (DFAS)는 RIDTs 위에 우수한 감도를 제공하지만, 처리 시간이 더 (~ 3 시간)이며, 숙련 기술자 (16), (17)에 의해 완료되어야한다. 바이러스 성 문화는 인플루엔자 진단을위한 황금 표준되었습니다 모두 RIDTs 및 DFAS 18 감도를 향상되었습니다. 그러나, 인플루엔자 바이러스 성 문화는 환자 관리 19 원조에 자사의 유틸리티를 감소, 완료 2-14 D에서 걸릴 수 있습니다. 마지막으로, 핵산 증폭 검사 (NAAT)는 인플루엔자 진단에 새로운 골드 표준으로 배양 기술을 대체하고있다. NAAT는 몇 시간 인플루엔자를 검출하는 가장 큰 감도를 갖는 것으로 간주된다. 그러나 NAAT 가장 비싼 분석하고 5를 수행하는 특수 장비 및 기술자가 필요 <s업> 20, 21, 22, 23, 24, 25.
여기에 설명 된 인플루엔자 A와 B 분석은 쉽게 사용할 수있는 첫 번째 CLIA-면제 분자 빠른 독감 테스트입니다. 이 분석은 분자 표지 프로브와 표적 탐지 뒤에 인플루엔자 특이 적 프라이머와 등온 증폭을 사용하는 칼자국을내는 효소 증폭 반응 (NEAR)을 이용하여 작동합니다. 이 분석은, B에서 인플루엔자 A 차별화 설정하고 하나의 샘플을 처리하는 데 2 분을 필요로하며, 완료하는 데 15 분 총이 필요합니다.
여기, 우리는 인플루엔자 A & B 분석을위한 프로토콜을 제시한다. 또, 샘플 데이터 (바이러스 전송 매체에 저장 보관 된 시편 인두 면봉 (NPS)의 상기 인플루엔자 A 및 B의 성능 분석을 비교 VT 세트 제공다른 호흡기 병원체 패널 분석에 M).
Protocol
Representative Results
Discussion
인플루엔자 바이러스는 이환율과 사망률의 중요한 세계적으로 원인입니다. 인플루엔자의 신속하고 정확한 진단은 호흡기 시즌 동안 독감 발생을 관리하는 주요 열쇠 중 하나입니다. 기타 항원 – 기반 테스트 신속하고 수행하기 쉽다; 그러나, 낮은 민감도 (13)를 갖는다. 한편, 기존의 분자 테스트는 감도를 향상,하지만 수행하고 더 비용이 많이 드는 더 많은 경험 실험실 기술자?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
We thank the Clinical Microbiology Service staff of the Memorial Sloan-Kettering Cancer Center for help in collecting clinical specimens. This study was supported in part by a research agreement between MSKCC and Alere Scarborough (SK2013-0262).
Materials
| Alere i Instrument | Alere | NAT-000 (Global), NAT-024 (US) | |
| Alere i Influenza A & B 24 Test Kit | Alere | 425-000 (Global), 425-024 (US) | |
| Alere i Barcode Scanner | Alere | EQ001001 | |
| Alere Universal Printer | Alere | 55115 (Global), alereiprinter (US) | |
| 200 µL precision pipette | |||
| 200 µL disposable pipette tips | |||
| Viral transport medium | Remel | M4-RT |
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